Parceria ControlLab Habilitada ANVISA/REBLAS Provedor Alternativo CAP Certificada ISO 9001 Perfil de Resultados – Proficiência Clínica Área: Biologia Molecular Rodada: Set/2007 Tema DOENÇAS INFECCIOSAS Elaborador Nelson Gaburo Junior, Doutor em Biologia Molecular, Diagnósticos da América S/A. Luciano César Scarpelli, Biólogo Molecular, Diagnósticos da América S/A. Nas últimas décadas as doenças infecciosas têm sido alvo de intenso estudo e de desenvolvimento de várias técnicas laboratoriais com o objetivo de tornar o diagnóstico mais preciso, sensível e rápido. As técnicas sorológicas (um exemplo é o ELISA), com detecção e quantificação de antígenos e anticorpos, são um suporte e complemento do diagnóstico e são bastante padronizadas nos laboratórios de análises clinicas. Recentemente as técnicas de Biologia Molecular estão sendo cada vez mais empregadas no auxílio do diagnóstico de algumas doenças infecciosas ou genéticas. Essas técnicas têm por características serem bastante específicas e sensíveis, uma vez que detectam o material genético do patógeno presente no indivíduo. Técnicas que empregam uso de hibridização de sondas de ácidos nucléicos (southern-blots e northern-blots) e o uso de endonucleases de restrição foram as primeiras a serem utilizadas, seguidas da Polymerase Chain Reaction ou Reação em cadeia da polimerase, técnica capaz de detectar e amplificar uma seqüência genética alvo do agente patológico. Existem muitas outras técnicas desenvolvidas que podem utilizar a amplificação do material genético ou até mesmo a amplificação de um sinal após hibridização. Algumas doenças infecciosas tem sido alvo de inúmeros estudos para desenvolvimento de técnicas que ajudem a detecção e o acompanhamento da doença ao longo do tratamento proposto pelo Médico. Podemos citar como exemplo as Hepatites virais, a AIDS, a infecção por citomegalovírus e outras doenças que podem ter seus efeitos diminuídos pelo rápido e confiável diagnóstico. Referências Bibliográficas 1. Arnaldo Zaha (Coord.) – Biologia Molecular – 1996. 2. A.Walter Ferreira, Sandra L.M. Ávila – Diagnóstico Laboratorial das principais Doenças Infecciosas e auto-imunes - 2ª edição. 3. James B. Peter – Infectious Disease – 5ª edição, 1998. 4. Matilda, L. H., et al, Prevention of Mother-to-child transmission of HIV in São Paulo State, Brazil: an update. AIDS 19 Suppl 4: S37-S41, October 2005. Respostas dos Participantes Opções (%) Opção 1 Opção 2 Opção 3 Opção 4 Questão 1 3.3% 47.4% 9.4% 39.9% 2 Questão 2 7.5% 6.6% 3.8% 81.7% 4 Questão 3 4.7% 6.6% 54.9% 32.4% 4 Questão 4 8.9% 5.2% 58.2% 24.9% 3 Questão 5 56.8% 19.7% 15.5% 4.2% 1 Questão 6 0.9% 92.5% 5.6% 0.9% 2 Questão 7 16.4% 1.9% 56.8% 23.5% 3 Questão 8 5.6% 48.4% 14.6% 29.1% 4 Questão 9 9.4% 52.1% 9.4% 28.6% 2 Questão 10 5.6% 7.0% 12.7% 73.7% 4 Questão 11 2.8% 51.6% 8.5% 35.2% 2 Questão 12 2.3% 88.3% 1.4% 6.6% 2 Questão 13 23.0% 15.5% 46.9% 13.1% 3 Questão 14 4.2% 54.9% 17.4% 21.6% 2 Questão 15 14.6% 43.2% 20.7% 14.6% 2 Questionários Respondidos Resultado(s) aceito(s) 213 Página 1/2 Parceria ControlLab Habilitada ANVISA/REBLAS Provedor Alternativo CAP Certificada ISO 9001 Perfil de Resultados – Proficiência Clínica Área: Biologia Molecular Rodada: Set/2007 Análise das respostas e comentários dos participantes Questão 1: Os testes de biologia molecular são principalmente utilizados na confirmação das doenças virais e no acompanhamento da mesma após período de tratamento. Muitas vezes o diagnóstico não é feito no início da infecção ou o mesmo é feito por métodos sorológicos ou outros e confirmados pelos testes de biologia molecular. Questão 4: Os exame de Elisa quarta geração e imunoblots são exames que não fazem detecção direta do agente patológico e seguindo as referências bibliográficas citadas não foram considerados como exames de Biologia Molecular. Questão 5: A resposta adequada é a 1. A grafia do significado do exame NASBA está incorreta, o que não invalida a resposta. O correto é Nucleic Acid Sequence Based Amplification Questão 7: Pacientes que não apresentam diminuição do nível viral de Hepatite C podem não responder ao tratamento. O exame confirma o anterior, portanto provavelmente está correto. Resposta adequada é a 3. Questão 8: O exame de carga viral não tem por objetivo informar tipos virais presentes na amostra e sim somente a quantidade de vírus presente no indivíduo. Além disso, é feita a extração de RNA viral, conversão em cDNA, amplificação e detecção da quantidade de vírus presente. Questão 9: A janela imunológica é caracterizada pela não detecção de anticorpos contra o vírus HIV. Indivíduos infectados podem ter seu valor de carga viral detectado na fase assintomática da doença. Portanto resposta adequada é a 2. Questão 10: De acordo com as referências bibliográficas citadas todas as alternativas estão corretas, portanto a resposta adequada é a 4. Questão 11: A alternativa 1 não pode ser considerada adequada, pois não podemos falar em eliminação do vírus HIV do organismo. Hoje conseguimos abaixar a carga viral para níveis não detectáveis, porém não podemos dizer que um indivíduo está livre do vírus HIV. Resposta adequada é a 2. Questão 13: Devido à sua alta capacidade de detectar limite baixo de cópias virais, o PCR qualitativo para HIV é o mais indicado para o caso. Questão 15: De acordo com a figura as letras A, B e C correspondem a alternativa 2 Página 2/2