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JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2014 7 (14): 508 – 522.
Sinais clínicos e alterações necroscópicas em filhotes de
Eunectes murinus (Linnaeus, 1758) infectados com bactérias
Gram negativas multirresistentes
Clinical and anatomic-pathological findingsin young hatchling
Eunectes murinus infected with multiresistant
Gram negative bacteria
Signos Clínicos y alteraciones necroscópicas en crías de
Eunectes murinus(Linnaeus, 1758) infectados con bacterias
Gram negativas multiresistentes
Paulo Roberto Bahiano Ferreira*1, Victor Pereira Curvelo2, Leane
Queiroz Souza Gondim3, Gilson Oliveira Santana4 e
Alberto Vinícius Dantas Oliveira5
Resumo
Em vida livre ou em conservação ex situ, relata-se uma alta taxa de
mortalidade de Eunectes murinus filhotes. As bacterioses são responsáveis
por altas taxas de morbidade e mortalidade em serpentes cativas,
principalmente aquelas provocadas por agentes multiresistentes aos
fármacos utilizados na clínica de répteis.
anatomopatológicas
associados
ao
Sinais clínicos e alterações
isolamento
de
bactérias
multirresistentes foram descritos numa rotina de manejo de 15 filhotes de E.
murinus mantidos em conservação ex situ. No decorrer do processo, após o
óbito de 4/15 serpentes sem causa definida, todas foram acompanhadas
1
Médico Veterinário. Mestre em Ciência Animal nos Trópicos – Escola de Medicina Veterinária / UFBA.
Técnico do Setor de Herpetologia – Parque Zoobotânico Getúlio Vargas – PZGV (BA). *Email:
[email protected].
2
Médico Veterinário. Técnico do Setor de Clínica e Quarentena – PZGV (BA).
3
Médica Veterinária. Doutoranda em Ciência Animal nos Trópicos – Escola de Medicina Veterinária /
UFBA. Técnica do Setor de Nutrição – PZGV (BA).
4
Médico Veterinário. Técnico do Setor de Herbívoros – PZGV (BA).
5
Médico Veterinário. Coordenador Técnico do PZGV (BA).
508
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clinicamente através de observações diárias, suspeitando-se de bacteriose
em 5/11 indivíduos. Os animais apresentavam escamas com conteúdo
caseoso, sendo coletadas e enviadas para um laboratório de referência para
o diagnóstico microbiológico. As Salmonella spp., Pseudomonas aeruginosa
e Citrobacter freundii apresentaram resistência para todos os antibióticos
testados no antibiograma:
ciprofloxacina,
gentamicina,
tobramicina,
tetraciclina, doxiclina ou enrofloxacina. Em contrapartida, a Pseudomonas
spp. apresentou sensibilidade para todos os antibióticos anteriormente
mencionados. Mesmo após o tratamento estabelecido, 90,9% (10/11) dos
animais vieram a óbito, constatando infecções pulmonar e hepática em dois
indivíduos necropsiados, sendo isoladas Pseudomonas aeuruginosa e
Enterobacter spp. em amostras de fígado e pulmão de ambos. O isolamento
de bactérias de microbiota oral e/ou intestinal de serpentes e com perfil de
multirresistência, associado à doença e ao óbito de 93,3% (14/15) dos
filhotes de E. murinus indica a sensibilidade dessa espécie às bacterioses
por agentes oportunistas ou patogênicos Gram negativos.
