Aula 00 - Ponto dos Concursos

Curso Intensivo para Oficial Complementar Farmacêutico do CBM/DF
Aula 00 - Aula Demonstrativa
Prof. Pollyana Lyra
Aula 00
Microbiologia
Professor: Pollyana Lyra
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Aula 00 – Aula Demonstrativa
Olá, Tudo bem?? Meu nome é Pollyana Lyra e estarei acompanhando vocês
no nosso Intensivo de Específicas para o concurso do Corpo de Bombeiros do
DF para o cargo de Oficial Complementar - Farmácia, mas antes disso,
deixe-me me apresentar. Sou Farmacêutica Bioquímica e Industrial, com
experiência em Indústria Farmacêutica nas áreas de Desenvolvimento de
produtos (FARMACOTECNICO) por 4 anos, tempo esse interrompido por uma
nomeação no concurso público da secretaria de saúde de Caldas Novas (5º lugar),
onde atuei como Responsável técnica do Laboratório de Análises Clinicas do CTA
(Centro de Testagem e aconselhamento) que faz parte do programa DST/ AIDS
do Ministério da Saúde, onde em poucos meses me tornei coordenadora do
programa de distribuição de TARV e Talidomida. Por motivos pessoais (resolvi me
casar) pedi exoneração e mudei de cidade, onde comecei a atuar na área de
docência.
Ministrei aulas durante 4 anos (isso mesmo, parece que minha vida
profissional acontece em ciclos de 4 anos...risos) na Faculdade de Tecnologia
Senai Roberto Mange. Tempo esse que aprendi a gostar da área de ensino e
pesquisa e acabei me especializando em Farmacologia. Após esses 4 anos em
sala de aula tive uma filha e optei por me dedicar a ela exclusivamente e após
um ano voltar aos concursos (visando Policia Federal) e docência...
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Outros resultados de concurso: 27º lugar Farmacêutica Bioquímica da
Prefeitura de Anápolis (2016), 29º lugar Fiscal Sanitário no mesmo concurso, 71º
lugar em perito da Policia Civil do Distrito Federal (2016)...
Bom, eu sei muito bem que não temos tempo a perder, então vamos
começar a entender o nosso curso!!! Tenho certeza que com nossas aulas em
PDF, bem como a bateria de exercícios vocês estarão preparados para enfrentar
a IDECAN e conquistar o almejado cargo de Oficial no CBMDF!
CONHECENDO O CURSO...
O nosso curso é direcionado aos Farmacêuticos, especialmente aqueles que
acreditam em estratégias inovadoras e precisam otimizar seu tempo. Isso porque
será um “intensivo” de todo o conteúdo específico acompanhado de exercícios
comentados... mas você pode estar pensando.... Qual será o diferencial dos
demais cursos já existentes? Bom, o nosso curso trabalhará o conteúdo BASEADO
em questões e não simplesmente descrever um conteúdo teórico acompanhado
de uma gama de questões sobre o tema abordado, além disso, trata toda a parte
específica de forma facilitada, resumida, esquematizada (através de tabelas,
mapas mentais e artifícios mnemônicos) assim ele será mais dinâmico, mais
prático, mais enxuto e direcionado!
Você estará desde a primeira página treinando para a sua prova, pois, como
concurseiro, você deve saber que tão importante como saber o conteúdo é saber
como é cobrado esse conteúdo pela banca específica, não é mesmo?
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Muitos Farmacêuticos não encaram esse desafio pelo pouco número de
vagas ofertado. Um grande erro! Pois, o conteúdo cobrado nesse edital é
semelhante a vários concursos cujos editais estão prestes a serem publicados,
um exemplo é o HEMOCENTRO do DF. Ou seja, preparando-se por esse material
você estará se preparando também para concursos de Prefeituras, Estados,
Forças Armadas ou qualquer outro na área de Farmácia Bioquímica. Um outro
motivo para investir no nosso curso é o número e o peso dobrado das questões
específicas de Análises Clínicas que pode ser o fator determinante para ocupar a
almejada vaga.
“Ou você tem uma estratégia própria, ou então é parte da estratégia de
alguém. ”
Alvin Toffler
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Para isso, segue o cronograma do curso de Microbiologia.
Aula
Conteúdo Programático
Data
00
Coleta de amostras para exames, métodos de coloração.
14/11/16
01
Meios
15/11/16
de
cultura,
armazenamento.
condições
Provas
de
gerais
controle
de
de
preparo,
qualidade.
Isolamento e identificação de bactérias e fungos de interesse
médico. Determinação de sensibilidade das bactérias aos
antimicrobianos
02
Esterilização - métodos físicos, e químicos, princípios e tipos
16/11/16
Bom, vamos embarcar nessa jornada por meio de nossa aula experimental!
