controle microbiologico simposio cear_i_angela

ESTA PALESTRA NÃO PODERÁ
SER REPRODUZIDA SEM A
REFERÊNCIA DO AUTOR.
Controle Microbiológico em
Hemocomponentes
Maria Angela Pignata Ottoboni
Laboratório de Controle da Qualidade
Hemocentro de Ribeirão Preto
Introdução
A contaminação bacteriana do sangue é a mais
velha das complicações infecciosas transmitida
por transfusão, e continua sendo um problema,
especialmente para os concentrado de
plaquetas.
È o mais prevalente risco de infecção pelos
produtos sanguíneos :
10 a 1000 vezes maior que o risco de
contrair HIV, HCV e HTLV.
Introdução
•Frequência de ocorrência de contaminação
bacteriana é de 1 :2000 a 1:3000 transfusões de
CPs.
•França – 18 mortes ( 1994 – 1998)
•USA – 6 mortes ( BaCon Study)- 1998- 2000
•UK – 22 incidentes , 6 fatais ( SHOT) -1995-2002
Shoji, Transfusion , 2007
Introdução
•Bactéria Prolifera durante o armazenamento :
•Baixas concentrações de inoculo no momento da
coleta (<101 UFC/mL) evolui para altas concentrações ( >
108 UFC/mL) durante o armazenamento,
principalmente as plaquetas
Mathai, Transfusion , 2009
Introdução
•Exata incidência da contaminação bacteriana nos produtos sanguíneos é
desconhecida porque os diferentes estudos usam diferentes métodos de
detecção.
•Nos Estados Unidos a sepsi bacteriana é considerada a 2ª causa de morte (
depois do ABO incompatível).
•Relato de bacteremia nos CPs ocorre em uma frequência 50 vezes maior que
no CHs. Sendo 3 vezes maior no pool que nas aféreses.
•Sérios fatores contribuem para a persistência
da contaminação bacteriana no sangue :
1-Falta de reconhecimento da frequência do problema;
2-Reconhecimento clinico dos sinais e sintomas da reação transfusional, que se
confundem com a doença de base do paciente;
3- Paciente em uso de antibióticos, antitérmicos ou outros medicamentos que
mascaram os sinais;
4- Tipo de bactéria, nível de contaminação e condições do paciente são bastante
diferentes e causam diferentes reações, ou ficam mascaradas.
Introdução
•2002: CAP recomenda que métodos para detectar
contaminação bacteriana sejam introduzidos;
•2004: AABB - 1 de março de 2004 – implementar métodos para reduzir
/detectar a presença de contaminação bacteriana em CPs;
•2010 : AABB – 100 % realização de cultura ou outro método validado para
detectar presença de bactéria nos CPs.
Contaminação bacteriana
 A literatura relata a existência de 0,03% a 2,2 % contaminação bacteriana,
dependendo do hemocomponente
( Bruneau, 2007)
 Antes da implementação dos requisitos recomendados
1/ 2.000 a 1/ 3.000 unidades de plaquetas contaminadas por bactérias provenientes
do doador.
1/967 a 1/2900
1/553 a 1/1780
Ensaios não padronizados : pouca redução dos
níveis de contaminação
Dilemas e desafios da contaminação
bacteriana atualmente
Fechar as lacunas em matéria de segurança nas transfusões de CPA e CPR
 Definir a incidência de contaminação bacteriana residual em PLTs com uma
desinfecção da pele mais eficiente, bolsa com desvio e a cultura de
amostragem da bolsa;
Avaliar a segurança dos ensaio para detectar a presença de bactérias nas PLTs
para transfusão ( é clinicamente eficaz e de baixo custo, efetivo);
Dilemas e desafios contaminação
bacteriana atualmente
 Definir a utilidade e o custo-eficácia da obrigatoriedade do uso do frasco de cultura
anaeróbio ;
Definir o volume ideal da amostra para se conseguir detectar a presença de bactérias nas
PLT mais precocemente;
Determinar se a estratégia de inativação do patógeno é seguro, eficaz e custo efetivo
para a erradicação da contaminação bacteriana nos PLT;
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
Fontes
de Contaminação
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
Coleta do
sangue
Fontes
de Contaminação
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
1. Ponto Crítico : coleta do sangue
Assepsia – o braço do doador é a maior
fonte de contaminação) – 80% contaminação
bacteriana são de bactérias vindas da flora do
braço do doador ( Stainsby, 2003).
