título do resumo - Anais Unicentro

DIVERSIDADE DE ALELOS DE SEIS LOCI ISOENZIMÁTICOS DA
ESPÉCIE Drosophila ornatifrons (DIPTERA; DROSOPHILIDAE)
COLETADA EM DUAS ÁREAS DA REGIÃO TROPICAL DO BRASIL
Bruna Memari Trava (Outros-UNICENTRO), Carine Costa Tractz, Norbert
Padilha Heinz, Rogério Pincela Mateus, Luciana Paes de Barros Machado
(Orientadora), e-mail: [email protected].
Universidade Estadual do Centro-Oeste/Departamento de Ciências
Biológicas/Guarapuava, PR.
Área: Ciências Biológicas
Sub-área: Genética
Palavras-chave: variabilidade genética, isoenzimas, Drosophila.
Resumo:
Neste trabalho a diversidade de alelos de loci isoenzimáticos foi
amostrada em duas populações naturais de Drosophila ornatifrons com o
objetivo de verificar a aplicabilidade destes loci em estudos de estruturação
populacional nesta espécie. Foram analisados indivíduos coletados em duas
áreas da região sudeste do Brasil (Sertãozinho/SP e Cajuru/SP) através da
eletroforese para seis sistemas isoenzimáticos. Todos os seis loci obtidos
mostraram alta diversidade de alelos quando comparados com outras
espécies do gênero, sendo Est o locus com maior número de alelos (8),
seguido por Mdh e Pgm (5), Me e Mdh (4), e 1-Gpdh (3). Apenas um locus
(Mdh-1) foi monomórfico, todos os demais foram polimórficos. Estes
resultados demonstram que estes são marcadores moleculares de
importante aplicação em estudos de variabilidade genética e estrutura
populacional da espécie Drosophila ornatifrons.
Introdução
Com o advento da eletroforese a partir de 1960, a variabilidade genética dos
organismos passou a poder ser acessada através do produto dos genes, as
enzimas. Desde então, diferentes marcadores moleculares, inclusive de
DNA, foram descritos para esta finalidade, contudo as isoenzimas não se
tornaram obsoletas e demonstram ser até hoje uma importante ferramenta
para obtenção de dados relacionados à genética de população (Mateus e
Sene, 2003; Mateus et al., 2010).
Apesar do grande número de estudos utilizando espécies do gênero
Drosophila (Diptera; Drosophilidae) como um organismo modelo, para
alguns grupos de espécies brasileiras os dados ainda são muito escassos,
necessitando de mais trabalhos relacionados aos vários aspectos da
ecologia, sistemática, genética e evolução (Mateus et al., 2006). Para o
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grupo guarani, esta escassez de trabalhos é bastante evidente. Este grupo é
abundante em regiões neotropicais e apresenta 13 espécies (Vilela e
Pereira, 1993), entre estas, encontra-se a espécie Drosophila ornatifrons, do
subgrupo guarani, objeto do presente trabalho.
De acordo com o exposto, o objetivo deste trabalho foi levantar a
variação alélica e demonstrar a aplicabilidade de loci isoenzimáticos em
populações naturais de Drosophila ornatifrons coletadas de duas áreas da
região tropical do Brasil.
Materiais e métodos
Coleta dos espécimes.
Para a realização deste estudo foram coletados indivíduos da espécie
Drosophila ornatifrons em duas áreas geograficamente isoladas no estado
de São Paulo: Cajuru (CAJU - 21o 19’ S, 47o 16’ W) e Sertãozinho (SER 21° 10’ S, 48° 05’ W). As coletas foram realizadas de acordo com o descrito
por Garcia et al. (2009), utilizando iscas compostas de bananas, laranjas e
fermento biológico. Após a triagem, os indivíduos do grupo guarani foram
armazenados individualmente a seco em microtubos a – 20o C para as
posteriores análises de loci isoenzimáticos.
Análises Isoenzimáticas
A variabilidade de alelos das populações de Drosophila ornatifrons foi
realizada em dois indivíduos de CAJU e 15 de SER, através dos seguintes
sistemas isoenzimáticos: Esterase (Est), Alfa-glicerofosfato desidrogenase
(1-Gpdh), Isocitrato desidrogenase (Idh), Malato desidrogenase (Mdh-1 e
Mdh-2), Enzima málica (Me) e Fosfoglicomutase (Pgm), de acordo com
Mateus e Sene (2003). Após a obtenção dos géis, os mesmos foram
fotografados utilizando uma câmera Sony 10.2 MP acoplada ao sistema de
captura de imagens L-Pix (Loccus). As imagens foram utilizadas para a
realização das genotipagens.