Palavras-chave: anaconda, bacteriose, óbito, herpetocultura, pneumonia
Abstract
A high mortality rate of baby snakes Eunectes murinus in the wild or in ex
situ conservation has been reported. Bacterial diseases are responsible for
high morbidity and mortality rates in captive snakes, especially those caused
by multi-resistant agents to drugs used in the reptile medicine. Clinical signs
and pathological-anatomical findings associated with the isolation of multiresistant bacteria were described in routine management of 15 baby snakes
E. murinus kept in ex situ conservation. After the death of 4/15 of the snakes
from
undetermined
causes,
all
clinically
monitored
through
daily
observations, bacterial disease was suspected in 5/11 individuals. The
animals had scales with caseous content collected and sent to a reference
laboratory for microbiological diagnosis. The Salmonella spp., Pseudomonas
aeruginosa and Citrobacter freundii were resistant to all antibiotics tested in
the antibiogram: ciprofloxacin, gentamicin, tobramycin, tetracycline, and
enrofloxacin or doxiclin. However, Pseudomonas spp. showed sensitivity to
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all antibiotics mentioned above. Even after the established treatment, 90.9%
(10/11) came to death, from lung and liver infections, isolated Pseudomonas
aeuruginosa and Enterobacter spp.in two individuals necropsied. Isolation of
bacteria from oral and/or intestinal microbiota of snakes and profile of multidrug resistance associated with the disease and death of 93.3% (14/15) E.
murinus puppies, indicates the susceptibility of this species to opportunistic
and pathogenic Gram-negative bacteria infection.
Key words: anaconda, bacteriosis, death, herpetoculture, pneumonia
Resumen
En vida libre o en conservación ex situ, se reporta una alta tasa de mortalidad
de crías de Eunectes murinus. Las infecciones bacterianas son
responsables por altas tasas de morbilidad y mortalidad en serpientes
cautivas, principalmente aquellas provocadas por agentes multiresistentes a
los fármacos utilizados en la clínica de reptiles. Los signos clínicos y las
alteraciones anatomopatológicas asociadas al aislamiento de bacterias
multiresistentes fueron descritos en una rutina de manejo de 15 crías de E.
murinus mantenidos en conservación ex situ. En el curso del proceso,
después de la muerte de 4/15 serpientes sin causa definida, todas fueron
acompañadas
clínicamente
a
través
de
observaciones
diarias,
sospechándose de infección bacteriana en 5/11 individuos. Los animales
presentaban escamas con contenido caseoso, siendo recogidas y enviadas
para un laboratorio de referencia para diagnóstico microbiológico.
Salmonella
spp.,
Pseudomonas
aeruginosa
y
Citrobacter
freundii
presentaron resistencia a todos los antibióticos testados en el antibiograma:
ciprofloxacina,
gentamicina,
tobramicina,
tetraciclina,
doxiciclina
y
enrofloxacina. Por otra parte, la Pseudomona spp. presentó sensibilidad
para todos los antibióticos mencionados anteriormente. Después del
tratamiento, 90,9% (10/11) de los animales murieron, constatándose
infecciones pulmonar y hepática en los individuos necropciados, siendo
aisladas Pseudomonas aeuruginosa y Enterobacter spp. en muestras de
hígado y pulmón. El aislamiento de bacterias de microbiota oral y/o intestinal
de serpientes y con perfil de multiresistencia, asociado a la enfermedad y
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muerte de 93,3% (14/15) de las crías de E. murinus, indica la sensibilidad
de esta especie a las infecciones bacterianas por agentes oportunistas o
patogénicos Gram negativos.
Palabras-clave: anaconda, infección, bacterias, muerte, herpetocultura,
neumonía
Introdução
A Eunectes murinus é uma
serpente
constritora,
de
hábito
normalmente utilizados na clínica de
répteis,3,4,5.
semiaquático, noturna e carnívora,
que ocorre na América do Sul com
ampla
distribuição
no
território
brasileiro¹. Em ambiente cativo, é
relatada
uma
alta
taxa
de
mortalidade de filhotes2. Trabalhos
científicos
sobre
patologias
e
possível causa mortis em E. murinus
são
escassos,
sendo
estes
importantes para o aprimoramento
do sistema de manejo adotado nas
instituições conservacionistas.
As
bactérias
podem
ser
transmitidas para as serpentes via
alguma porta de entrada, como
feridas provocadas por trauma e o
contato com ambientes, tratadores e
instrumentais
clínico-cirúrgicos
contaminados.