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MICROBIOLOGIA
AULA 00 - COLETA DE AMOSTRAS PARA EXAMES E MÉTODOS DE COLORAÇÃO
Tópicos da Aula
1. Coloração GRAM ................................................................................... 7
1.1
Esquema Diferencial das Paredes Bacterianas Gram + e - ........... 9
1.2
Componentes Exclusivos Das Bactérias ............................ 11
2. Coloração de Ziehl-Neelsen (BAAR) ................................................ 12
2.1 Comportamento dos bacilos frente a cada corante...................13
3. Coleta de Amostras para Exame Microbiológico ............................... 13
3.1 Resumo de formas de coleta.................................................19
4. Questões Comentadas ....................................................................20
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1. Coloração GRAM
Sabemos que praticamente todo procedimento laboratorial exige etapas préanalíticas e a coloração é uma delas.
em geral,
O uso da cor facilita a visualização
imagine do que é microscópico...e por isso o Dinamarquês Hans
Christian Joachim Gram criou essa técnica que é de longe a mais usada em
laboratório de micro.
Como cai na prova??? Isso, já vamos começar por aí!
(IDECAN-2012) MUNICÍPIO DE MATIAS CARDOSO/MG. A coloração de Gram é um dos mais
importantes métodos utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas,
sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias.
Por essa técnica, um esfregaço de células procarióticas fixadas pelo calor recebe o
corante cristal violeta e, depois, o lugol (à base de iodo). Essas duas substâncias se
combinam no citoplasma da célula procariótica, que passa a ter coloração violeta-escura
ou púrpura. A seguir, adiciona-se álcool, que tem a capacidade de descolorir as células
que foram coradas. No entanto, diferenças estruturais na parede celular dos procariontes
afetam a retenção ou o escape da combinação entre o corante violeta e o iodo, quando
se adiciona o álcool. Portanto, a retenção da cor nas células, quando ocorre, refere-se
às bactérias
A) gram-negativas, devido à presença de parede celular com camada delgada de
peptideoglicano associada a uma camada mais externa de composição lipoproteica.
B) gram-negativas, devido à presença de parede celular formada por uma camada
espessa de peptideoglicano.
C) gram-positivas, devido à presença de parede celular com camada delgada de
peptideoglicano
associada
a
uma
camada
mais
externa
de
composição
lipoproteica.
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D) gram-positivas, devido à presença de parede celular com camada espessa de
peptideoglicano
associada
a
uma
camada
mais
externa
de
composição
lipoproteica.
E) gram-positivas, devido à presença de parede celular formada por uma camada
espessa de peptideoglicano.
Gabarito: LETRA E. Erros das demais assertivas estão destacados em negrito.
Excelente questão para começar o assunto de Coloração, pois em primeiro lugar
já mostra que o assunto cai, segundo lugar mostra o princípio da técnica e a leitura do
resultado, vamos lá: CHEGA DE ERRAR QUESTÕES DE GRAM na prova!
Olha como é simples: Gram coloriu uma lâmina com bactérias fixadas por calor com um
corante roxo (cristal violeta) e assim todas ficaram roxinhas, para garantir que o corante ficasse
mesmo dentro da célula ele adicionou o lugol (que é a base de Iodo) e forma um complexo sólido
dentro das bactérias. Todas permaneceram roxas, mas após a lavagem com álcool algumas
descoraram (ou seja, ficaram negativas) e as outras permaneceram roxas (positivas). Para
conseguir visualizar as que descoraram ele adicionou um outro corante, as vezes chamado em
provas de contra corante, só para revelar a presença daquelas bactérias ali (já pensou se não
fosse revelado? Como saberíamos a forma delas por exemplo...? se estavam incolores..) Por
isso, no final ele usou a fucsina ou safranina, deixando as que eram incolores (negativas) da cor
rosa.
Só isso!!! Ah e Olha que linda fica a lâmina corada!!!
Lâmina – Coloração Gram
Agora observe o desenho abaixo, SUPER simples que demonstra a diferença
estrutural da parede bacteriana e que justifica tal comportamento durante a coloração.
Veja:
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1.1 Esquema Diferencial das Paredes Bacterianas Gram + e -
GRAM
POSITIVA
(ROXA)
GRAM
NEGATIVA
(ROSA)
MEMBRANA
Gram +: GROSSA
MUREÍNA
GRAM -: FINA
LPS
A Bactéria Gram positiva tem apenas
2
camadas:
A membrana celular (azul) e a parede celular de peptideoglicano
(verde) que é formada por mureína + N-acetilglicosamida. Essa camada, porém,
é bem mais espessa nelas do que nas bactérias Gram Negativas...
