centro universitário fundação santo andré ana claudia somma

CENTRO UNIVERSITÁRIO FUNDAÇÃO SANTO ANDRÉ
ANA CLAUDIA SOMMA JACINTO
DETERMINAÇÃO DO FÁRMACO ÁCIDO ÉPSILON
AMINO CAPRÓICO EM AMOSTRA COMERCIAL POR
TITULAÇÂO VOLUMÉTRICA E POTENCIOMÉTRICA
SANTO ANDRÉ
2011
DETERMINAÇÃO DO FÁRMACO ÁCIDO EPSILON
AMINO CAPRÓICO EM AMOSTRAS COMERCIAIS POR
TITULAÇÂO VOLUMÉTRICA E POTENCIOMÉTRICA
(Relatório final)
PROJETO
DE
PESQUISA
APRESENTADO AO PROGRAMA DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA DO CENTRO
UNIVERSITÁRIO FUNDAÇÃO SANTO
ANDRÉ
ORIENTADOR:
PROF. DR. RICARDO FERREIRA DE
ANDRADE
SANTO ANDRÉ
2011
Resumo
O ácido Epsilon amino capróico (AEAC) é derivado do aminoácido lisina, assim
como seu análogo, o ácido Tranexâmico. Ambos são obtidos de forma
sintética, assim sendo, não são encontrados na natureza. Para o ácido Épsilon
amino capróico, a forma mais usual encontrada são a pílulas do fármaco
Ipsilon, produzido pelos Laboratórios Nikkon. O objetivo deste trabalho foi
avaliar metodologias de análises que se destacam pelo baixo custo do
equipamento e fácil execução na determinação do AEAC. Foram aplicadas e
comparadas as técnicas potenciométrica e volumétrica através de titulações
com solução padronizada de ácido perclórico em ácido acético glacial. Os
resultados obtidos mostraram boa precisão e exatidão podendo ser aplicados á
determinação do fármaco em formulações comerciais..
Palavras – Chave: ácido épsilon amino capróico, volumetria, titulação
potenciométrica.
SUMÁRIO
1. Introdução
05
1.1 Mecanismo de ação
05
1.2. Método volumétrico
06
1.3. Método potenciométrico
06
1.4 Titulação em meio não aquoso
2. Justificativa
08
3. Objetivo
08
3.1 Geral
08
3.2 Específicos
08
4. Materiais e métodos
09
4.1 Materiais e equipamentos
09
4.2 Desenvolvimento da análise
09
5. Resultados
11
6. Conclusão
15
7. Referências Bibliográficas
16
1. INTRODUÇÃO
“ O ácido épsilon amino capróico (Ípsilon, Figura 1) é um medicamento
indicado para o tratamento de hemorragias em geral, principalmente nas
induzidas por hiperfibrinólise e por agentes trombolíticos, no pós cirúrgico, nas
caudadas por discrasias sanguíneas
( anemia aplasmática, púrpuras,
hemofilias A e B, leucopenias, leucose. Está indicado também como preventivo
de hemorragias subaracnóideas recorrentes e no pré- operatório de cirurgias
que, sabidamente, causem grandes perdas de sangue.” (BULA, 2011).
Vários métodos são descritos na literatura para a determinação de Ácido
Épsilon amino capróico em fármacos como os voltamétricos (SÁ, GABRIEL,
CARMO, 2009), espectrofotométricos, (SUAREZ, VIEIRA, FATIBELO-FILHO,
2005) ,(RAGGI, CAVRINI, DIPIETRA,1982), eletroquímicos, (CARMO, SILVA,
STRADIOTTO,2003),fluorimétricos(AL-GHANNAM, EL-BRASHY, AL-FARHAN,
2002), por CLAE (TSAI, CHEN, CHIEN,1995), quimioluminescentes, ( DU, LI,
LU, 2001). Em sua grande maioria estes métodos podem ser adequados à
análises de rotina, porém a maioria requer equipamentos ou reagentes de alto
custo. Por outro lado, os métodos volumétricos e potenciométricos se
destacam pelo baixo custo do equipamento, fácil execução e aplicabilidade em
análises rotineiras.
Figura 1. Ácido épsilon aminocapróico
1.1 Mecanismo de Ação
O Ácido épsilon amino capróico (AEAC) impede que as enzimas fibrinolíticas
liguem-se aos resíduos de lisina existentes na molécula de fibrinogênio,
quando administrado, o AEAC combina-se com ao plasminogênio e a plasmina
livre. Essa inibição se dá através dos grupos amino e carboxila livres. Essa
ação resulta numa redução da atividade fibrinolítica da plasmina, aumentando
a eficiência hemostática do coágulo. Não é metabolizado in vivo e tem entre
40% e 60% dos seus componentes eliminados in natura através da urina. Seu
uso é requisitado no combate e prevenção de hemorragias em geral. (BULA,
2011).
