Baixar este arquivo PDF

DIETA RICA EM GORDURA CAUSA ALTERAÇÕES METABÓLICAS DURANTE
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO NO MODELO DE Drosophila
melanogaster(1)
Luana Barreto Meichtry(2), Márcia Rósula Poetini Silva(3), Mariane Trindade de
Paula(3), Stífani Machado Araújo(4), Marina Prigol(5)
(1)
Trabalho executado com recursos do edital CNPq 2014 - PIBIC da Pró-Reitoria de Pesquisa.
Aluna, bolsista; Universidade Federal do Pampa, Itaqui-RS, email: [email protected]
(3)
Aluna, bolsista; Universidade Federal do Pampa, Itaqui-RS
(4)
Coorientadora, Universidade Federal do pampa, Itaqui-RS
(5)
Orientadora, Universidade Federal do pampa: [email protected]
(2)
Palavras-Chave: Dieta rica em gordura, obesidade, prole.
INTRODUÇÃO
O estado nutricional pré-gestacional e alterações de peso estão relacionados diretamente na saúde maternoinfantil, onde o maior risco para complicações gestacionais e perinatais está relacionado à mulheres obesas, sendo
evidenciado em estudos que filhos de pais com essas características de sobrepeso apresentam maior predisposição
á se tornarem obesos (LEMOS et al., 2010). Sendo assim, qualquer alteração no período intrauterino poderá resultar
em alterações metabólicas na vida adulta, podendo ser considerado também que distúrbios metabólicos maternos,
possam ser transmitidos ao feto independente do peso ao nascer (REYNOLDS; PHILLIPS, 1998).
A mosca da fruta Drosophila melanogaster e os humanos possuem homologia em inúmeros genes
relacionados à doenças humanas, conservando assim, vias metabólicas e sinalizadoras (NICHOLS, 2006). Com isso,
estudos já demonstraram à existência nesse modelo de oito peptídeos semelhantes à insulina (DILPs) e um receptor
de insulina (DINR) (KANNAN; FRIDELL, 2013).
Contudo, o modelo de estudo Drosophila melanogaster vem sendo amplamente utilizado, porém, há poucos
estudos relacionados à exposição a uma dieta rica em gordura e suas consequências no seu período de
desenvolvimento. Tendo em vista que o período de desenvolvimento embrionário é particularmente sensível á
alterações da dieta, este trabalho teve como objetivo principal investigar alterações em moscas que foram expostas à
uma dieta rica em gordura.
METODOLOGIA
As moscas Drosophila melanogaster (linhagem Harwich) foram mantidas em incubadora BOD, ciclo
claro/escuro 12h (25°C ± 1°C; 60 % de umidade) em frascos de vidro contendo 5 ml de dieta regular padrão ou dieta
rica em gordura (DRG) com 10% e 20% de óleo de coco (PAULA et al., 2016). Após sete dias da postura dos ovos as
moscas adultas foram removidas do meio. Quando os ovos foram recém-eclodidos as moscas descendentes foram
retiradas e previamente mantidas em uma dieta regular (1-3 dias de idade) até os experimentos bioquímicos de
triglicerídeos (GRONKE et al., 2003), glicose (BIRSE et al., 2010), proteínas (BRADFORD, 1976) e dosagem de
DILP6 (VANDESOMPELE et al., 2002). Concomitantemente, foi avaliada a taxa de eclosão no momento em que os
ovos eram recém-eclodidos, utilizando-se a proporção de eclosão cumulativa para contar o número total de moscas
que eclodiram em cada dieta, até que não houvesse mais ovos viáveis. As análises estatísticas foram realizadas
utilizando ANOVA de uma via seguido por Newman-Keuls post hoc. As diferenças foram consideradas significativas
entre os grupos quando p <0,05 utilizando o programa GraphPad Prism5.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Conforme nossos resultados, foi possível observar que moscas as quais receberam dietas com as
concentrações de óleo de coco durante o período de desenvolvimento embrionário, demonstraram uma diminuição
na taxa de eclosão, havendo também, um atraso no tempo para a ocorrência da mesma (Figura 1A). A influência da
nutrição sobre a função reprodutiva se dá através de modificações no peso e condição corporal, onde rápidas
modificações na composição da dieta podem afetar a homeostase metabólica e reprodutiva das fêmeas (SOUZA et
al, 2014). O desenvolvimento deste inseto inclui a fertilização e a formação do zigoto, ocorrendo dentro das
membranas do ovo. De acordo com estudos, uma dieta inapropriada pode causar alterações na quantidade de ovos
gerados e também na fertilidade de moscas (BERKEBILE et al., 2006).