Para lembrar disso, observe que o nome da estrutura química que dá essa
proteção maior é MUREÍNA, lembrando de MURO (que também trás proteção).
A Bactéria Gram positiva tem
3
camadas:
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As mesmas que a Gram positiva, ou seja, membrana celular e
peptideoglicano, porém essa última mais fina do que a da Gram +, ou seja seu
“MURO” é mais fino, por isso ela precisa também de uma mais externa de
lipopolissacarídeos.
Entre elas existe um espaço, chamado espaço periplasmático.
O que faz a bactéria Gram + reter o corante e a Gram - perder o
corante?
G+ retém porque o cristal
violeta+ lugol formam
complexo que fica preso no
espesso “muro” de
peptideoglicano.
G- perde porque o álcool
solubiliza os lipídeos da
membrana extra de LPP. O
peptideoglicano da G- é muito
fino e não retém o corante
(FUNCERN -2012) BIÓLOGO IFRN. A parede celular é uma estrutura externa
à membrana plasmática e é importante para os organismos microbianos.
Cada grupo de organismos tem peculiaridades na estrutura de sua parede
celular. Assim, a opção que apresenta, respectivamente, os componentes
exclusivos de parede de bactéria Grampositiva, Gram-negativa e de parede
celular de fungo é:
A) ácido teicóico, membrana externa fosfolipídica e peptídeoglicano.
B) ácido teicóico, membrana externa fosfolipídica e mananas.
C) peptideoglicano, mananas e membrana externa fosfolipídica.
D) ácido teicóico, mananas e membrana externa fosfolipídica
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GABARITO: B, os erros estão destacados em negrito.
Não se assuste! Eu coloquei essa questão apenas para fechar o assunto
com essas observações e mostrar que não é exagero não!!! Cai em prova!
1.2 Componentes Exclusivos Das Bactérias
 GRAM POSITIVAS: Ácido Tecóico, exotoxina
 GRAM NEGATIVAS: Antígeno O, Endotoxina
Difícil lembrar esses nomes??? QUE TAL MEMORIZAR???
Olha, se a banca perguntar se tem ácido tecóico você irá pensar assim:
Sim é um sinal positivo
Não é um sinal negativo
, ou seja, as Gram positivas tem o ácido tecóico, e
, ou seja as Gram Negativas não tem o ácido
tecóico.
Quanto à endo ou exotoxina é só pensar que o prefixo que tem o N
corresponde às Gram Negativas (cuja inicial é N), sendo, portanto, ENDO. E
o outro é o das Gram positivas (EXO).
Por fim, em relação ao Antígeno O, é só pensar que ele é o responsável
pela maior patogenicidade das bactérias Gram Negativas!!! Você se lembra que
elas são mais patogênicas do que as Positivas, não é??
Releia a questão e observe que mesmo que você não saiba que mananas
são estruturas exclusivas de fungos, acertaria a questão por exclusão, visto as
demais alternativas.
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COMPONENTE
GRAM POSITIVA
GRAM NEGATIVA
(ROXA)
(ROSA)
SIM
NÃO
ÁCIDO TECÓICO
ENDOTOXINA
NÃO
SIM
EXOTOXINA
SIM
NÃO
ANTIGENO O
NÃO
SIM
(PATOGENICIDADE)
Falando em fungos e outras estruturas... Existe uma dificuldade de
visualização de micobactérias pela coloração Gram, porque elas possuem na sua
parede celular uma grande concentração de lipídeos, devido à presença de ceras
e ácidos graxos (ácidos micólicos), assim é utilizado um método que é justamente
o próximo tópico da nossa aula.
2. Coloração de Ziehl-Neelsen (BAAR)
Galerinha, sigam o mesmo raciocínio da coloração Gram...Colorir e
descorar! Mas aqui, colore-se com o corante fucsina (rosa ou vermelho) e
descorar com uma mistura de áccol + ácido (clorídrico). Se as micobactérias
forem resistentes a essa mistura, são consideradas positivas (pois ficam ainda
coradas com o corante inicial e permanecem com a coloração rosa). Se elas não
forem resistentes, irão descorar e ficar na cor do fundo da lâmia (azul) devido ao
azul de metileno. Fácil, Fácil, não é??? Vai um esqueminha para fixar...