1.2. Método volumétricos
Volumetria é um método de análise química quantitativa que se fundamenta na
medição do volume de solução de um reagente necessário e suficiente para
efetuar determinada reação.
A volumetria é também chamada de titrimetria, termo oriundo do inglês titration,
titulação.
A titulação é uma das técnicas utilizadas em volumetria. Em um processo
titulante determina-se o volume de uma solução "A" que reage com uma outra
solução "B" de concentração e volume previamente determinados (quando a
espécie química a dosear é um ácido ou uma base, a volumetria toma o nome
de volumetria ou titulação ácido-base). A partir desse volume de "A" que reagiu
com "B", podemos determinar a concentração de "A" através da fórmula:
Ca * Va = Cb * Vb
Em que:
Ca = Concentração da solução "A"
Va = Volume da solução "A"
Cb = Concentração da solução "B"
Vb = Volume da solução "B"
Um indicador é utilizado para indicar quando a reação entre A e B se
completou, e esse indicador vem a ser escolhido de acordo com o tipo da
reação química. Por exemplo: quando reagimos NaOH com HCl, devemos
utilizar um indicador ácido-base que irá revelar o momento em que a reação
se completou.
Reações
de precipitação, oxiredução e complexação
respectivos tipos de indicadores.
demandam
seus
Para que a solução mude de cor ou forme precipitado sempre há um
excesso de reagente, que deve ser determinado através de cálculos antes
de
se
aplicar
os
dados
obtidos
da
reação
na
fórmula
citada
acima.(VIKIPEDIA, 2011)
1.3 Método potenciométrico
Na titulação potenciométrica
determina-se a concentração da espécie de
interesse através da medida da força eletromotriz da célula (medida do
potencial ou do pH), após incrementos sucessivos do titulante. O volume de
titulante gasto é determinado através de um gráfico de pH versus volume de
titulante. Para a medição da variação do pH durante a titulação utiliza-se um
eletrodo combinado de vidro sensível aos íons H+ . (CIENFUEGOS,VAITSMAN,
2000).
1.4 Titulação em meio não aquoso
Usa-se um grande número de solventes inorgânicos para determinações em
meio não – aquoso. Em todas as circunstâncias, para que se obtenham pontos
finais nítidos, os solventes usados devem ser puros, secos e de grau analítico.
O ácido acético glacial, ácido usado para ambas as titulações desse trabalho, é
o solvente mais utilizado com sua finalidade essencial, solvente. Esse ácido
pode ser usado puro ou em conjunto com outros solventes; para a titulação
realizada, o ácido foi utilizado puro.
A maioria das titulações – não aquosas também é feita com uma variedade
limitada de indicadores, o escolhido para auxiliar a titulação foi o violeta cristal,
pois é utilizado em titulações com ácido acético glacial. Sua indicação de cor se
inicia no violeta, passando para azul, para o verde e por fim, para um amarelo
esverdeado, indicando a mudança de meio na titulação. (VOGEL, 1992)
2. JUSTIFICATIVA
A metodologia inicial proposta para a determinação do ácido épsilon
aminocapróico
em
medicamentos
previa
a
aplicaçâoo
das
ténicas
potenciométrica e condutimétrica em meio aquoso. O objetivo inicial era titular
amostras do comprimido com solução padronizada de HCl, porém o fármaco
apresentou comportamento anfótero não permitindo a aplicação dos métodos
inicialmente previstos. Assim sendo foi feito um estudo para a utilização dos
métodos volumétrico e potenciométrico em meio não aquoso. Tal utilização foi
possível devido á formação de par iônico entre o grupo amina e o íon H+
proveniente do titulante (ácido perclórico).
Optou-se então, em realizar uma análise comparativa entre o método
volumétrico e potenciométrico na determinação da substância.
3. OBJETIVOS
3.1 Geral
Desenvolvimento de metodologia de análise do medicamento Ípsilon em
amostra comercial de comprimidos.
3.2
Específicos
•
Determinar a quantidade de ácido épsilon amino capróico em formulação
comercial em comprimidos por titulação volumétrica utilizando ácido perclórico
em meio de ácido acético glacial como titulante.
