Perfil de ácidos gordos em enchidos tradicionais do Alentejo: influência do genótipo, do teor de sal e do calibre Raquel Garcia, Maria João Cabrita, Miguel Elias Instituto de Ciências Agrárias e Ambientais Mediterrânicas (ICAAM), Universidade de Évora, Apartado 94, 7002-554 Évora, Portugal Introdução A composição da gordura do porco Alentejano em ácidos gordos tem um papel importante na qualidade nutricional e na sua acção sobre aspectos ligados à saúde dos seus consumidores uma vez que apresenta um perfil com elevadas proporções de ácidos gordos monoinsaturados e um baixo teor de ácidos gordos saturados. Com este trabalho pretendeu-se estudar o perfil dos ácidos gordos em enchidos tradicionais do Alentejo (salsichão, catalão, chouriço preto, paio preto, linguiça e paio) produzidos com carne e gordura de porco, por forma a avaliar a influência do genótipo (Alentejano e Alentejano x Duroc), do teor em sal (2 e 4 %) e do calibre. Assim, iniciou-se este trabalho com o desenvolvimento/optimização de um método extractivo baseado em extracção com líquido pressurizado (PLE). A subsequente quantificação dos ácidos gordos presentes nos extractos lipídicos obtidos por PLE através de GC-FID envolve uma etapa prévia de derivatização da amostra com vista à obtenção dos correspondentes derivados ésteres metílicos, os quais foram identificados e quantificados por GC-FID mediante a comparação dos seus tempos de retenção com os de uma mistura padrão de composição conhecida. Parte Experimental Etapa 2: Extracção com Líquido Pressurizado (PLE) Etapa 1: Preparação da amostra Condições da extracção ¾ Solvente - CHCl3 /MeOH (60:40(V/V) com BHT (100 mg/L); ¾ T extracção - 100ºC; ¾ Nº de ciclos de extracção - 2. ASE Terra de diatomáceas Etapa 3: Derivatização dos Ácidos Gordos [1] Extracto H3C OH NaOH (Saponificação) Extracto Amostra triturada O n H3C BF3 / MeOH O O-Na+ OMe Análise do perfil cromatográfico por GC-FID e identificação dos derivados ésteres metílicos. Sistema cromatográfico ¾ Gas de arraste: hélio (fluxo const. 1mLmin-1); ¾ Gradiente térmico: 140ºC durante 5 min; 4ºC/min até 240ºC; 240ºC durante 10 min; ¾ Injecção: 1 μL a 250ºC modo split 20:1; O n (Esterificação) Etapa 5: Identificação e quantificação de ácidos gordos (sob a forma de derivados ésteres metílicos) Etapa 4: Perfil dos Ácidos Gordos por GC-FID H3C n Ác. oleico (C18:1) Ác. Palmítico (C16:0) Ác. linoleíco (C18:2) Coluna: Supelco - Omegawax 320 (30 m×0.32 mm ID, 0.25 μm film thickness). Ác. Palmitoleíco (C16:1) Ác. Esteárico (C18:0) GC-FID Resultados Catalão Chouriço Preto 100% Linguiça 100% 100% 90% Heneicosenóico 80% Gadoléico Linolénico 70% Linoléico 60% Oleico 50% 90% Heneicosenóico 90% Heneicosenóico 80% Gadoléico 80% Gadoléico 50% 40% Margaroleíco 40% 30% Margárico 20% Palmitoléico 10% Palmítico Mirístico Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genótipo 1 Sal 1 Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Linoléico 60% Estiárico 0% Linolénico 70% Linolénico 70% Linoléico 60% Oleico Oleico Estiárico 50% Estiárico Margaroleíco 40% Margaroleíco 30% Margárico 30% Margárico 20% Palmitoléico 20% 10% Palmítico 10% Mirístico 0% Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 2 Genótipo 1 Sal 1 Salsichão Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Palmitoléico Palmítico Mirístico 0% Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 1 Genótipo 2 Sal 2 Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Paio Preto 100% Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genótipo 2 Sal 2 Paio 100% 100% 90% Heneicosenóico 90% Heneicosenóico 90% Heneicosenóico 80% Gadoléico 80% Gadoléico 80% Gadoléico Linolénico 70% Linoléico 60% Oleico 50% Estiárico Linolénico 70% Linoléico 60% Oleico 50% Estiárico Linolénico 70% Linoléico 60% Oleico 50% Estiárico 40% Margaroleíco 40% Margaroleíco 40% Margaroleíco 30% Margárico 30% Margárico 30% Margárico 20% Palmitoléico 20% Palmitoléico 20% Palmitoléico 10% Palmítico 10% Palmítico 10% Mirístico 0% Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genótipo 1 Sal 1 Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genótipo 2 Sal 2 Mirístico 0% Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genótipo 1 Sal 1 Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genótipo 2 Sal 2 Palmítico Mirístico 0% Genotipo 1 ‐ Sal 1 Genótipo 1 Sal 1 Genotipo 1 ‐ Sal 2 Genótipo 1 Sal 2 Genotipo 2 ‐ Sal 1 Genótipo 2 Sal 1 Genotipo 2 ‐ Sal 2 Genótipo 2 Sal 2 Conclusões 9 O método extractivo de PLE revelou-se altamente eficiente para a extracção da fracção lipídica das amostras em estudo. 9 O método cromatográfico utilizado permitiu identificar e quantificar os derivados ésteres metílicos dos ácidos gordos presentes. 9 Os resultados obtidos revelaram que: -os teores em ácidos gordos variam na relação: Oleíco > Palmítico > Esteárico> Linoleíco > Palmitoleíco > Linolénico; -o ácido oleico apresenta-se como componente maioritário da fracção lipídica, não apresentando variações significativas em função do calibre, teor de sal e genótipo; - em geral, o ácido oleico evidencia uma diminuição com o incremento do teor em sal; -de entre os ácidos gordos saturados, o ácido palmítico e esteárico apresentaram valores relativamente mais elevados para o genótipo 2 para os produtos salsichão, paio preto e paio; -em relação aos ácidos gordos insaturados, o ácido linoleico e linolénico apresentam valores inferiores para o genótipo 1 para todas as amostras em estudo; -nas amostras estudadas o rácio P/S (ácidos gordos polinsaturados/ saturados) situa-se entre 0,17 – 0,56, sendo que alguns dos valores obtidos são inferiores aos recomendados (0,4-0,5). Agradecimentos: Este trabalho é financiado por Fundos FEDER através do Programa Operacional Factores de Competitividade – COMPETE e por Fundos Nacionais através da FCT– Fundação para a Ciência e a Tecnologia no âmbito do Projecto Estratégico PEst-C/AGR/UI0115/2011 e pelo projecto PRODER "Melhoria da Qualidade de Enchidos Tradicionais alentejanos pelo recurso a baixos teores de sal, monitorização do tempo de fumagem e utilização de culturas de arranque” . Referências: [1] - Morrison W.R. and Smith L.M. (1964). Preparation of fatty acid methyl esters and dimethylacetals from lipids with boron fluoride-methanol. J. Lipid Res. 5, 600-608. 11º Encontro de Química dos Alimentos