Caracterização e perfil de encapsulação da isotretinoína em

ALVES, C.P.I.; LIMA, E.M; Caracterização e Perfil de Encapsulação da Isotretinoína em Lipossomas Unilamelares Pequenos
In: CONGRESSO DE PESQUISA, ENSINO E EXTENSÃO DA UFG - CONPEEX, 2., 2005, Goiânia. Anais eletrônicos do XIII
Seminário de Iniciação Cientifica , Goiânia: UFG, 2005. n.p.
CARACTERIZAÇÃO E PERFIL DE ENCAPSULAÇÃO DA ISOTRETINOÍNA EM
LIPOSSOMAS UNILAMELARES PEQUENOS
Alves, Carina Pimentel Itapema1; Lima, Eliana Martins2.
Palavras-Chaves: Lipossomas, Isotretinoína.
1.INTRODUÇÃO
Entre outras aplicações, o efeito da Isotretinoína na diferenciação celular faz deste
fármaco uma importante alternativa para o tratamento da leucemia mielóide aguda.
Entretanto, o uso terapêutico dos retinóides encontra algumas limitações devido aos
relatos de problemas relacionados à sua estabilidade e a seus efeitos adversos
[Cortesi et al, 1994]. A encapsulação de retinóides em lipossomas surge como
alternativa viável para o desenvolvimento de uma nova forma farmacêutica da
isotretinoína, promovendo uma redução na toxicidade, aumentando a solubilidade do
fármaco em meio aquoso, e fornecendo considerável estabilidade à preparação, o
que resulta em uma forma farmacêutica em potencial para a terapia do câncer
[Manconi et al, 2002].
2.METODOLOGIA
2.1-Preparação dos lipossomas
Lipossomas foram preparados pelos métodos de hidratação do filme lipídico (HFL) e
injeção de clorofórmio (IC), seguidos pela sonicação em processador ultrassônico
Misonix XL2020.
2.2-Medida do raio hidrodinâmico dos lipossomas
A determinação do tamanho das vesículas foi realizada empregando a técnica de
espalhamento de luz em equipamento ZetaSizer Nano, uma técnica não invasiva,
que permite a análise da distribuição e medida do tamanho das vesículas.
2.2-Separação das frações contendo o fármaco encapsulado
Lipossomas contendo o fármaco encapsulado foram separados da fração livre por
cromatografia de exclusão por tamanho, utilizando-se uma coluna de vidro de 25 cm
x 1 cm de diâmetro interno, empacotada com Sephadex G-50 Fine.
2.3- Determinação da Eficiência de Encapsulação da Isotretinoína em Lipossomas
A quantidade de isotretinoína encapsulada foi calculada com base na curva de
calibração através do rompimento das frações de fármaco encapsulado. O
rompimento dos lipossomas foi realizado com etanol, sendo adicionado 2mL de
etanol para cada 1mL da preparação dos lipossomas, com posterior
homogeneização. A solução obtida foi levada ao espectrofotômetro e a absorbância
lida em seu comprimento de onda máximo.
2.7-Estudo da interação da isotretinoína com o fosfolipídeo estrutural dos
lipossomas.
O estudo da possível interação da isotretinoína com o fosfolipídeo dos lipossomas
foi realizado através da técnica de ressonância eletrônica paramagnética (EPR), que
permite monitorar a dinâmica molecular dos lipídeos.
3. RESULTADO
3.1-Determinação da eficiência de encapsulação da isotretinoína em lipossomas.
Observou-se a encapsulação de 0,06mg de iso por mL da fração encapsulada nas
análises onde foram adicionadas 8, 10 e 16mg de isotretinoína, estabelecendo-se o
limite de encapsulação (Figura 1). Observou-se também que as metodologias
utilizadas não apresentam diferença quanto à eficiência de encapsulação da
isotretinoína.
0,075
0,075
0,065
0,055
0,045
0
5
10
15
20
Isotret. em
Lipossomas
(mg/mL)
Isotret. em
Lipossomas
(mg/mL)
3.2-Estudo da interação da isotretinoína com o fosfolipídeo estrutural dos
lipossomas.
Não foi observada nenhuma alteração significativa no comportamento da bicamada
lipídica, uma vez que não houve alteração no espectro da preparação contendo
somente fosfatidilcolina em relação à amostra contendo fármaco, apesar da
encapsulação da isotretinoína na bicamada lipídica. (Figura...).
0,065
0,055
0,045
mg de Iso tretino í na na preparação
HFL
IC
Métodos de Preparação
Figura 1: Eficiência de encapsulação da Isotretinoína em lipossomas
(a)
(b)
Figura 2: Espectros de Lipossomas contendo fosfatidilcolina (vermelho) x
Lipossomas contendo fosfatidilcolina e isotretinoína encapsulada (preto): (a)
marcador 16d; (b) marcados 5d.
4.CONCLUSÃO
A isotretinoína pode ser encapsulada de maneira satisfatória em lipossomas de
fosfatidilcolina, localizando-se na bicamada lipídica, devido às características
lipofílicas deste fármaco.
5.REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1.CORTESI, R.; ESPOSITO, E.; GAMBARI, R.; MENEGATTI, E.; NASTRUZZI, C. E.
J. Pharmaceuticals Sciences. v. 2, p. 281-291, 1994.
2.MANCONI, M.; SINICO, C.; VALENTI, D.; LOY, G.; FADDA, A.M. Int. J.
Pharmaceutics. v.234, p.237-248, 2002.
FONTE DE FINANCIAMENTO – FINEP, FUNAPE
1
Aluna de Pós-graduação. Faculdade de Farmácia- FARMATEC- Laboratório de
Tecnologia Farmacêutica, [email protected]
2
Orientador / Faculdade de Farmácia / UFG, emlima@farmácia.ufg.br