Bactérias álcool ácido resistentes (BAAR): vermelho ou rosa
Bactérias não-álcool ácido resistentes (BNAAR): azul
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2.1 Comportamento dos bacilos frente a cada corante
Soluções em ordem de
aplicação
BAAR
BNAAR
Fucsina de Ziehl
Bactérias coradas em
vermelho
Bactérias coradas em
vermelho
Álcool-ácido clorídrico
A fucsina se fixa nos lipídeos
complexos e não abandona
a célula, que permanece
vermelha
A fucsina não se fixa nos
componentes da parede
celular e abandona a célula,
que permanece sem corante
em seu interior
Azul-de-metileno
A célula não é afetada e
permanece vermelha
A célula adquire o corante,
tornando-se azul (cor do
fundo)
Não se esqueçam, essa coloração é usada para bactéricas que se coram mal pela coloração
GRAM, em especial os bacilos da LEPRA e da TUBERCULOSE.
Lâmina BAAR
3. Coleta de Amostras para Exame Microbiológico
Como já mencionado, a fase pré-analítica é fundamental para a acurácia
do exame e diagnóstico microbiológico. Isso porque qualquer célula ou
contaminante pode alterar a conclusão do médico e por consequência a terapia
escolhida.
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Cuidado com a escolha:
da suspeita clínica, do
agente pesquisado, do
momento clínico para
coleta do teste a ser feito
Terapia antimicrobiana:
coletar antes de iniciar ou
modificar a medicação.
ORIENTAÇÕES DA
ANVISA
NÃO ESQUECER:
Orientar o paciente,
identificar amostra (nunca
na tampa), usar EPI, ser
Treinado, usar frasco
estéril
APÓS A COLETA: Conferir
se volume é suficiente,
transportar rapidamente
para o laboratório.
ATENÇÃO: Algumas bactérias são especialmente sensíveis às condições
ambientais, incluindo Shigella spp, Neisseria gonorrhoeae, N.
meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae e anaeróbios.
Nunca refrigerar amostras de líquor, amostras genitais, oculares
ou da orelha interna;
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Conforme as normas de biossegurança, todo material será colhido,
acondicionado, transportado, processado e descartado como potencialmente
infectante, independentemente do diagnóstico do paciente. Para evitar a
exposição de risco biológico, observar as rotinas de cada procedimento e usar os
EPIs indicados.
O Meio de transporte serve para manter a viabilidade das bactérias, porém
sem permitir a multiplicação (Ex: Stuart, Amies, Cary Blair) durante o trânsito
entre o local de coleta e o laboratório, mas isso vamos ver melhor na aula de
meios de cultura...
Vejamos agora a forma de coleta adequada para alguns dos principais
exames microbiológicos.
Hemocultura
É necessário rigor na execução da técnica, uma vez que há possibilidade de
crescimento de contaminantes da pele (usar clorexidina e álcool na antissepsia).
SERINGA E AGULHA, DISPOSITIVOS
À VÁCUO
Secreção de ferida cutânea ou cirúrgica, abscesso ou fístula
A secreção pode ser coletada de duas maneiras:
1. por aspiração da secreção utilizando seringa e agulha estéreis ou somente a
seringa.
2. com swab (menos recomendada)
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SERINGA E AGULHA, SWAB
Biópsia
No caso de ferida ou lesão cutânea, a cultura de pequeno fragmento de tecido
(biópsia) fornece resultado mais representativo em relação ao swab.
Utiliza-se o bisturi ou tesoura evitando áreas de tecido necrosado e pus, os quais
devem ser removidos.
BISTURI, TESOURA, SWAB
Urocultura
A urina na bexiga
é estéril, porém, com exceção da coleta suprapúbica,
todos os métodos propiciam a contaminação da urina com a microbiota uretral.
A coleta de urina do jato médio é o método
Mais utilizado, por não ser invasivo e pela relativa confiabilidade, quando
realizada dentro de técnica adequada. Mas também pode ser feita a coleta por
meio do cateter vesical.
COLETOR UNIVERSAL, SERINGA,
CATETER
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As amostras abaixo não são tão frequentes em provas, mas vale a pena dar uma
lida...
Líquidos orgânicos estéreis
São exemplos o líquido Pleural, Sinovial, bile e outros... Deve-se fazer
antissepsia da pele (solução alcoólica de clorexidina ou PVP-I) e realizar a
aspiração do material com seringa e agulha estéril.
SERINGA E AGULHA
Líquor
A punção lombar deve ser feita sob condições estritas de assepsia.
Ah, e lembrando...Tanto Neisserias como Haemophilus não resistem às
temperaturas baixas, daí porque o líquor para cultura não deve ficar em
geladeira.
SERINGA E AGULHA
Escarro
Evitar coletar saliva ou material de vias aéreas superiores. Coletar pela
manhã com o paciente em jejum, após higiene oral (escovar os dentes sem o uso
de pasta dental e fazer gargarejos). O escarro deve ser coletado após tosse
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profunda e depositado diretamente em frasco esterilizado de boca larga com
tampa rosqueada
Secreção de Orofaringe (swab)
Usado para pesquisa de Streptococcus pyogenes.
