CIÊNCIA EQUATORIAL Artigo Original ISSN 2179-9563 Volume 2 - Número 2 - 2º Semestre 2012 GENOTIPAGEM DO VÍRUS HEPATITE C EM PESSOAS ATENDIDAS NO CENTRO DE REFERÊNCIA DE DOENÇAS TROPICAIS-CRTD AMAPÁ, AMAZÔNIA BRASILEIRA Klingerry Silva Penafort1, Artemis Socorro do Nascimento Rodrigues2 RESUMO Introdução: A hepatite C é uma doença infecciosa grave com grande potencial para evolução crônica, podendo progredir para cirrose e hepatocarcinoma. A genotipagem do VHC constitui ferramenta essencial na prática clinica em razão de sua importância nas decisões terapêuticas. Os estudos clínicos têm demonstrado respostas virologicas variáveis ao tratamento da hepatite C crônica com interferon peguilado mais ribavirina com base na infecção por distintos genótipos. Métodos: Foram estudadas 15 amostras diagnosticadas com hepatite C atendidas no Centro de Referência de Doenças Tropicais-CRDT do Estado do Amapá, no período de Agosto de 2011 à Setembro 2011. Resultados: Todas as 15 (quinze) amostras de sangue estudadas apresentaram no genótipo 1. Destas, 71,34% apresentaram o genótipo tipo 1b, 13,33% genótipo 1a. Conclusão: O genótipo do HCV mais encontrado neste estudo foi o genótipo 1. 71,34% das pessoas que aceitaram fazer parte deste estudo apresentaram este genótipo. Em nosso estudo os subtipos encontrados do genótipo 1 do HCV foram 1b seguido do 1a. Considerando que este é o primeiro trabalho realizado no estado com intuito de apresentar o provável genótipo do HCV mais frequênte no Amapá. Acreditamos que uma vez divulgado estes resultados iniciais mais pessoas aceitarão participar de um próximo estudo com esta temática. Palavras-chave: Vírus da hepatite C, Genotipagem, Centro de Referência de Doenças Tropicais, Amapá. SICKLE CELL TRAIT: THE IMPACT ON PUBLIC HEALTH ABSTRACT Introduction: Hepatitis C is a serious infectious disease with great potential for chronic disease, which can progress to cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Genotyping of HCV is an essential tool in clinical practice because of its importance in therapeutic decisions. Clinical studies have shown variable virologic responses to treatment of chronic hepatitis C with pegylated interferon plus ribavirin based on infection with different genotypes. Methods: We studied 15 samples diagnosed with hepatitis C treated at the Reference Center for Tropical Diseases-CRDT the State of Amapá, in the period August 2011 to September 2011. Results: All the 15 (fifteen) blood samples studied had the genotype 1. Of these, 71.34% had genotype 1b type, 13.33% genotype 1a. Conclusion: HCV genotype found in this study was more genotype 1. 71.34% of people who agreed to be part of this study showed that genotype. In our study we found subtypes of genotype 1 HCV were followed by the first 1b. Since this is the first study conducted in the state with a view to presenting the probable HCV genotype more frequent in Amapá. We believe that once these initial results published accept more people participate in an upcoming study on this subject. Keywords: Hepatitis C genotyping, Reference Center for Tropical Diseases, Amapá. INTRODUÇÃO A hepatite C é uma doença infecciosa grave com grande potencial para evolução crônica, podendo progredir para cirrose e hepatocarcinoma. O vírus da hepatite C (HCV) é transmitido, principalmente, por contato com sangue contaminado, podendo ocorrer em transfusões, nos tratamentos de hemodiálise, procedimentos odontológicos, uso de drogas injetáveis, realização de tatuagem, aplicações de piercing e acidentes com materiais perfurocortantes contaminados em profissionais de saúde. No Brasil a prevalência do HCV é de 2,5 a 4,9% o que corresponde a 3,9 a 7,6 milhões de portadores crônicos, grande parte assintomáticos que desconhecem o fato de serem portadores do vírus1. O vírus da hepatite C faz parte da família Flaviviridae, sendo o único membro do gênero Hepacivirus. Esta família inclui ainda dois outros gêneros: Flavivirus, à qual pertencem os vírus da Febre Amarela e do Dengue; Pestivirus e o