.
Processo da doação ( não efetuar coleta
em locais de cicatriz)
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
• Níveis de contaminação residual após a
introdução de desvio e juntamente com a
melhorias na desinfecção do braço do doador,
tem mostrado uma redução na ordem de 3040%.
(C. P. McDonald, 2006)
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
• A desinfecção reduz a carga de bactérias do braço do
doador mas não esteriliza, e ainda..... bactérias das
camadas inferiores não são removidas na assepsia
(KOJIMA, 1998)
• A flora residente da pele pode responder pela
contaminação bacteriana em 57% dos CP e 37% do
CH (Stainsby, 2003).
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
• As intervenções desinfecção do braço dos doadores,
o desvio de fluxo e detecção de bactérias foram
implementadas pelos serviços de sangue e mostrou
ter o benefício substancial.
• A principal fonte de contaminação bacteriana é o
braço doador e os serviços de sangue estão agora a
introduzir as melhores técnicas e práticas de
desinfecção braço doador.
(C. P. McDonald, 2006)
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
• Estudos ( Goldman et al.1997; Pleasant et al.1994 e McDonald et
al.2001b) demonstraram a aplicação de isopropílico álcool 70%
seguido por tintura de iodo a ser a melhor prática. Na verdade, esta
técnica tem sido amplamente utilizado e tem mostrado uma
redução de 57% nos níveis de contaminação dos
hemocomponentes.
• Estudos demonstrara que em 50 % dos doadores a flora residente
da pele da fossa ante cubital do braço pode conter uma média de
105 bactérias /cm3. antes da desinfecção.
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
Coleta do
sangue
Fontes
de Contaminação
Bacteremia
assintomática
do doador
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
 Seleção do doador (bacteremia subclinica -melhorias na
triagem)
IMPORTANTE : otimizar as melhorias na abordagens das triagem
de doadores (Prentice, 1992).
• Bacteremia transitória ( ex: tratamento dentário) ou
• Estado crônico da doença ( isquemia nas extremidades,
infecções não visível ao triador)
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
Coleta do
sangue
Fontes
de Contaminação
Equipamentos
contaminados
Bacteremia
asintomática
do doador
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
 Processamento, armazenamento, transporte:
melhorias na implementação de BPF( uso de
conecção estéril, limpeza adequada nos locais de
armazenamento, das caixas de transporte).
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
Processamento e
armazenamento
Coleta do
sangue
Fontes
de Contaminação
Equipamentos
contaminados
Bacteremia
asintomática
do doador
Pontos críticos do processo.
Fontes potenciais de contaminação
• Melhorias no processamento : Leucorredução;
• Otimização das temperatura de
armazenamento de componentes sanguíneos;
• Limitações no tempo de armazenamento;
• Benefícios adicionais : Redução a exposição do
paciente a vários doadores;
Testes empregados para avaliação de
esterilidade
O principal teste é a cultura microbiológica.
Dificuldades:
 Remoção de volume do hemocomponente que
pode interferir na dose terapêutica;
 Tempo do resultado da cultura compromete a
disponibilidade do produto;
 Custo do teste.
Testes empregados para avaliação de
esterilidade
Culturas monitoradas por sistema Bact Alert
ou BDS;
Coloração de Gram;
RIF;
Quimiluminescência;
PCR;
Verax PGD;
Outras técnicas.
Sensibilidade analítica dos métodos de
detecção
Sensibilidade
UFC/mL
Bact Alert /
Bactec
Pall e BDS
swirling
Tiras reativas
Coloração de
Gram
PCR
PGD
Citometria de
fluxo
101
Especificidade
%
>90
101 a 102
107 – 108
>107
>90
baixa
baixa
>106
>90
>103
104 – 105
102
>90
%
>90
>90