Secreção de Ouvido ou ocular
swab
Fezes (swab, evacuação espontânea)
Devem ser coletadas no início ou fase aguda da doença, quando os
patógenos estão usualmente presentes em maior número. Preferir as porções
mucóides e sanguinolentas do material.
Conservação
O método de conservação dependerá do microrganismo pesquisado, do tipo
de amostra e da técnica utilizada. Podendo ser químico (ex: formalina para fezes)
ou refrigeração.
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3.1
Resumo de formas de coleta
EXAME
FORMA DE COLETA
Secreção de
ferida cutânea
ou cirúrgica,
abscesso ou
fístula
Fragmento de
tecido (pele,
tecido
subcutâneo)
Urocultura
Hemocultura,
Líquidos
orgânicos
estéreis, Líquor
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VAMOS EXERCITAR???
Pessoal, encerramos nossa aula demonstrativa. Espero que tenham
gostado e que permaneçam perseverantes nos estudos até o dia 5 de Fevereiro.
Vamos juntos, em busca de conseguir o êxito nessa luta!
QUESTÕES COMENTADAS
Obs: Os trechos incorretos estão destacados em negrito.
1) IDECAN Farmacêutico - Bioquímico - Pref. Simonésia/MG 2016
Sobre a técnica de coloração de Gram, assinale a alternativa correta.
A)
Os micro-organismos são expostos a uma coloração a quente com
carbolfucsina concentrada por 5 minutos.
B)
Bactérias Gram-negativas não perdem o corante violeta durante a
descoloração e, por isso, adquirem coloração rosa.
C)
Bactérias Gram-positivas retêm o corante violeta por resistirem à
descoloração e ficam coradas em azul escuro / roxo.
D)
Bactérias Gram-positivas
perdem o
corante
violeta durante
a
descoloração e adquirem a coloração azul escuro / roxo.
COMENTÁRIO: A Alternativa A descreve uma técnica nada semelhante à de
Gram, já a B erra ao dizer que G- não perde o corante, perde sim e por isso
ficam rosa após corada com o contra corante (ao final). Por último, a
alternativa D afirma erroneamente que as G+ perdem o corante violeta
(errado). Letra C sem sombra de dúvidas.
2) COVEST - Biomédico UFPE - 2015
Um estagiário do laboratório de Microbiologia Clínica recebeu uma lâmina
contendo esfregaço de Escherichia coli e uma lâmina contendo esfregaço de
Staphylococcus aureus para serem coradas pela coloração de Gram (cristal
violeta, lugol, álcool, fucsina diluída). Após fixar os esfregaços pelo calor, o
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estagiário realizou a coloração, porém inverteu a ordem da utilização dos
corantes (fucsina, álcool diluído, cristal violeta, lugol). Qual foi o resultado da
coloração observado ao microscópio para E. coli e S. aureus, respectivamente?
A) Bacilos vermelho claros e cocos vermelho-escuros.
B) Bacilos vermelho-claros e bacilos violeta-escuros.
C) Bacilos e cocos vermelho-claros.
D) Bacilos e cocos violeta-escuros.
E) Cocos vermelho-claros e cocos violeta-escuros.
COMENTÁRIO: A inversão nos reagentes, apesar de um erro analítico, em nada
altera o resultado da coloração. As bactérias permanecem rosa ou vermelho claro
(E. coli) já que é Gram negativa e Roxo ou vermelho escuros para S. aureus já
que é Gram positiva, Como elas são respectivamente bacilos e cocos, a assertiva
A é a correta.
3) COVEST - Biomédico UFPE - 2015
A técnica de coloração diferencial mais importante em bacteriologia é o método
de Gram. Este método explora o fato de células com propriedades diferentes
apresentarem coloração diferente. Assim, as bactérias podem se comportar
como Gram-positivas ou como Gram-negativas. Nesse contexto, analise as
afirmativas abaixo.
1.
A camada de peptideoglicano é muito mais espessa nas bactérias Gram-
positivas, e essas bactérias podem possuir uma camada de ácido teicoico.
2.
Os micro-organismos Gram-negativos possuem uma camada externa
composta de lipopolissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídios.
3.
Apenas os micro-organismos Gram-positivos têm uma membrana
externa contendo endotoxina (lipopolissacarídeo).
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4.
Os micro-organismos Gram-positivos e os Gram-negativos contêm
peptideoglicano; contudo, nos primeiros, a parede é única e fina e nos
segundos a parede é múltipla e espessa.
Estão corretas, apenas:
A) 1 e 4.
B) 1 e 3.
C) 2 e 3.
D) 3 e 4.
E) 1 e 2.