•
Determinar a quantidade de ácido épsilon amino capróico em formulação
comercial granulada por titulação potenciométrica utilizando ácido perclórico
em meio de ácido acético glacial como titulante.
•
Comparar os resultados obtidos com aqueles declarados pelo fabricante
4. MATERIAIS E MÉTODOS
4.1 Materiais e equipamentos
Para as medidas potenciométricas foi utilizado o potenciometro digital Micronal
disponível no laboratório de Química e materiais volumétricos como buretas,
pipetas, balões volumétricos e outros de uso comum em laboratório.
Reagentes: amostra comercial em forma de comprimidos (Ipsilon 500 mg)
adquirida no comércio. Para a titulação potenciométrica e volumétrica em meio
não aquoso foram utilizados os seguintes reagentes: ácido acético glacial,
biftalato de potássio, ácido perclórico e violeta cristal como indicador.
4.2
Desenvolvimento da análise
4.2.1. Preparação da solução de ácido perclórico 0,1 mol/L.
A solução de ácido perclórico foi preparada da seguinte forma: A partir de um
volume de 4,3 mL de ácido perclórico adicionou-se cerca de 500 mL de ácido
acético glacial.
4.2.2 Preparação da solução de ácido épsilon amino capróico
Pesou-se em balança analítica, um por um, 10 comprimidos de Ipsilon. A seguir
os comprimidos foram macerados em um almofariz. Pesou-se em balança
analítica 150 mg dessa amostra, adicionou-se cerca de 50 mL de ácido acético
glacial obtendo-se a dissolução da amostra com o uso de agitação mecânica.
Este procedimento foi repetido em todas as determinações volumétricas e
potenciométricas.
4.2.3 Padronização da solução de ácido perclórico 0,1 mol/L
Completou-se o volume de uma burata de 10,00 ml com a solução preparada
em 4.2.1 e padronizou-se com biftalato de potássio em solução de ácido
acético glacial e adição de 3 gotas do indicador violeta cristal (viragem de
violeta para verde). Cada mL de ácido acético glacial corresponde a 20,422 mg
de biftalato. A solução apresentou concentração de 0,0930mol/L de HClO4 em
ácido acético glacial.
4.2.4 Titulação volumétrica de solução de ácido épsilon aminocapróico
A solução descrita em 4.2.2 foi titulada com a solução padronizada de ácido
perclórico em ácido acético glacial e a adição de 3 gotas do indicador violeta
cristal. O volume do ponto final da titulação foi obtido e os dados tabelados. A
partir da massa média de 10 comprimidos foram obtidos valores de massa de
ácido épsilon amino capróico por comprimido, num total de 6 determinações.
4.2.5 Titulação potenciométrica de solução de ácido épsilon aminocapróico
A partir de soluções descritas em 4.2.2 aplicou-se a técnica potenciométrica
utilizando o eletrodo combinado de vidro , sendo que a adição de titulante
acarretará a variação do potencial durante a titulação, o que nos permitiu a
obtenção da curva potencia E(V)
versus volume de HClO4 NaOH, a
determinação do ponto final da titulação e o cálculo da quantidade de ácido
épsilon aminocapróico no medicamento. A solução descrita em 4.2.2 foi titulada
com a solução padronizada de ácido perclórico. O volume do ponto final da
titulação foi obtido e os dados tabelados. A partir da massa média de 10
comprimidos foram obtidos valores de massa de ácido épsilon amino capróico
por comprimido, num total de 6 determinações.
Os resultados obtidos pelos métodos foram confrontados com os obtidos por
volumetria e com valor declarado pelo fabricante.
5. RESULTADOS
Os resultados obtidos através da titulação do fármaco com ácido perclórico em
meio não aquoso e com o uso do indicador violeta cristal são mostrados na
Tabela 1.
