pesquisa de bactérias em amostras de leite vendido in

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PESQUISA DE BACTÉRIAS EM AMOSTRAS DE LEITE VENDIDO IN
NATURA, NO MUNICÍPIO DE AVARÉ – SP.
INVESTIGATION OF PATHOGENIC BACTERIA IN MILK SAMPLES
SOLD IN NATURA IN AVARÉ CITY , SP, BRAZIL.
Emiliana Andrades FIORINI 1; Liliane de Oliveira DANTAS2; Silvia
Helena Pereira Vergili SGARBOSA2; Rodrigo Antônio Borto MININI2;
Camila Gonçalves GRECCO3.
1- Médico Veterinário autônomo; 2- Médico Veterinário, docente da
UNIP/campus Bauru; 3 – Discente da UNIP/campus Bauru.
RESUMO
O presente trabalho teve como objetivo pesquisar possíveis bactérias
patogênicas para saúde pública em amostras de leite vendidas in
natura. Para tanto, foram analisadas amostras de leite in natura
comercializadas no município de Avaré – São Paulo. Cada amostra foi
semeada em ágar MacConkey e ágar sangue ovino a 5% e incubados
até 72 horas em 37ºC em aerobiose. Após isoladas, as bactérias foram
submetidas a provas morfo-tintoriais e bioquímicas para identificação, e
a análise do perfil de sensibilidade a antimicrobianos foi realizada pelo
método de difusão em disco. Os microrganismos identificados foram
Escherichia coli, Klebsiella sp, Staphylococcus sp e Enterobacter sp. Os
antimicrobianos mais efetivos para as bactérias Gram negativas foram:
Cloranfenicol, Ácido Nalídixico, Norfloxacina com (100%), seguidos
pelas Gentamicina (80%) e Neomicina (75%). As cepas apresentaram
100% de resistência para a Oxacilina. Para a única bactéria Gram
positiva, os antimicrobianos eficazes foram Vancomicina, Cefalexina,
Eritromicina, Penicilina. Essa amostra bacteriana se mostrou resistente
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à Oxacilina e à Estreptomicina. Após fervura, as amostras de leite foram
semeadas outra vez, não houve nenhum crescimento bacteriológico.
Palavras-chave: bactéria, leite, saúde pública.
ABSTRAT
This study aimed to search possible pathogenic bacteria to public health
in milk samples sold "in natura". For this purpose, were analyzed "in
natura" milk samples market in the city of Avaré, São Paulo. Each
sample was plated on MacConkey agar plattes and 5% sheep blood
agar test and were incubated during 72 hours at 37°C under aerobic
conditions. After the isolation, the bacterias identification were submited
to morphological, dyeing and biochemical tests, and the susceptibility
profile analysis of antimicrobial was conducted by the disk diffusion
method. The microorganisms were identified as Escherichia coli,
Klebsiella sp, Staphylococcus sp and Enterobacter sp. The most
effective drugs for Gran negative bacteria were Chloramphenicol,
Nalidixic Acid, Norfloxacin(100%), followed by Gentamicin (80%) and
Neomycin (75%), but the strains showed 100% Oxacillin resistance. For
the only Gram positive bacteria sample, the effective antimicrobials were
Vancomycin, Cephalexin, Erythromycin and Penicillin. This bacteria
sample was resistent to Oxacillin and Streptomycin. After boiling, the
milk samples were plated to a temperature of 103ºC during two minutes
in 5% sheep blood agar and on MacConkey agar plattes. There was no
bacterial growth.
Keywords: Bacteria, milk, public health
INTRODUÇÃO
A comercialização de leite cru no Brasil é proibida, porém a venda do
produto tem sido realizada com frequência em alguns municípios
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(Queiroz, 1995), sendo registrados casos de seres humanos acometidos
por zoonoses veiculadas pelo leite e derivados (Vasconcelos, 2006).
-se o presente trabalho com o objetivo
de
conhecer
as
carac
comercializado clandestinamente no m
pode representar para
MATERIAL E MÉTODOS
Foram identificados seis pontos de venda de leite in natura no
município de Avaré-SP, de um foi comprado dois litros envazados em
garrafa pet (forma de armazenamento dos vendedores). As amostras
foram semeadas, in natura e pós-fervura, em ágar base acrescido de
5% de sangue ovino desfibrinado e em ágar MacConkey, encubada por
até 72 horas a 37ºC em aerobiose. Após o crescimento bacteriano, as
mesmas foram submetidas à coloração de Gram e testes bioquímicos
(Quinn et al.,1994). Os testes de sensibilidade antimicrobiana, in vitro,
foram realizados utilizando a técnica de difusão em ágar Müeller Hinton
(Bauer et al., 1966).
RESULTADOS
Houve crescimento bacteriano em todas as amostras analisadas:
amostra um e dois, foram identificadas Escherichia coli, amostra três,
Klebsiella pneumoniae, na quarta cresceu Staphylococcus spp., na
amostra cinco e seis observou-se crescimento misto de Escherichia coli
e Klebsiella pneuminiae e Klebsiella pneumoniae e Enterobacter sp.,
respectivamente. Não houve crescimento bacteriano em nenhuma
amostras pós-fervura.
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Os antimicrobianos mais efetivos para as enterobactérias foram:
Cloranfenicol, Ácido Nalídixico, Norfloxacina com 100% de sensibilidade,
seguindos pelas Gentamicina e Neomicina com 80% e 75% de
sensibilidade,
respectivamente.
Oxacilina
apresentou
100%
de
resistência. Para a amostra quatro, foram testados: Vancomicina,
Cefalexina, Eritromicina, Penicilina, todos com 100% de sensibilidade, e
Oxacilina e Estreptomicina com 100% de resistência.
DISCUSSÃO
Verificou-se isolamento de enterobactérias em 83,3% das amostras
analisadas, achado semelhante ao obtido por Queiroz (1995) e Badini et
al
(1996)
que
verificaram
a
ocorrência
de
81,7%
e
83,3%,
respectivamente, das amostras contaminadas por essas bactérias.
Em relação ao Staphylococcus spp., foi identificado em menor
frequência (16,6%) que os dados relatados na literatura, que está entre
40 a 53,1% das amostras contaminadas por esse microrganismo (Badini
et al., 1996; Queiroz, 1995).
Todos os isolados foram sensíveis a pelo menos três antimicrobianos
testados. A maior resistência foi observada contra Estreptomicina e
Oxaciclina, resultados semelhantes ao observado por Della Libera et al
(2010).
Dados
obtidos
na
literatura
alertam
para
cepas
de
Staphylococcus spp. resistentes à Penicilina e outros betalactâmicos
(Bandeira et al., 2005, Silvia et al. 2014), o que não foi observado em
nosso trabalho.
CONCLUSÃO
O leite comercializado in natura pode ser considerada um risco à
saúde pública uma vez que pode veicular microrganismos que são
patogênicos para o homem.
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