COMENTÁRIO: Como vimos na aula a Endotoxina está presente nas Gram
Negativas e não nas Gram Positivas (essas possuem exotoxinas). O item 4 afirma
que as G+ possuem parede fina e os G- espessa (é o contrário). As alternativas
1 e 2 estão perfeitas. Gabarito letra E.
4) AOCP - Biomédico - EBSERH/HC-UFG - 2015 Em relação às bactérias, é
correto afirmar que:
(A)
As
bactérias
gram-negativas
possuem
espessa
camada
que
é
firmemente aderida à carioteca de sua própria célula.
(B)
Certos organismos gram-positivos e gram negativos podem apresentar
também uma cápsula, ou camada de glicocálice, internamente à parede
celular. Essa cápsula torna a bactéria vulnerável à fagocitose por monócitos,
podendo dificultar sua fixação tecidos do hospedeiro.
(C)
Os organismos gram-positivos são assim denominados devido às
características de coloração próprias da sua finíssima camada externa de
peptidoglicano, além disso, esses micro-organismos possuem amplo complexo
de Golgi e mitocôndrias em seu interior.
(D)
As bactérias são classificadas em Gram-positivas ou Gram-negativas em
função da diferença na arquitetura da parede celular. A parede celular Grampositiva consiste de uma camada espessa de peptidoglicano (~30 nm),
enquanto a parede celular da Gram-negativa apresenta camada mais fina de
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peptidoglicano (~10nm) e sua estrutura e composição da membrana mais
complexas.
(E)
Bactérias como as microbactérias têm glicolipídeos múltiplos que lhes
conferem uma aparência de bolor, acarretando desvantagens biológicas,
impedindo a infecção ao hospedeiro.
COMENTÁRIO: As bactérias G+ e G- se diferenciam justamente pela estrutura
de envoltórios (membranas). Enquanto a G+ tem apenas a membrana celular e
a espessa camada de peptideoglicano, a G- tem a camada de peptideoglicano
mais fina e uma camada externa de LPS. Letra D correta.
5) UFT/COPESE- Biomédico - Pref. Guaraí/TO- 2016
“A Gram-Bretanha e a Ásia estão enfrentando um surto de escarlatina que
intriga especialistas. De acordo com a Autoridade de Saúde Pública da
Inglaterra (PHE, na sigla em inglês), em 2015, foram registrados 17.586 casos
da infecção no país Î o número só não ultrapassa os registros de 1967, com
19.305 notificações. A escarlatina é uma infecção bacteriana, causada por
estreptococos do grupo A, que atinge principalmente crianças"
Referente às características das bactérias, é CORRETO afirmar que:
(A)
A diferenciação entre as bactérias é realizada exclusivamente pelas
suas características morfológicas.
(B)
Os aspectos microscópicos, incluindo o tamanho, forma e os arranjos dos
organismos (cocos, bastonetes, curvos ou espiralados), determinam a
capacidade das bactérias de resistir a certos antibióticos.
(C)
Coloração de Gram é um teste rápido que permite aos clínicos a
diferenciação entre as duas mais importantes classes de bactérias.
(D)
As bactérias Gram negativas têm a camada de peptidoglicano espessa
contendo ácido teicoico e ácidos lipoteicoicos.
COMENTÁRIO: Alternativa A erra ao incluir a palavra exclusivamente no
texto; Alternativa B erra ao afirmar que a morfologia determina a capacidade
de resistência de bactérias à antibióticos, pois pode até ser que influencia, mas
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determinar não! Muitos outros aspectos são levados em consideração. A
assertiva D descreve características das bactérias G+, relatando ser G(errado). A letra C é a correta!
6) FAFIPA - Serviço de Biomedicina - Pref. Londrina/PR - 2015
A coleta de materiais biológicos para exames de microbiologia deve seguir as
seguintes recomendações:
(A) Identificar o material do paciente adequadamente.
(B) Informar dificuldades que possam ocorrer durante a coleta, como material
insuficiente para análise adequada.
(C) Informar sobre o uso de antimicrobianos prévios à coleta do material pelo
paciente.
(D) No geral, os procedimentos de coleta seguem protocolos específicos que
facilitam o cultivo dos micro-organismos suspeitos, de acordo com o sítio
a ser investigado.
(E) Todas estão corretas.
COMENTÁRIO: Todas estão corretas, é uma questão boa para revisar. Letra
E.
7) FAFIPA - Serviço de Biomedicina - Pref. Londrina/PR - 2015
Sobre o método de Ziehl-Nielsen para bacterioscopia direta, pode-se afirmar
que:
(A)
Esta metodologia categoriza as bactérias em álcool-ácido-resistentes e
não álcool-ácido resistentes.
