TITLE: Destoxificação de peróxidos em bactérias

MSc in Biochemistry
Proposal for Research Project – 2nd Cycle
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No.
Supervisor Name: Sofia R. Pauleta
Supervisor email address: [email protected], http://docentes.fct.unl.pt/srp/
Lab/Institution: Lab 617/613 UCIBIO, Dep. Química, FCT-UNL
TITLE: Destoxificação de peróxidos em bactérias patogénicas
Background
A bactéria Neisseria gonorrhoeae é responsável pela doença sexualmente transmissível,
gonorreia, a qual regista um aparecimento de 62 milhões novos casos por ano, a nível
mundial. Estirpes patogénicas de Escherichia coli são responsáveis por doenças, tais como
gastroenterites e infecções do tracto urinário, que também apresentam anualmente um
elevado número de casos. Recentemente, tem-se registado um aumento da resistência
destas bactérias aos antibióticos. Este facto, despertou o interesse pelos mecanismos
moleculares que estão envolvidos na infecção e que levam ao aumento da virulência destas
bactérias.
Espécies reactivas de oxigénio, como o peróxido de hidrogénio ou o anião superóxido, são
produzidas pelo sistema imunitário como resposta à infecção por bactérias. A capacidade
para combater estes compostos é a chave para a sobrevivência de bactérias no interior do
hospedeiro. Assim, as bactérias desenvolveram um conjunto de sistemas enzimáticos para a
sua destoxificação, nomeadamento dismutases do superóxido, catalases e peroxidases.
Objectives and Project Description
Recentemente, foi demonstrado que a peroxidase bacteriana do citocromo c (CCP) tem, em
bactérias patogénicas, um papel fundamental na virulência, protegendo estas bactérias dos
efeitos nocivos das espécies reactivas de oxigénio produzidas pelo hospedeiro ou por outras
bactérias nativas do local de infecção (Lactobacillus). De facto, estirpes de Neisseria em que
foi eliminado o gene ccp, demostraram uma maior sensibilidade ao peróxido de hidrogénio
(produzido pelo sistema imunitário e por lactobacillus) e uma menor virulência. A enzima
codificada pelo gene ccp da bactéria N.gonorrhoeae, é diferente das CCPs bacterianas
estudas até agora, por estar ancorada à parede externa e apresenta uma baixa homologia
com outras CCPs já estudadas.
Este trabalho terá como objectivo a determinação da estrutura da peroxidase de Neisseria. E
irá incluir as seguintes tarefas:
1. Isolamento da CCP. Caracterização enzimática.
2. Cristalização da CCP.
3. Determinação da estrutura da CCP.
Em parelelo serão realizados estudos com a CCP de E.coli (como backup para o caso da
cristalização da CCP de Neisseria não tenha sucesso).
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MSc in Biochemistry
Proposal for Research Project – 2nd Cycle
TIMELINE (use fill tool for the cells)
Month 1
Month 2
Month 3
Month 4
Month 5
Month 6
Month 7
Month 8
Month 9
Month 10
Task 1
Task 2
Task 3
Thesis
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