Ministério da Educação UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ Setor de Ciências Biológicas Depto de Bioquímica e Biologia Molecular Bioquímica da Célula – BQ013 – Curso de Farmácia Aula 21 – Tradução Este roteiro visa orientar o estudo sobre o tema exposto em sala de aula, destacando alguns itens e termos chaves importantes sobre o assunto. O código genético pelo qual as sequência de ácidos nucléicos são traduzidas para aminoácidos é composto de códons de três nucleotídeos que não se sobrepõem e são lidos sequencialmente pelos ribossomos. Todos os RNAt possuem diversas bases quimicamente modificadas e uma estrutura contendo uma haste aceptora para o aminoácido e um braço do anticódon. As estruturas tridimensionais dos RNAt são bastante similares e são mantidas por meio de interações de empilhamento e ligações cruzadas de pontes de hidrogênio diferentes das de Watson-Crick. As aminoacil-tRNA sintetases catalisam a ligação de um aminoácido ao tRNA apropriado numa reação dependente de ATP. A haste aceptora e a alça do anticódon são elementos de identidade comum para as interações do tRNA com a aminoacil-tRNA sintetase. A fidelidade da aminoacilação é aumentada pela correção de leitura. Os ribossomos são grandes complexos de diversas moléculas de RNAr e muitas proteínas. Eles catalisam a formação da ligação peptídica entre um aminoacil-tRNA recém chegado e um tRNA em que o polipeptideo em formação esta ligado (o peptidil-tRNA). As proteínas ribossômicas e o RNA reúnem-se para formar duas subunidades: a subunidade menor (30S em E. coli e 40S em eucariotos) e a subunidade maior (50S em E. coli e 60S em eucariotos), as quais se associam para formar o ribossomo (70S em E. coli e 80S em eucariotos). Os polipeptídios são sintetizados a partir do N-terminal para o C-terminal. Diversos ribossomos ligados a um único RNAm constituem-se em um polissomo. Em procariotos a transcrição e a tradução ocorrem simultaneamente. A tradução esta dividida nas fases de iniciação, de alongamento e de terminação. Cada uma requer fatores de tradução específicos, cuja ação é impelida pela hidrolise de GTP. A iniciação da tradução requer um RNAt iniciador carregado com Metionina formilada (em procariotos) ou Metionina (em eucariotos). As subunidades ribossômicas reúnem-se com o RNAt iniciador, com um fator de iniciação complexado com GTP e com o RNAm. Nos procariotos, o sitio de iniciação do mRNA é selecionado por meio da ligação de uma sequência Shine-Dalgarno nas sequências complementares no RNAr 16S. Durante o alongamento da cadeia polipeptídica, um aminoacil-tRNA complexado com um fator de alongamento entra no sítio A do ribossomo. O grupo amino ataca o grupo peptidil na ligação éster do RNAt no sítio P do ribossomo, na reação de transpeptidização catalisada pelo RNAr. O novo peptidil-tRNA é translocado do sítio P para o sítio E previamente esvaziado. (Veja vídeo no: http://www.youtube.com/watch?v=1PSwhTGFMxs). 1 Ministério da Educação UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ Setor de Ciências Biológicas Depto de Bioquímica e Biologia Molecular A terminação da tradução requer fatores de liberação que reconheçam os códons de terminação. A proteína sintetizada pode sofrer modificações póstraducionais. Pontos importantes: Enumerar os compostos envolvidos nas etapas de síntese de proteínas; Identificar o papel dos RNAs na síntese de proteínas; Descrever a estrutura do RNAt identificado as regiões contendo anticódon e sitio de ligação do aminoácido; Descrever o mecanismo de ativação dos aminoácidos; Analisar a estrutura do ribossomo; Identificar o papel do GTP na síntese de proteínas; Comparar o sentido da síntese do DNA, RNAm e da cadeia polipeptídica; Correlacionar a sequência de DNA com a cadeia polipeptídica formada; Identificar os tipos de modificação pós-tradução; Referências: Voet, D.; Voet J. Bioquímica. 1ª ed., Porto Alegre. Artmed, 2002. Nelson, D.L.; Cox, M.M. Lehninger. Princípios de Bioquímica. 4a ed., São Paulo. Sarvier, 2005 2