(B)
O corante empregado é o Albert-Layborn, capaz de penetrar no interior
do Mycobacterium tuberculosis.
(C)
É sempre utilizada em associação com o método de impregnação
em prata.
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(D)
Deve ser confirmado por microscopia de campo escuro ou pelo
método de tinta nanquim.
(E)
Utiliza
um
corante
que
pode
se
tornar
fluorescente
na
microscopia óptica.
COMENTÁRIO: A alternativa B erra o corante (o correto é fucsina). A
alternativa A é a correta e as demais são descabidas, conforme conteúdo
exposto em aula.
8) Biomédico - Pref. Natal/RN 2016
A respeito da coloração bacteriana de Gram:
A) As bactérias que possuem a camada de lipídios associados a
Polissacarídeos não são coradas pela coloração de Gram.
B) Escherichia coli e Staphylococcus aureus são bactérias Gram-negativas.
C) Bactérias Gram negativas são aquelas que apresentam uma camada
lipídica
não
corada
pelo
corante
devido
à
afinidade
entre
a
pigmentação e a camada de fosfolipídeos.
D) As bactérias Gram-positivas têm parede celular espessa e única de
peptidoglicanos, que, ao contato com a coloração de Gram, adquire cor
púrpura ou azul.
COMENTÁRIO: Letra D descreve corretamente a camada de bactérias Gram
positivas. A letra A menciona as cápsulas bacterianas, que podem estar
presentes tanto em G+ como em G-. Apesar das cápsulas não se corarem bem
pelo método Gram a Bactéria em si se cora sim, diferente do que está descrito
na assertiva!
Aproveito essa questão para citar a função das cápsulas (adesão, invasão,
reserva de água).
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Alguns alunos preferem resolver as questões sem comentários e só
depois conferir!!!
LISTA DE QUESTÕES SEM COMENTÁRIOS
1) IDECAN Farmacêutico - Bioquímico - Pref. Simonésia/MG 2016
Sobre a técnica de coloração de Gram, assinale a alternativa correta.
A) Os micro-organismos são expostos a uma coloração a quente com
carbolfucsina concentrada por 5 minutos.
B) Bactérias Gram-negativas não perdem o corante violeta durante a
descoloração e, por isso, adquirem coloração rosa.
C) Bactérias Gram-positivas retêm o corante violeta por resistirem à
descoloração e ficam coradas em azul escuro / roxo.
D) Bactérias Gram-positivas perdem o corante violeta durante a descoloração
e adquirem a coloração azul escuro / roxo.
2) COVEST - Biomédico UFPE - 2015
Um estagiário do laboratório de Microbiologia Clínica recebeu uma lâmina
contendo esfregaço de Escherichia coli e uma lâmina contendo esfregaço de
Staphylococcus aureus para serem coradas pela coloração de Gram (cristal
violeta, lugol, álcool, fucsina diluída). Após fixar os esfregaços pelo calor, o
estagiário realizou a coloração, porém inverteu a ordem da utilização dos
corantes (fucsina, álcool diluído, cristal violeta, lugol). Qual foi o resultado da
coloração observado ao microscópio para E. coli e S. aureus, respectivamente?
A) Bacilos vermelho claros e cocos vermelho-escuros.
B) Bacilos vermelho-claros e bacilos violeta-escuros.
C) Bacilos e cocos vermelho-claros.
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D) Bacilos e cocos violeta-escuros.
E) Cocos vermelho-claros e cocos violeta-escuros.
3) COVEST - Biomédico UFPE - 2015
A técnica de coloração diferencial mais importante em bacteriologia é o método
de Gram. Este método explora o fato de células com propriedades diferentes
apresentarem coloração diferente. Assim, as bactérias podem se comportar
como Gram-positivas ou como Gram-negativas. Nesse contexto, analise as
afirmativas abaixo.
1) A camada de peptideoglicano é muito mais espessa nas bactérias Grampositivas, e essas bactérias podem possuir uma camada de ácido teicoico.
2) Os micro-organismos Gram-negativos possuem uma camada externa
composta de lipopolissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídios.
3) Apenas os micro-organismos Gram-positivos têm uma membrana externa
contendo endotoxina (lipopolissacarídeo).
4) Os
micro-organismos
Gram-positivos
e
os
Gram-negativos
contêm
peptideoglicano; contudo, nos primeiros, a parede é única e fina e nos
segundos a parede é múltipla e espessa.
Estão corretas, apenas:
A) 1 e 4.
B) 1 e 3.
C) 2 e 3.
D) 3 e 4.
E) 1 e 2.
4) AOCP - Biomédico - EBSERH/HC-UFG - 2015 Em relação às bactérias, é
correto afirmar que:
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A) As bactérias gram-negativas possuem espessa camada que é firmemente
aderida à carioteca de sua própria célula.
