AULA PRÁTICA Nº 1: IDENTIFICAÇÃO DE CARBOIDRATOS OBJETIVO: Executar testes qualitativos para reconhecimento de glicídios. ANÁLISES: 01. Teste de Iodo O amido é formado por dois polissacarídeos (amilose e amilopectina) que interagem com o iodo formando uma coloração azul e vermelha respectivamente. Essa cor azul é devido à presença de iodo no interior da hélice da amilose a qual é mantida por ligações de hidrogênio. Esquema da reação: Hélice da amilose iodo (incolor) interação hélice da amilose-iodo (amarelo) amilose desespiralada (azul) + iodo Solução de lugol: pesar 1g de iodo e 5g de iodeto de potássio em 10mL de água destilada. Identifique 4 tubos de ensaio e siga o procedimento abaixo: Tubo Soluções 1 1,0 mL Amido 1% 2 1,0 mL Glicose 0,1 M 3 1,0 mL Suco de laranja 4 1,0 mL Leite com 1% de amido Adicione 3 gotas da solução de lugol Resultados Anote o resultado no quadro acima e interprete. Aquecer em banho-maria à 100ºC por 2 minutos. 02. Teste de Seliwanoff Esse teste distingue cetoses de aldoses. A reação baseia-se na formação do furfural e hidroximetilfurfural pela ação do ácido clorídrico sobre as cetoses que nessas condições são mais reativas que as aldoses, e na formação do complexo colorido vermelho devido à reação dos compostos furfúricos com o resorcinol sob aquecimento. Polissacarídeos e oligossacarídeos como sacarose que contém uma cetose são primeiramente hidrolisados para em seguida a cetose liberada reagir. As aldoses também dão reações positivas com um tempo de reação maior. Esquema da reação: HCl 3mol/L HCl 3mol/L Polissacarídeos ou Oligossacarídeos Monossacarídeos Compostos furfúricos Composto vermelho brilhante Resorcinol Identifique 5 tubos de ensaio e siga o protocolo abaixo: Tubo Soluções Solução Seliwanoff 1 0,5 mL Glicose 0,1 M 2 ml 2 0,5 mL Frutose 0,1M 2 ml 3 0,5 mL Suco de laranja 2 mL 4 0,5 mL Guaraná 2 ml 5 0,5 mL Solução de amido 2 % 2 mL Teste de Seliwanoff (cuidado! não aspirar! solução ácida!) Resultados Aquecer o tubo em banho-maria a 100ºC por 3 minutos Anote o resultado no quadro acima e interprete. 03. Teste de Benedict : Este teste identifica açúcares redutores. Baseia-se no uso de solução cuproalcalina capaz de oxidar o grupo aldeído (redutor) dos açúcares a ácido carboxílico. O reativo de Feeling é fortemente alcalino e contém íons cúpricos formando um complexo íon cúprico-tartárico de sódio e potássio. Nessas condições, o cobre é reduzido por ação de açúcares redutores formando-se óxido cuproso, conforme a seguinte reação: Preparo do reativo de Fehling: Solução A: Pesar 24,639g de sulfato de cobre pentahidratado em béquer de 100mL. Transferir, com o auxilio de água destilada, para balão volumétrico de 1000mL. Completar o volume e agitar. Guardar em frasco de vidro. Solução B: pesar 173g de tartarato duplo de sódio e potássio e 125g de NaOH. Transferir para balão volumétrico de 1000mL. Completar o volume com água destilada e agitar. Guardar em frasco de polietileno. Em béquer de 50mL coloque 10mL da solução A e 10mL da solução B e homogeinize. Identifique 4 tubos de ensaio e siga o protocolo abaixo: Tubo Soluções Solução Resultados Benedict 1 1,0 mL Glicose 0,1 M 2,5 mL 2 1,0 mL Suco de laranja 2,5 mL 3 1,0 mL Guaraná 2,5 mL 4 1,0 mL Solução de amido 2% 2,5 mL 5 1,0 mL de solução de sacarose a 2,5 mL 20% Aquecer em banho-maria a 100ºC durante 05 minutos e deixar esfriar espontaneamente. Anote o resultado no quadro acima e interprete. RESPONDA: 1) Qual o objetivo do teste de Seliwanoff? Conclua quanto à presença de cetose ou aldose nas amostras de suco de laranja, guaraná e amido a 2% de acordo com os resultados obtidos. 2) Sabendo-se que as soluções que contém amido deram positivo para o teste do iodo, e as demais negativo, conclua quanto às reações que ocorrem neste teste. 3) Explique, com base na composição das amostras, o motivo da glicose, suco de laranja e guaraná darem resultado positivo para o teste de Benedict e o amido e sacarose negativo.