UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE INSTITUTO BIOMÉDICO DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA E PARASITOLOGIA CURSO DE MEDICINA VETERINARIA DISCIPLINA DE VIROLOGIA POXVIRIDAE Prof. Marcelo de Lima • Edward Jenner : Estudos com o vírus da varíola Poxviridae • História da imunologia e vacinologia está ligada aos poxvírus • Vírus da varíola: primeiro vírus humano erradicado (1979) – Bioterrorismo Vírions grandes, complexos, que possuem fita dupla de DNA Replicam no citoplasma Classificação da família • Baseada em características genéticas e antigênicas • 2 subfamílias: • Chordopoxvirinae – Vertebrados • 8 gêneros • Entomopoxvirinae – Insetos • 3 gêneros Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Vírus da vaccinia Varíola bovina Vírus ectromelia Varíola dos camelos Varíola dos macacos Vírus Uasin Gishu Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Varíola ovina e caprina Doença da pele nodulosa Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Varíola suína Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Ectima contagioso Pseudovaríola bovina Estomatite papular bovina Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Bouba aviária Varíola dos canários Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Mixoma dos coelhos Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Molluscum contagiosum Classificação da família Molluscipoxvirus Capripoxvirus Suipoxvirus Chordopoxvirinae (vertebrados) Orthopoxvirus Avipoxvirus Leporipoxvirus Poxviridae Yatapoxvirus Entomopoxvirinae (insetos) Parapoxvirus Yabapox e tanapox Morfologia 90% proteínas, 5% lipídeos e 3.2% DNA = vaccinia • Vírions: 170-260 nm x 300-450 nm • Visíveis em microscopia óptica • Nucleocapsídeo de simetria complexa • Envelope – EEV - extracellular enveloped virion – IMV - intracellular mature virion • DNA de fita dupla 130-300Kb Todo o sistema de transcrição inicial está contido no vírion Morfologia Corpos laterais Envelope interno Núcleo bicôncavo DNA de fita dupla Envelope externo Enzimas Palisada Vírions compostos por mais de 35 polipeptídeos Poxviridae Microscopia eletrônica do vírus vaccinia Envelope Núcleo Envelope duplo Corpos laterais Genoma • DNA de fita dupla linear, 130 Kbp (parapoxvirus) a 300 Kbp (avipoxvirus) • Região terminal invertida – ITR • Mais de 200 genes – várias sequências abertas de leitura (ORFs) • Codificam todas as enzimas para transcrição e replicação Poxviridae – Ciclo Replicativo 1. Entrada na célula-alvo 2. Desnudamento do genoma 3. Síntese de RNA mensageiro 4. Síntese de proteínas 5. Replicação do genoma 6. Montagem e liberação das partículas Ciclo replicativo é complexo, vários mecanismos pouco elucidados... Montagem, maturação e Liberação Prinicipais poxvírus de interesse veterinário: • • • • • • • • • Varíola bovina, suína, caprina e ovina Vírus Vaccinia Doença da pele nodulosa (lumpy skin disease) Pseudovaríola Ectima contagioso Estomatite papular bovina Bouba Aviária Mixoma dos coelhos Molluscum contagiosum Vírus Vaccinia • Lesões em humanos, bovinos, suínos e coelhos • Transmissão por exsudato das lesões: presença de abrasões na pele • Surtos desde 1999 no Sudeste do Brasil • Vírus Cantagalo – – – – Bovinos de leite Relacionados à falta de higiene e ordenha manual Eritema róseo e edema nas tetas e úbere Caráter zoonótico Varíola em bovinos e humanos Varíola bovina • • • • • • Cowpox Infecta várias espécies Ocorre na Europa e Rússia Roedores silvestres são os hospedeiros naturais Gatos são susceptíveis Surtos em animais selvagens • Humanos: uma única erupção na pele – Mais grave em crianças – Linfadenopatia, febre, náuseas Lesões ulceradas e formação de crostas nos tetos Varíola caprina e ovina • Acomete ovinos e caprinos • Sheeppox e goatpox • Enfermidade notificável – Diagnóstico necessário para transporte internacional • Perdas econômicas significativas • Ocorre na Ásia, Índia eÁfrica • Ocorrem durante todo o ano (surtos graves no inverno) Varíola caprina e ovina • Sinais clínicos • Lesões de pele: pápulas, vesículas, pústulas, crostas, necrose • Febre, rinite, dispnéia, edema de pálpebras e conjuntivite • Curso clínico de 3 a 4 semanas Lesões necróticas em órgãos Varíola aviária – Bouba aviária • Poxvírus que infecta galinhas, perus e raramente pombos • Transmissão mecânica por vetores e por contato direto e indireto • Forma cutânea, diftérica ou ambas • Surtos com apresentação clínica incomum teve grande repercussão econômica no sul do Brasil nos anos 90 Varíola aviária – Bouba aviária Forma cutânea, diftérica ou ambas • Depressão, perda de peso, queda na produção de ovos, lesões (pápulas, vesículas e crostas) na cabeça, pescoço, patas e ao redor da cloaca • Forma diftérica: dispnéia, inapetência, descarga nasal e ocular, placas amareladas na boca Ectima contagioso (OrfV) • Enfermidade exantematosa vesicular e pustular localizada • Acomete ovinos e caprinos • Possui distribuição mundial • Doença grave em cordeiros lactentes • Lesões nos lábios e focinho, boca e língua, áreas interdigitais, genitália e úbere Ectima contagioso • Controle e prevenção • VACINAÇÃO – Vacinas contém vírus patogênico – Suspensão de crosta em uma área escarificada na face interna da coxa ou axila – A imunidade é de aproximadamente um ano Diagnóstico dos poxvírus • Virológico •Material a ser enviado • Crostas, fluído das lesões (suabes), biopsias de pele •Técnicas: • Microscopia eletrônica • Inoculação em ovo embrionado 9-12 dias • Isolamento em células • Imunofluorescência • PCR • Soroneutralização Efeito citopático do vírus orf Membrana corioalantóide de ovos embrionados