vírus ainda não classificado GBV-B. É um vírus envelopado, tendo seu genoma constituído por uma única fita de RNA com polaridade positiva, contendo aproximadamente 9.600 nucleotídeos. Tem o homem como seu único hospedeiro natural. Seu genoma consiste em regiões não codificadoras 5´ e 3´, que delimitam uma única fase de leitura ou ORF2,3 e 4. O vírus da hepatite C é classificado em pelo menos seis diferentes genótipos, identificados por números e em 52 subtipos, caracterizados em letras minúsculas, sendo os principais: 1 (a, b, c), 2(a, b, c), 3 (a, b), 4a, 5a, 6ª. Esses genótipos diferem entre si por pelo menos 30% de suas sequência genômica, enquanto que diferentes subtipos dentro de um genótipo podem variar em mais de 20%. Dentro de um subtipo, não há mais que 10% de sequências variantes3. A genotipagem do VHC constitui ferramenta essencial na prática clinica em razão de sua importância nas decisões terapêuticas. Os estudos clínicos têm demonstrado respostas virologicas variáveis ao tratamento da hepatite C crônica com Ciência Equatorial, Volume 2 - Número 2 - 2º Semestre 2012 interferon peguilado mais ribavirina com base na infecção por distintos genótipos. Assim, pacientes infectados pelo genótipo 1 apresentam respostas virológicas próximas de 50%, enquanto os infectados pelos genótipos 2 ou 3 têm mais chances de erradicar a infecção, da ordem de 80%. A investigação do genótipo do HCV tem, ainda, importância em investigações imunológicas que visam o desenvolvimento de vacinas5. Nosso estudo teve como objetivo identificar o tipo do vírus da hepatite C freqüente no estado do Amapá e fazer um comparativo com outros estudos realizados em outras regiões do Brasil. MATERIAL E MÉTODOS O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos (CEP) da Universidade Federal do Amapá-UNIFAP com o número de protocolo FR-441578/011. Participaram do estudo 15 pessoas diagnosticadas com hepatite C atendidas no Centro de Referência de Doenças Tropicais-CRDT do Estado do Amapá, no período de Agosto de 2011 à Setembro 2011. Após a assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido-TCLE, foram coletadas amostras de sangue e enviadas ao laboratório Unilab onde foi realizada a genotipagem RT-PCR com enzimas de restrição para a identificação do tipo do vírus da hepatite C presente em pessoas com a doente no CRDT/Amapá. RESULTADOS Todas as 15 (quinze) amostras de sangue estudadas apresentaram no genótipo 1. Destas, 71,34% apresentaram o genótipo tipo 1b, 13,33% genótipo 1a. Gráfico 1. DISCUSSÃO O genótipo do HCV mais encontrado neste estudo foi o genótipo 1. 71,34% das Página 14 pessoas que aceitaram fazer parte deste estudo apresentaram este genótipo (gráfico 1). Em um estudo realizado por Perone C e Cols, 2008, em Belo Horizonte, o genótipo 1 apresentou alta prevalência com 78, 4% das amostras estudadas. Neste mesmo estudo os autores relataram resultados de outros estudos realizados em outras cidades do Brasil, onde o genótipo 1 variou de 52, 6% no estado do Paraná a 85% em Tocantins, no Rio de Janeiro 79,1% e São Paulo 62,5%. No estado do Pará, Sawada et.al, 2011, realizaram um estudo sobre a freqüente do genótipo do HCV em diferentes categorias de exposição, neste estudo o genótipo 1 também apresentou maior freqüente, ou seja, das 312 amostras estudadas no estado do Pará 94% apresentaram o genótipo 1. Segundo, Sherlock, & Dooley, 2001, entre os genótipos pode haver diferentes prognósticos da doença, onde o tipo 1 prevalente em 40% a 80% da população mundial de infectados pelo vírus da hepatite C, parece representar o tipo viral mais agressivo, de prognóstico menos favorável e pior respondedor à terapia com Interferon, quando comparado com os tipos 2 e 3. Alguns genótipos - como 1a, 1b, 2a e 2b - possuem distribuição em todo o mundo, enquanto que os genótipos 5a e 6a são encontrados em regiões geográficas especificas. Novas variantes foram citadas no Vietnã, Tailândia, Burma e Indonésia, sendo originalmente classificadas como genótipos 7, 8, 9, 10 e 11. Porém, análises