Contudo,
a
imunodepressão, a desnutrição, a
má adaptação ao ambiente cativo,
bem
como
a
manutenção
em
temperaturas e umidades distantes
da zona de conforto térmico são
As enfermidades infecciosas
considerados
fatores
predisponentes
têm sido indicadas como um dos
para o desenvolvimento de doenças
principais fatores responsáveis pelas
bacterianas em répteis5.
altas
taxas
de
morbidade
e
mortalidade em serpentes cativas,
destacando-se as bacterioses por
agentes
Gram
negativos,
geralmente
multirresistentes
aos
medicamentos de amplo espectro
Geralmente,
as
bactérias
provocam nos répteis um quadro
clínico com lesões abscedativas
associadas
com
estomatite,
pneumonia e dermatites, podendo
evoluir para a sepse resultando em
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óbito por choque septcêmico4,5. Por
diariamente com hipoclorito de sódio
isso, é importante o conhecimento
1%
das diferentes técnicas de coleta e a
posterior enxágue. No primeiro mês,
origem
os animais não apresentaram apetite
das
amostras
para
a
durante
10
minutos
realização de cultura bacteriana e
sendo,
antibiograma, com o intuito de um
procedimento
diagnóstico eficaz e capaz de auxiliar
assistida
semanalmente,
a
neonatos
de
terapêutica
adotada
para
o
paciente5.
assim,
realizado
de
com
o
alimentação
com
camundongo
da
espécie Mus musculus criados no
No presente trabalho, são
descritos sinais clínicos e alterações
anatomopatológicas associados ao
isolamento de bactérias multirresistentes
em filhotes de E. murinus cativas.
biotério da própria instituição. No
decorrer do processo, após o óbito
de quatro (4/15) serpentes sem
causa definida, os animais foram
acompanhados clinicamente através
de
observações
suspeitando-se
diárias,
de
infecção
bacteriana em cinco dos 11 animais
Relato de caso
examinados, os quais apresentavam
No mês de junho de 2012 foi
inicialmente escamas elevadas e em
registrado o nascimento de 15
destaque
animais da espécie E. murinus no
circunvizinhas
Parque Zoobotânico Getúlio Vargas
despigmentadas (Figura 2) ou com
(PZGV), Bahia (BA). Desde então,
alteração de cor padrão da espécie,
foi criada uma rotina de manejo para
além da presença de escamas com
os filhotes, os quais eram mantidos
conteúdo
em um sistema semi-intensivo, sem
(Figura 3), que foram coletadas e
controle de temperatura e umidade,
enviadas
porém individualmente em caixas
Diagnóstico Veterinário (CITIVET II),
plásticas
com
Salvador, Bahia, para o isolamento
água,
bacteriano e determinação do perfil
disponibilidade de luz solar, sendo
de resistência (Tabela 1). Contudo,
as
inicialmente
organizadoras,
ambiente
seco
mesmas
e
higienizadas
em
relação
(Figura
de
aspecto
para
foi
o
às
1),
caseoso
Centro
realizada
de
a
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antibioticoterapia
com
sete
mL/kg/q48h) conforme o protocolo
aplicações por via intramuscular (IM)
terapêutico padrão do Setor de
ou oral (VO) de dois medicamentos,
Clínica e Quarentena do Parque
enrofloxacina 2,5% (10 mg/Kg/48q
Zoobotânico
IM) em 11 indivíduos, numa primeira
Entretanto, entre os meses de
etapa, e logo após a azitromicina (40
agosto e outubro, mesmo após o
mg/Kg/q48h VO) em sete indivíduos,
tratamento
ambas acompanhadas de aplicação
(10/11) dos animais não resistiram e
tópica de creme de sulfadiazina de
vieram
prata 1% direto nas lesões das
infecções bacterianas pulmonar e
escamas de cada animal. Como
hepática em dois indivíduos na
suporte, ainda foram feitas três
necropsia (Figura 4) e no exame
aplicações
de
microbiológico dos fragmentos dos
vitaminas
B
complexo
injetável
de
(0,1
a
Getúlio
Vargas.
estabelecido,
óbito,
90,9%
constatando
órgãos acometidos (Tabela 2).