Resultados e Discussão
Os dados de diversidade de alelos dos loci isoenzimáticos apresentados a
seguir são comparativos com outras populações da espécie Drosophila
ornatifrons não amostradas neste trabalho (Tractz, 2010, comunicação
pessoal). Dos nove alelos do locus Est, oito foram verificados em indivíduos
coletados em SER e dois em indivíduos de CAJU; dos três alelos de 1-Gpdh,
todos foram detectados em SER e dois em CAJU; todos os alelos (4)
apresentados para o locus Idh estavam presentes na população de SER e
apenas um em CAJU; o sistema MDH apresentou dois loci, o locus Mdh-1, o
qual foi o único monomórfico, e o locus Mdh-2, que apresentou cinco alelos,
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sendo que todos estavam presentes em SER e um em CAJU; todos os
quatro alelos de Me foram encontrados em SER e apenas um em CAJU,
assim como os cinco alelos de Pgm (Figura 1).
Os loci isoenzimáticos analisados mostraram maior diversidade de
alelos para Drosophila ornatifrons do que para outras espécies do gênero.
Por exemplo, Mateus et al. (2010) detectaram menor número de alelos em
todos estes loci analisados para duas espécies do grupo repleta, D.
antonietae e D. gouveai, mesmo com o sistema EST apresentando dois loci.
Mateus et al. (2008), analisando estes loci em diferentes espécies do grupo
tripunctata, ao qual pertence a mesma seção (quinaria-tripunctata) que o
grupo guarani de D. ornatifrons, observaram maior número de alelos apenas
para Idh e Mdh-1, para os outros loci o número de alelos observados neste
trabalho foi superior. O maior número de alelos observado por estes autores
para Idh e Mdh-1, provavelmente deve-se ao fato da análise ter se realizado
em várias espécies do grupo. Os loci analisados mostram diversidade de
alelos maior que muitos loci de DNA microssatélites testados para D.
ornatiforns (Laborda et al., 2009).
O menor número de alelos para as populações de CAJU deve-se a
menor tamanho amostral desta população (dois) quando comparada a SER
(15). Uma nova coleta nesta área será realizada e os dados obtidos serão
aplicados em diferentes análises de genética de populações.
Figura 1 – Perfil isoenzimático para Drosophila ornatifrons. 1 e 2 - Cajuru/SP; 3 a 15 Sertãozinho/SP. A. EST: 1, 11 = 5/5; 2, 10 = 4/4; 3 = 5/6; 4 = 4/5; 5 = 9/9; 6 = 2/4; 7 = 3/4;
9, 12 = 6/6; 13, 14 = 3/3; 15 = 2/3. B. 1-GPDH: 1, 2, 7, 8, 9, 10, 13, 14 = 2/2; 3, 4, 5, 6 = 2/3;
11, 15 = 1/1. C. IDH: 1, 2, 3, 5 = 4/4; 4 = 1/3; 6 = 1/1; 7 = 2/4; 10, 13 a 15 = 3/3; 11 = 3/4. D.
MDH-2: 1 a 5 = 4/4; 6 a 8, 10, 13 = 3/3; 9 = 1/1; 11, 12 = 3/5; 14 = 2/3; 15 = 2/2. E. ME: 1, 2,
8, 9, 13 = 3/3; 3, 10 = 2/2; 4 = 4/4; 5, 6, 15 = 1/1; 7, 11, 12, 14 = 2/3. F. PGM: 1, 2, 5, 6, 9 =
4/4; 4 = 5/5; 7 = 1/1; 8 = 1/2; 10 = 3/3; 11, 15 = 2/2; 12 = 2/3.
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Conclusões
A diversidade de alelos e o polimorfismo dos loci analisados demonstram
que estes são marcadores moleculares de importante aplicação em estudos
de variabilidade genética e estrutura intra e interpopulacional da espécie
Drosophila ornatifrons.
Referências
Garcia, A.C.L.; Gottschalk, M.S.; Montes, M.A.; Valiati, V.H.; Rohde, C.;
Valente, V.L.S. Spatial and temporal variation in Drosophilidae (Diptera)
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Laborda, P.R.; Klaczko, L.B.; Souza, A.P. Drosophila mediopunctata
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other Drosophila species. Conservation Genet. Resour. 2009, 1, 281.
Mateus, R.P.; Sene, F.M. Temporal and spatial allozyme variation in the
South American cactophilic Drosophila antonietae (Diptera, Drosophilidae).
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Mateus, R.P.; Buschini, M.L.T.; SENE, F.M. The Drosophila community in
xerophytic vegetations of the upper Parana-Paraguay river basin. Brazilian
Journal of Biology. 2006, 66, 24.
Mateus, R.P.; Machado, L.P.B.; Cavasini, R.; Gustani, E.C. Isoenzymatic
analysis of South American species of the Drosophila tripunctata group
(Diptera, Drosophilidae). D. I. S. 2008, 91, 53.
Mateus, R.P.; Machado, L.P.B.; Moraes, E.M.; Sene, F.M. Allozymatic
divergence between border populations of two cryptic species of the
Drosophila buzzatii cluster species (Diptera: Drosophilidae). Biochem. Syst.
Ecol. 2010, 38, 410.
Vilela, C.R.; Pereira, M.A.Q.R. A case of misidentification of a Neotropical
species of Drosophila (Diptera, Drosophilidae) belonging to the guarani
group. Revista Brasileira de Entomologia. 1993, 37, 819.
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