Tabela 1. Valores obtidos com a titulação de ácido épsilon aminocapróico com
HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso:
Experimento
Volume de HClO4 (m L)
Massa do comprimido (g)
1
10,9
0,525
2
10,8
0,511
3
10,6
0,520
4
10,6
0,506
5
10,6
0,534
6
10,7
0,514
•
Massa média de 10 comprimidos m= 0.606 ± 0.006 g
•
Massa por comprimido m= 0.518 ± 0.01 g
•
Massa declarada pelo fabricante: 500 mg por comprimido
Os resultados obtidos através da titulação do fármaco com ácido perclórico em
meio não aquoso e com o uso do potenciômetro com eletro do de vidro são
mostrados nas Tabela 2 a 8
Tabela 2. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com
meio não aquoso:
1ª
determinação
Volume(ml)
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.9
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
HClO4 0,0930 mol/L em
E(mv)
314
321
327
334
342
349
358
368
381
399
432
520
600
618
627
632
Tabela 3. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso
2ª
determinação
Volume(ml)
E(mv)
0.0
330
1.0
333
2.0
341
3.0
348
4.0
355
5.0
362
6.0
372
7.0
381
8.0
394
9.0
520
10.0
551
11.0
570
12.0
617
13.0
630
14.0
637
15.0
642
Tabela 4. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso
30
determinação
Volume(ml)
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
E(mv)
348
351
357
363
369
377
386
395
409
432
588
612
633
641
647
651
Tabela 5. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso
4ª
determinação
Volume(ml)
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
11.0
12.0
13.0
14.0
15.0
E(mv)
353
356
361
367
373
380
387
397
410
430
573
603
629
640
646
650
Tabela 6. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso
5ª
determinação
Volume(ml)
E(mv)
0.0
355
1.0
358
2.0
362
3.0
367
4.0
372
5.0
379
6.0
386
7.0
395
8.0
407
9.0
422
10.0
556
11.0
572
12.0
620
13.0
637
14.0
645
15.0
650
Tabela 7. Valores obtidos com a titulação potenciométrica de ácido épsilon
aminocapróico com HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso
6ª
determinação
Volume(ml)
E(mv)
0.0
354
1.0
357
2.0
362
3.0
367
4.0
372
5.0
379
6.0
387
7.0
395
8.0
409
9.0
428
10.0
583
11.0
603
12.0
631
13.0
643
14.0
649
15.0
652
Tabela 8. Valores obtidos com a titulação de ácido épsilon aminocapróico com
HClO4 0,0930 mol/L em meio não aquoso:
Experimento
Volume de HClO4 (m L)
Massa do comprimido (g)
1
10,5
0,525
2
9,5
0,458
3
10,5
0,516
4
10,5
0,502
5
10,5
0,512
6
10,5
0,506
•
Massa média de 10 comprimidos m= 0.606 ± 0.006 g
•
Massa por comprimido m= 0.503 ± 0.01 g
•
Massa declarada pelo fabricante: 500 mg por comprimido
6. CONCLUSÃO
Os dois métodos se mostraram aplicáveis à determinação do ácido Epsilon
aminocaproico em comprimidos comerciais.
A análise estatística mostrou que ambos os métodos são equivalentes.
A titulação em solventes não aquosos demonstrou ser um pouco trabalhosa no
que se diz respeito a manipulação do ácido acético glacial. Por ser muito
concentrado e exalar um cheiro muito forte exigiu uma série de cuidados ao ser
manipulado, tais como uso de máscara e capela. Entretanto o método pode ser
facilmente aplicado às amostras comerciais, pois envolve materiais de baixo
custo e fácil manipulação.
Os valores obtidos da massa dos comprimidos estão de acordo com o valor
declarado pelo fabricante.
Referências
MEDICINA NET. Acido aminocapróico.
Disponível em <http:/www.medicinanet.com.br>.Acesso em 20 out. 2010.
BULAS DE MEDICAMENTOS NA INTERNET. Ipsilon.
Disponível em <HTTP.www.bulas.med.br> Acesso em 20 out. 2010
CIENFUEGOS,Freddy;VAITSMAN,Delmo. Analise Instrumental. Ed.
Interciência, Rio de Janeiro, 2000.
PINTO, PC; SARAIVA, ML; SANTOS, JL; LIMA,JL Fluorimetric determination
of aminocaproic acid in pharmaceutical formulations using a seqüencial
injection analysis system. Talanta. Vol.68(3), pág. 857-862, 2005.
KEUCHER,
TR;
SOLOW,
EB;
METAXAS,
J;
CAMPBELL,RL,
Gas
chromatographic determination of an anfibrinolytic drug, epsilonaminocaproic acid, Clinical Chemistry, Vol. 22, pág 806-809, 1976.
FARID,
NA,
Fluorescamine
use
in
high-performance
liquid
chromatographic determination of aminocaproic acid in serum. J. Pharm.
Sci., vol. 68(2), 1979.
HARRIS, DC. Análise Química Quantitativa. Ed. LTC, Rio de janeiro, 2001.
JEFFERY, GH; BASSETT, J; MENDHAM, J; DENNEY, RC. Análise Química
Quantitativa. Ed. Afiliada,Rio de Janeiro, 1992, 5 ed. Pg 233 – 234 – 235.