Figura 1: Indivíduo 1 apresentado inicialmente uma escama elevada em
destaque (seta).
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Figura 2: Indivíduo 14 apresentando escamas despigmentadas (seta amarela)
ou com conteúdo de aspecto caseoso (seta vermelha).
Figura 3: Indivíduo 8 apresentando múltiplas escamas com coloração
amarelada com conteúdo de aspecto caseoso (seta).
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Figura 4: Presença de múltiplos pontos brancos no parênquima hepático do
indivíduo 4, sendo isolada a Enterobacter spp. após o envio da amostra para o
exame microbiológico.
Discussão
comprometimento
Foram isoladas seis espécies
de bactérias Gram negativas das
escamas dos cinco indivíduos com
suspeita de enfermidade bacteriana,
entre elas a Acinetobacter spp. e
Salmonella spp no indivíduo 1,
Pseudomonas
aeruginosa
no
indivíduo 6, Citrobacter freundiino
indivíduo 7, Klebsiella pneumonae
no indivíduo 8 e Pseudomonas spp.
no indivíduo 14 (Tabela 1).
apresentaram
de
escamas, que apresentavam uma
coloração amarelada, preenchidas
com conteúdo de aspecto caseoso,
algumas
elevadas
ou
despigmentadas. Já os indivíduos 6
e 14 manifestaram elevações e/ou
despigmentação de escamas. No
geral, as lesões eram superficiais, as
quais permaneciam na pele antiga
após a muda, dando a impressão de
uma aparente resolução clínica,
porém sendo constatada a recidiva
No geral, os indivíduos 7, 8 e
14
multifocal
o
entre uma e duas semanas após o
evento da troca de pele.
Em
515
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infecções
fúngicas
também
são
geralmente
é
reportado
em
observadas alterações de cor nas
infecções de pele de quelônios8,
escamas de E. murinus, porém estas
contudo a Pseudomonas aeruginosa
aparentam ser bem características,
já foi isolada em serpentes com
sendo descrito o aparecimento de
enterite necrosante mantidas em
pontos
zoológicos12.
escuros
de
coloração
vermelha em animais infectados com
Trichophyton sp., Verticillium sp., e
Alternaria sp6.
Mesmo
com
o
estabelecimento
da
antibioticoterapia sistêmica e tópica,
As bactérias Salmonella spp,
Pseudomonas
aeruginosa
e
90,9% (10/11) dos filhotes de E.
murinus
vieram
a
óbito,
Citrobacter freundii apresentaram
demonstrando
resistência para todos os antibióticos
protocolo terapêutico adotado sobre
testados no antibiograma (Tabela 1).
os
O índice de mutação é intenso nas
utilizando
bactérias Gram negativas, sendo
consolidadas13.
identificadas diferenças genotípicas
salientar
entre microrganismos da mesma
bactérias
espécie, com isolamento de diversas
patogênicas em todos os cinco
cepas com perfis de resistência
indivíduos amostrados e, dentre
distintos7. Os diferentes sorotipos de
aquelas,
Salmonella
multirresistentes,
são
frequentemente
a
indivíduos
ineficácia
doentes,
doses
que
do
mesmo
de
antibióticos
É
importante
foram
isoladas
oportunistas
83,3%
ou
(5/6)
eram
dificultando
a
associados à microbiota entérica ou
resolução clínica dos casos. No
oral normal dos répteis8,9, inclusive
geral,
podendo ser transmitida para seres
multirresistentes são isoladas em
humanos10. Entretanto, a depender
répteis,
da virulência da cepa isolada, as
comunidade médica em relação às
Salmonella spp. podem causar um
zoonoses
processo de doença secundária e
antibioticoterapia adotada14,15,16.