B) Certos organismos gram-positivos e gram negativos podem apresentar
também uma cápsula, ou camada de glicocálice, internamente à parede
celular. Essa cápsula torna a bactéria vulnerável à fagocitose por
monócitos, podendo dificultar sua fixação tecidos do hospedeiro.
C) Os
organismos
gram-positivos
são
assim
denominados
devido
às
características de coloração próprias da sua finíssima camada externa de
peptidoglicano, além disso, esses micro-organismos possuem amplo
complexo de Golgi e mitocôndrias em seu interior.
D) As bactérias são classificadas em Gram-positivas ou Gram-negativas em
função da diferença na arquitetura da parede celular. A parede celular
Gram-positiva consiste de uma camada espessa de peptidoglicano (~30
nm), enquanto a parede celular da Gram-negativa apresenta camada mais
fina de peptidoglicano (~10nm) e sua estrutura e composição da membrana
mais complexas.
E) Bactérias como as microbactérias têm glicolipídeos múltiplos que lhes
conferem uma aparência de bolor, acarretando desvantagens biológicas,
impedindo a infecção ao hospedeiro.
5) UFT/COPESE- Biomédico - Pref. Guaraí/TO- 2016
“A Gram-Bretanha e a Ásia estão enfrentando um surto de escarlatina que
intriga especialistas. De acordo com a Autoridade de Saúde Pública da
Inglaterra (PHE, na sigla em inglês), em 2015, foram registrados 17.586 casos
da infecção no país Î o número só não ultrapassa os registros de 1967, com
19.305 notificações. A escarlatina é uma infecção bacteriana, causada por
estreptococos do grupo A, que atinge principalmente crianças"
Referente às características das bactérias, é CORRETO afirmar que:
A) A diferenciação entre as bactérias é realizada exclusivamente pelas suas
características morfológicas.
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B) Os aspectos microscópicos, incluindo o tamanho, forma e os arranjos dos
organismos (cocos, bastonetes, curvos ou espiralados), determinam a
capacidade das bactérias de resistir a certos antibióticos.
C) Coloração de Gram é um teste rápido que permite aos clínicos a
diferenciação entre as duas mais importantes classes de bactérias.
D) As bactérias Gram negativas têm a camada de peptidoglicano espessa
contendo ácido teicoico e ácidos lipoteicoicos.
6) FAFIPA - Serviço de Biomedicina - Pref. Londrina/PR - 2015
A coleta de materiais biológicos para exames de microbiologia deve seguir as
seguintes recomendações:
A) Identificar o material do paciente adequadamente.
B) Informar dificuldades que possam ocorrer durante a coleta, como
material insuficiente para análise adequada.
C) Informar sobre o uso de antimicrobianos prévios à coleta do material
pelo paciente.
D) No geral, os procedimentos de coleta seguem protocolos específicos que
facilitam o cultivo dos micro-organismos suspeitos, de acordo com o
sítio a ser investigado.
E) Todas estão corretas.
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Sobre o método de Ziehl-Nielsen para bacterioscopia direta, pode-se afirmar
que:
A) Esta metodologia categoriza as bactérias em álcool-ácido-resistentes e não
álcool-ácido resistentes.
B) O corante empregado é o Albert-Layborn, capaz de penetrar no interior do
Mycobacterium tuberculosis.
C) É sempre utilizada em associação com o método de impregnação em prata.
D) Deve ser confirmado por microscopia de campo escuro ou pelo método de
tinta nanquim.
E) Utiliza um corante que pode se tornar fluorescente na microscopia óptica.
8) Biomédico - Pref. Natal/RN 2016
A respeito da coloração bacteriana de Gram:
A) As bactérias que possuem a camada de lipídios associados a
Polissacarídeos não são coradas pela coloração de Gram.
B) Escherichia coli e Staphylococcus aureus são bactérias Gram-negativas.
C) Bactérias Gram negativas são aquelas que apresentam uma camada
lipídica não corada pelo corante devido à afinidade entre a pigmentação
e a camada de fosfolipídeos.
D) As bactérias Gram-positivas têm parede celular espessa e única de
peptidoglicanos, que, ao contato com a coloração de Gram, adquire cor
púrpura ou azul.
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1. C
2. A
3. E
4. D
5. C
6. E
7. A
8. D
FORÇA! Espero vocês nas próximas aulas!!!
Professora Pollyana Lyra.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
MURRAY, PR. et al. Microbiologia Médica. 5. ed. Rio de Janeiro: Elsevier,
2006. 992 p.
LUIZ B. TRABULSI e FLÁVIO ALTERTHUM. Microbiologia. 5 ed. Atheneu,
2009
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