Os níveis de triglicerídeos (Figura 1B) e os níveis de glicose (Figura 1C) nas moscas descendentes de mães
tratadas com dieta rica em gordura na concentração de 20% foram significativamente maiores quando comparadas
aos demais grupos. Em estudos realizados anteriormente, foi observado que uma dieta materna rica em carboidratos,
altera o metabolismo de seus descendentes, observando-se também, mudanças similares na descendência de
segunda geração, o que sugere que doenças como obesidade e alterações metabólicas podem ser herdadas através
de múltiplas gerações (BUESCHER, 2013).
O excesso de gordura corporal e a predisposição genética podem promover a resistência à insulina, que está
intimamente relacionada à síndrome metabólica (LEMOS et al, 2010) em decorrência disto, resolvemos avaliar os
níveis de Dilp 6 os quais foram significativamente maiores em moscas descendentes de mães tratadas com a dieta
rica em gordura quando comparadas aos demais grupos (Figura 1D), comprovando que a dieta rica em gordura
durante o período de desenvolvimento, causou alterações associadas a resistência à insulina, estando de acordo
com estudos realizados anteriormente.
Figura 1 - Efeito da dieta rica em gordura na taxa de eclosão, níveis de triglicerídeos, glicose e resistência à insulina em moscas que receberam a
DRG durante todo seu desenvolvimento embrionário. Em (A) taxa de eclosão, (B) níveis de triglicerídeos, (C) níveis de glicose e (D) níveis
relativos de dilp6. Os valores são média ± SE. Significância determinada por análise de uma via da variância (ANOVA) seguido pelo teste de
Newman-Keuls. * Diferença significativa em relação ao grupo controle (p <0,05).
CONCLUSÃO
Nosso estudo, utilizando o modelo de mosca da fruta Drosophila melanogaster, evidenciou que uma dieta
rica em gordura é capaz de causar alterações significativas no metabolismo de moscas descendentes de
progenitores que ingeriram uma dieta rica em gordura, estando relacionados á alterações no metabolismo da glicose,
incluindo a resistência á insulina.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRADFORD, M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of
protein-dye binding. Anal Biochem, 7, 248-254, 1976.
BERKEBILE, D. R.; SAGEL, A.; SKODA, S.; FOSTER, J. E. Laboratory Environment Effects on the Reproduction and Mortality of
Adult Screwworm (Diptera: Calliphoridae). Neotropical Entomology, 35, 781-786, 2006.
BIRSE, R.T.; CHOI J.; REARDON K.; RODRIGUEZ J.; GRAHAM S.; DIOP S.; OCORR K.; BODMER R.; OLDHAM, S. High-fatdiet-induced obesity and heart dysfunction are regulated by the TOR pathway in Drosophila. Cell Metab., 12, 533-544, 2010.
BUESCHER, J. L.; MUSSEMAN, L. P.; DUNCAN, J. G.Evidence for transgenerational metabolic programming in Drosophila. Dis
Model Mech, 6,1123-1132, 2013.
GRONKE, S.; BELLER, M.; FELLERT, S.; RAMAKRISHNAN, H.; JÄCKLE, H.; KÜHNLEIN, R. P. Control of fat storage by a
Drosophila PAT domain protein. Curr Biol., 13, 603-606, 2003.
JESSE, C. R.; FRANCO, J. L.; POSSER, T.; PRIGOL, M. High-Fat Diet Induces Oxidative Stress and MPK2 and HSP83 Gene
Expression in Drosophila melanogaster. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2016.
KANNAN, K.; FRIDELL, Y. Functional implications of Drosophila insulin-like peptides in metabolism, aging, and dietary restriction.
Frontiers in Physiology, 4, 288, 2013.
LEMOS, A. C.; MACIEL, A. A.; COELHO, S. C.; RIBEIRO, R. L. Influência da obesidade materna durante a gravidez. Saúde &
Amb. Ver, 5, 26-32, 2010.
NICHOLS, C.D. Drosophila melanogaster neurobiology, neuropharmacology, and how the fly can inform central nervous system
drug discovery. Pharmacol. Ther, 112, 677-700, 2006.
PAULA, M. T.; SILVA, M. R. P.; ARAUJO, S. M.; BORTOLOTTO, V. C.;MEICHTRY, L. B.; ZEMOLIN, A. P.; WALLAU, G. W.;
SOUZA, M. I. L. S.; GRESSLER, M. A. L.;VELÁSQUEZ, L. F. U. Interrelações entre nutrição, hormonas metabólicas e reprodução
em fêmeas ovinas. Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia, 9, 2014.
REYNOLDS, R. M. PHILLIPS, D. I. Long-term consequences of intrauterine growth retardation. Horm Res, 28-31, 1998.
VANDESOMPELE, J.; DE PRETER, K.; PATTYN, F.; POPPE, B.; VAN, R. N.; DE PAEPE, A.; SPELEMAN, F. Accurate
normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biol., 3,
2002.