óbito em algumas espécies de
serpentes,
dentre
elas
a
E.
murinus11. O gênero Citrobacter
diversas
A
antibiótico
o
que
e
bactérias
preocupa
limitações
enrofloxacina
de
amplo
é
a
na
um
espectro
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JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2014 7 (14): 508 – 522.
recomendado
bacterianas
contra
por
infecções
Acinetobacter,
Citrobacter
freundii
Enterobacterem
répteis4.
sp.,
ainda
apresentando
uma
atividade variável contra Samonella
e
sp., Enterobacter spp. e Kleibsiella
Este
spp. Entretanto, a P.aeruginosa tem
antibiótico foi utilizado inicialmente
uma frequente resistência sobre este
até o resultado do isolamento e
medicamento17.
conhecimento do perfil de resistência
animais
das bactérias, pois com essas
sobreviveu,
informações
encaminhado
a
antibioticoterapia
Entre
tratados,
os
sete
apenas
sendo
o
para
um
mesmo
a
sua
seria readequada. Mesmo com a
manutenção em recinto de exibição,
utilização de doses recomendadas
com acesso a substrato de terra,
pela literatura, o medicamento não
grama, pedras, troncos, uma piscina
foi capaz de debelar a infecção
central,
devido à resistência das cepas
arbóreas e exposição solar.
isoladas, sendo registrada a morte
de quatro indivíduos, inclusive o n° 7,
que estava infectado com uma cepa
de C. freundii multirresistente. Em
contrapartida, os aminoglicosídeos
são os antibióticos de eleição contra
Pseudomonas
Klebsiella
aeruginosa
pneumoniae3,
mas
e
a
Pseudomonas aeruginosa isolada
do indivíduo 6 apresentou um perfil
de resistência à tobramicina e à
gentamicina, limitando o uso dos
mesmos.
plantas
arbustivas
e
Após a necropsia de dois
animais, foi isolada a Enterobacter
sp. no indivíduo 4 e a Pseudomonas
aeruginosa
no
indivíduo
2
em
amostras de pulmão e fígado, sendo
observada a presença de pontos
brancos
multifocais
que
se
aprofundavam ao corte durante o
exame macroscópico do fígado e
dos pulmões, o que aparentava ser
uma infecção pulmonar e hepática. A
Pseudomonas spp. é descrita como
uma bactéria de alta patogenicidade,
A azitromicina é um antibiótico
responsável
por
causar
lesões
de amplo espectro com alcance em
tegumentares difusas, estomatites,
sistemas
e
pneumonia, enterite necrosante e
superior, pele e tecidos moles,
septicemia em serpentes, enquanto
agindo bem contra Acinetobacter
a
respiratórios
inferior
Enterobacter
spp.
está
mais
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JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2014 7 (14): 508 – 522.
associada
às
enfermidades
abscedativas e infecções orais3,8.
Estudos
isolamento
futuros
de
sobre
bactéria
a susceptibilidade a antimicrobianos,
sendo esta avaliada por meio da
da
concentração
mínima inibitória. Esse método está
padronizado, possui detalhamento
técnico bem definido e fornece
quantitativos18.
resultados
resultados
obtidos
Os
podem
ser
interpretados
considerando
as
características
farmacológicas
farmacocinéticas
antimicrobianos
e
dos
através
do
estabelecimento da concentração
mínima do medicamento, que deverá
ser utilizada no tratamento das
infecções oportunistas.
A
frequente
avaliação
o
acompanhamento
clínico, bem como a minimização de
multirresistentes deverão considerar
determinação
sanitário,
estresse
com
enriquecimento
ambiental de acordo com a biologia
da
espécie
são
elementos
importantes para a prevenção de
doenças infecciosas em serpentes
mantidas em zoológicos. Faz-se
necessária uma maior atenção aos
cuidados
de
biossegurança
envolvendo o ambiente, os técnicos
e
os
tratadores
manejo
dos
envolvidos
animais,
enterobactérias
pois
isoladas
no
as
estão
envolvidas em quase todas as
infecções adquiridas em Unidades
de Tratamentos Intensivos (UTIs),
particularmente
infecções
respiratórias e infecções urinárias,
segundo o Manual de Investigação e
Controle
de
Bactérias
Multirresistentes (2007) da Agência
da
eficácia dos manejos alimentar e
Nacional de Vigilância Sanitária,
ANVISA, Brasil.
