UFV / XVI SIC / FEVEREIRO-2007 / Bioquímica e Biologia Molecular

UFV / XVI SIC / FEVEREIRO-2007 / Bioquímica e Biologia Molecular / 554
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ESTUDO DA MICROBIOTA DO INTESTINO ASSOCIADO COM Anticarsia
gemmatalis (HÜBNER) (INSECTA: LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE)
SILVA,Fernanda Cristina (Estudante); MENDONÇA,Eduardo Gomes (Estudante);
CARDOSO,Deise Silva Castro Pimentel (Estudante); RIBEIRO,Fabricio Rainha (BolsistaIC); FAZOLLO,Anderson (Estudante); PILON,Franciny Martins (Bolsista-IC);
MORAES,Marcos Felipe B. K. (Estudante); REIS,Denise Torres C. (Estudante);
PILON,Anderson Martins (Estudante); OLIVEIRA,Maria Goreti de Almeida Oliveira
(Orientador)
A maioria das espécies de insetos é habitada por diversas comunidades de
microorganismos que contribuem com seu hospedeiro através da produção de vitaminas,
de enzimas digestivas e aminoácidos. Pouco é conhecido sobre a microbiota intestinal de
Lepidopteras, uma das cinco ordens de inseto que incluem os mais importantes insetospraga da agricultura. Como primeiro passo para estudar os microorganismos intestinais de
Anticarsia gemmatalis nós isolamos bactérias de intestino de lagartas do quinto-instar
criadas com folhas de soja. Para este propósito, lagartas foram esterilizadas externamente
em 100% etanol e dissecadas assépticamente. Os intestinos de três lagartas foram
homogeneizados em solução salina 0.85%, centrifugados a 1000 rpm, por 2 min e a
suspensão foi coletada para análise. Foram feitas diluições seriadas em Luria-Bertani (LB)
para enumeração de bactérias heterotróficas . Também foram feitas diluições em agar
complementado com 0.1% (p/v) carboximetilcelulose, 1% (p/v) xilana, 2.5% (p/v) pectina
e 0.2% (p/v) amido para estimar o número de bactérias celulolíticas, xilanolíticas,
pectinolíticas e amilolíticas. As bactérias proteolíticas foram enumeradas através do
plaqueamento das diluições por “speed plate” em ágar caseínato (SMCA). As placas foram
inoculadas em triplicata e incubadas a 37°C durante 5 dias. O número de bactérias
heterotróficas totais em LB foram 7.0 x 107 cfu/mL. Também foram obtidas contagem
elevadas para agar contendo amido (7.8 x 107 cfu/mL), carboximetilcelulose (3.3 x 105
cfu/mL) e em SMCA (6.7 x 107 cfu/mL), enquanto nos meios com pectina e xilana a
contagem foi relativamente baixa. As colônias que cresceram em placas de SMCA foram
transferidas para LB para posterior caracterização de suas proteases. Esta é a primeira
demonstração da presença de bactérias no intestino da lagarta da soja. Estudos para avaliar
suas contribuições nutricionais para o hospedeiro estão sendo conduzidos. (CNPq)