Diagnóstico molecular de doenças infecciosas

Diagnóstico molecular de doenças infecciosas O diagnóstico laboratorial de doenças infecciosas (causadas por vírus, bactéria, fungo
ou protozoário) baseia-se geralmente no isolamento do organismo patogénico causador
da doença e identificação por observação da morfologia (em microscopia óptica para os
protozoários) ou testes bioquímicos de detecção da actividade de enzimas específicas
de uma determinada espécie ou de crescimento em meios de cultura selectivos (para o
caso de bactérias e fungos). O problema associado a estas metodologias, em muitos
casos consideradas de referência, é a morosidade da análise que pode comprometer o
início duma terapia específica contra o agente patogénico. Uma alternativa mais rápida
é o recurso à detecção de anticorpos específicos desenvolvidos pelo paciente contra o
agente infeccioso. Neste caso uma técnica bem implantada na rotina laboratorial de
diagnóstico é o ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Apesar de mais rápidas,
as técnicas baseadas na detecção de anticorpos apresentam problemas no diagnóstico
em indivíduos imunocomprometidos e dão apenas uma indicação indirecta da presença
do agente infeccioso com possíveis interferências por reacções cruzadas ou por
vacinação. As técnicas baseadas nos ácidos nucleicos que permitem identificar
sequências específicas de nucleótidos de um gene abrem grandes perspectivas na
identificação laboratorial rápida de agentes patogénicos com elevada sensibilidade e
especificidade. Assim, uma área emergente da patologia clínica é a do diagnóstico
laboratorial em que a técnica da reacção em cadeia da polimerase (PCR) tem papel
central. No entanto, a implementação destas tecnologias tem enfrentado o problema
dos elevados custos da análise e da especificidade e precisão nos resultados das
sondas usadas. O desenvolvimento de novas técnicas, muitas vezes baseadas no PCR,
pode levar ao estabelecimento de testes rápidos, robustos e, também, de extrema
simplicidade, permitindo a sua realização no próprio consultório médico.
O projecto aqui apresentado envolve a pesquisa de técnicas em desenvolvimento com
possibilidade de aplicação no diagnóstico molecular de doenças infecciosas. A pesquisa
incidirá na Leishmaniose, uma doença zoonótica causada por protozoários do Género
Leishmania, e em técnicas como PCR em tempo real e PCR-ELISA. O trabalho terá a
forma de monografia e deverá apresentar as diversas técnicas de diagnóstico molecular
aplicadas à Leishmaniose e uma discussão da sua aplicabilidade na rotina laboratorial
em patologia clínica.
Orientador
Rui Oliveira
Departamento de Biologia
Universidade do Minho
[email protected]
253601512