Distribuição de repetições CAG nos genes PPP2R2B, TBP e ATN1

56º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010
Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
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Distribuição de repetições CAG nos genes PPP2R2B,
TBP e ATN1 em indivíduos normais
Furtado, GV1,2; Gheno, TC1,2; Emmel, VE1,2; Jardim, LB1,2,3,4; Saraiva-Pereira, ML1,2,4,5
Laboratório de Identificação Genética – Centro de Pesquisa Experimental – Hospital de Clínicas de Porto Alegre
Departamento de Genética – Universidade Federal do Rio Grande do Sul
3
Departamento de Medicina Interna – Universidade Federal do Rio Grande do Sul
4
Serviço de Genética Médica – Hospital de Clínicas de Porto Alegre
5
Departamento de Bioquímica – Universidade Federal do Rio Grande do Sul
[email protected]
1
2
Palavras-chave: ataxias espinocerebelares, análise molecular, SCA12, SCA17, DRPLA.
Introdução: As ataxias espinocerebelares tipo 12 (SCA12) e tipo 17 (SCA17) e a atrofia dentato-rubro-palido-luisiana
(DRPLA) estão entre as várias doenças neurodegenerativas, de herança autossômica dominante, que apresentam
como causa primária uma mutação dinâmica, que se caracteriza pelo aumento do número de repetições
nucleotídicas em determinados genes. A SCA12, a SCA17 e a DRPLA são causadas por um aumento do número de
repetições trinucleotídicas nos genes PPP2R2B, TBP e ATN1, respectivamente. O número de repetições é polimórfico,
sendo variável na população. As repetições se diferenciam em “normais” (4 a 32 no gene PPP2R2B, 25 a 42 no gene
TBP e 6 a 35 no gene ATN1) e “expandidas patologicamente” (≥51 no gene PPP2R2B, sendo responsável por casos de
SCA12; ≥49 no gene TBP, sendo responsável por casos de SCA17; ≥48 no gene ATN1, sendo responsável por casos de
DRPLA). Objetivo: O objetivo desse trabalho foi determinar a distribuição do número de repetições CAG nos genes
PPP2R2B, TPB e ATN1 em indivíduos provenientes do sul do Brasil. Métodos: Amostras de DNA de 247 indivíduos
foram isoladas a partir de sangue periférico. A região de interesse de cada gene foi amplificada pela reação em cadeia
da polimerase (PCR) com primers específicos, sendo que um deles foi marcado com compostos fluorescentes. O
produto de amplificação foi analisado por eletroforese capilar no equipamento ABI3130xl (Applied Biosystems) e
os resultados foram analisados tendo como padrão o GeneScan-500-LIZ pelo programa GeneMapper v4.0 (Applied
Biosystems) para identificação do fragmento amplificado. Resultados: No gene PPP2R2B, 15 diferentes alelos foram
encontrados e o alelo mais frequentemente encontrado foi o alelo com 10 repetições CAG (48,77%). A avaliação da
região polimórfica do gene TBP permitiu a determinação de 12 alelos diferentes, sendo os mais frequentemente
encontrados os alelos com 36 (29,59%) e 35 (28,36%) repetições CAA/CAG. No caso do gene ATN1, 16 alelos diferentes
foram encontrados e o mais frequente é o alelo com 14 repetições CAG (34,28%). Avaliando pacientes com suspeita
clínica de ataxia, 2 pacientes com alelos “expandidos patologicamente” (55 e 57 repetições CAG) foram encontrados
no gene PPP2R2B, confirmando o diagnóstico de SCA12. Os resultados obtidos nesse trabalho comparado com
os dados da literatura demonstram que o alelo mais frequente (10 repetições) no gene PPP2R2B também foi o
mais comum encontrado em outros estudos. Por outro lado, nesses mesmos estudos o alelo mais comum para os
genes TBP e ATN1 foram 38 e 15 respectivamente. A diferença encontrada entre nosso estudo e os estudos citados
pode ser explicada pelos diferentes de métodos utilizadas para as análises laboratoriais. Conclusão: Este estudo
proporcionou uma análise detalhada da distribuição de repetições CAG nos genes associados com determinadas
doenças neurodegenerataivas (SCA12, SCA17 e DRPLA) e permitiu a diagnóstico de 2 casos de pacientes com SCA12.
Apoio: CNPq, FIPE-HCPA e FAPERGS.