mostraram que os grupos 7,8,9 e 11 deveriam ser classificados no genótipo 6a e o tipo 10 agrupado dentro do tipo 3a do VHC, com todos seus tipos e subtipos representados8e 9 . Entretanto, apesar da falta de associação com a evolução da hepatite C, os genótipos 1a e 1b estão relacionados a uma pior resposta ao tratamento diferentemente dos tipos 2 e 3 considerados fatores de boa resposta. Em nosso estudo os subtipos encontrados do genótipo 1 do HCV foram 1b seguido do 1a. Nossos resultados quanto a presença dos subtipos também estão de acordo com os descritos na literatura. Não encontramos nenhum outro genótipo do HCV em nossas amostras. Acreditamos que um dos motivos seja o baixo número de pessoas que aceitaram participar do estudo. O Centro de Referência de Doenças Tropicais-CRDT do Amapá atende um número elevado de pessoas com hepatite C, porém muitas destas não concordaram em participar de nossa pesquisa. Considerando que este é o primeiro trabalho realizado no estado com intuito de apresentar o provável genótipo do HCV mais frequênte no Amapá. Acreditamos que uma vez divulgado estes resultados iniciais mais pessoas aceitarão participar de um próximo estudo com esta temática. Ciência Equatorial, Volume 2 - Número 2 - 2º Semestre 2012 Página 15 CONFLITO DE INTERESSE Os autores declaram não haver nenhum tipo de conflito de interesse no desenvolvimento do estudo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Silva JLA, Coêlho MRCD, Souza VSB, Domingos ALC. Soroprevalência da hepatite c em pacientes com esquistossomose. Revista Parense de Medicina, 2008, 22(1): 27-32. Raimondo G, Brunetto MR, Pontisso P. et., al. Associazione Italiana Studio Fegato Cooperative Group. Longitudinal evaluation reveals a complex spectrum of virological profiles in hepatitis B virus/hepatitis C viruscoinfected patients. Hepatology, 2006, 43(1):100-7. Simmonds P, Smith DB, Mcomish F, et., al. Identification of genotypes of hepatitis C virus by sequence comparisons in the core, E1 and NS-5 regions. J Gen Virol, 1994, 75(5):105361. Branch A.D. Hepatitis C virus RNA codes for proteins and replicates: does it also trigger the interferon response? Semin Liver Dis, 2000, 20(1):57-68. Perone C, Del Castilho DM, Pereira GL at. al. Alta prevalência do genótipo 1 em portadores de hepatite C crônica em Belo Horizonte, MG, 2008, Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 41(3):238-242. _____________________________________ Sawada L, Pinheiro ACC, Locks D, Pimenta, ASC et al. Distribution of hepatitis C virus genotypes among different exposure categories in the State of Pará, Brazilian Amazon, 2011, Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 44 (1): 8-12. Sherlock S & Dooley J. Hepatite pelo vírus C. In: Gayotto L.C.C., Alves V.A.F. Doenças do fígado e vias biliares. São Paulo: Editora Atheneu; 2001. cap.18, v.1, p.263-75. 1. Centro de Referência de Doenças Tropicais-CRDTAmapá, Enfermeiro, Mestre em Ciências da Saúde. 2. Universidade Federal do Amapá, Biomédica, Doutora em Clínica Médica. Correspondência: Dra. Artemis Rodrigues Universidade Federal do Amapá Rod. Juscelino Kubitschek, KM-02 Jardim Marco Zero - CEP 68.903-419 Macapá – AP. Email: [email protected] Mcgarvey MJ, Houghton M, Weiner AJ. Structure and molecular virology. In: Lau JYN. Hepatite C protocols: methods in molecular medicine. 1998, Totowa: Humana Press, cap.19, p. 253-70. Mizokami M, Gojobori T, Ohba KI, Ikeo K et al. Hepatite C virus type 7, 8 and 9 should be classified as type 6 subtypes, 1996, J Hepatol, 24: 622-4. Gardenal RVC, Figueiró-Filho EA, Luft JL, Paula GLSA, Vidal FG, Neto PT, Souza RAA. Hepatite C e gestação: análise de fatores associados à transmissão vertical, 2011, Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 44 (1): 43-47. Garcia FB, Pereira GA, Martins PRJ, MoraesSouza H. Epidemiological profile of hepatitis C in blood donors at the uberaba regional blood Center, 2009, Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 42 (1): 1-4. 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