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JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2014 7 (14): 508 – 522.
Tabela 1: Informações clínicas e antibiograma das bactérias isoladas das escamas de filhotes de E.
murinus.
Indivíduo
01
06
07
08
14
Sinais clínicos
Desidratação e
elevação de
escamas
multifocal
Desidratação,
despigmentação e
elevação de
escamas, as quais
apresentam-se
acinzentadas.
Desidratação,
opacidade discreta
e despigmentação
de escamas,
sendo que
algumas de
coloração
amarelada e com
presença de
conteúdo de
aspecto caseoso.
Presença de
escamas
elevadas, sendo
que algumas de
coloração
amarelada e com
presença de
conteúdo de
aspecto caseoso.
Áreas de elevação
e despigmentação
de escamas,
sendo que
algumas de
coloração
amarelada e com
presença de
conteúdo de
aspecto caseoso.
Bactéria
isolada
Acinetobacter
spp.
Resistência
Sensibilidade
Gentamicina,
Tobramicina e
Tetraciclina
Enrofloxacina,
Ciprofloxacina,
Gentamicina,
Tobramicina e
Tetraciclina
Enrofloxacina,
Ciprofloxacina,
Gentamicina,
Tobramicina e
Tetraciclina
Enrofloxacina e
Ciprofloxacina
-------------------
55 dias
C. freundii
Enrofloxacina,
Ciprofloxacina,
Doxiciclina,
Gentamicina,
Tobramicina e
Tetraciclina
-------------------
10 dias
Klebsiella
pneumonae
Enrofloxacina,
Ciprofloxacina
e Tetraciclina
Gentamicina e
Tobramicina
60 dias
Pseudomonas
spp
-------------------
Enrofloxacina,
Ciprofloxacina,
Gentamicina,
Tobramicina e
Tetraciclina
68 dias
Salmonella
spp.
Pseudomonas
aeuruginosa
*Sobrevivência
68 dias
-------------------
*Quantidade de dias que o animal viveu após a implantação do primeiro protocolo
terapêutico.
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Tabela 2: Resultado do antibiograma das bactérias isoladas dos indivíduos necropsiados.
Antibióticos
Indivíduo 02
Doxiclina
Enrofloxacina Ciprofloxacina Tetraciclina Tobramicina Gentamicina
Sensível
Sensível
Pseudomonas Resistente Resistente
Resistente Sensível
aeruginosa
isolada do
pulmão
Sensível
Sensível
Sensível
Sensível
Pseudomonas Resistente Sensível
aeruginosa
isolada do
fígado
Indivíduo 04
Doxiclina
Enrofloxacina Ciprofloxacina Tetraciclina Tobramicina Gentamicina
Sensível
Sensível
Enterobacter
Resistente Resistente
Resistente Sensível
spp. isolada
do pulmão
Sensível
Sensível
Enterobacter
Resistente Resistente
Resistente Sensível
spp.
isolada do
fígado
Conclusão
O isolamento de bactérias
comuns à microbiota
oral e/ou
intestinal de serpentes e com perfil
Instituição responsável
Parque Zoobotânico Getúlio
Vargas, Bahia.
de multiresistência, associado à
doença e ao óbito de 93,3% (14/15)
dos filhotes de E. murinus sob um
Agradecimento
manejo sanitário bem estabelecido
A todos os funcionários e
sugere a sensibilidade de filhotes da
estagiários do PZGV-BA, que se
espécie estudada às enfermidades
doam dia a dia para a promoção do
bacterianas
bem estar aos espécimes silvestres
por
agentes
oportunistas ou patogênicos Gram
e exóticos mantidos na instituição.
negativos.
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JBCA – Jornal Brasileiro de Ciência Animal 2014 7 (14): 508 – 522.
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Recebido em: Outubro de 2013
Aceito em: Agosto de 2014
Publicado em: Dezembro de 2014
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