Proposta de Mestrado em Bioquímica Título

Proposta de Mestrado em Bioquímica
Título: Destoxificação de peróxidos em bactérias patogénicas
Resumo
Este estudo está incluido num projecto recentemente financiado pela Fundação para a
Ciência e Tecnologia, PTDC/BIA-PRO/109796/2009. O aluno poderá ter uma bolsa de
investigação para realizar a tese de mestrado.
A bactéria Neisseria gonorrhoeae é responsável pela doença sexualmente
transmissível, gonorreia, a qual regista um aparecimento de 62 milhões novos casos
por ano, a nível mundial. Estirpes patogénicas de Escherichia coli são responsáveis
por doenças, tais como gastroenterites e infecções do tracto urinário, que também
apresentam anualmente um elevado número de casos. Recentemente, tem-se
registado um aumento da resistência destas bactérias aos antibióticos. Este facto,
despertou o interesse pelos mecanismos moleculares que estão envolvidos na
infecção e que levam ao aumento da virulência destas bactérias.
Espécies reactivas de oxigénio, como o peróxido de hidrogénio ou o anião superóxido,
são produzidas pelo sistema imunitário como resposta à infecção por bactérias. A
capacidade para combater estes compostos é a chave para a sobrevivência de
bactérias no interior do hospedeiro. Assim, as bactérias desenvolveram um conjunto
de sistemas enzimáticos para a sua destoxificação, nomeadamento dismutases do
superóxido, catalases e peroxidases.
Recentemente, foi demonstrado que a peroxidase bacteriana do citocromo c (CCP)
tem, em bactérias patogénicas, um papel fundamental na virulência, protegendo-as
dos efeitos nocivos das espécies reactivas de oxigénio. De facto, estirpes de Neisseria
em que foi eliminado o gene ccp, demostraram uma maior sensibilidade ao peróxido
de hidrogénio (produzido pelo sistema imunitário) e uma menor virulência. A enzima
codificada pelo gene ccp da bactéria N.gonorrhoeae, é diferente das CCPs
bacterianas estudas até agora, por estar ancorada à membrana citoplasmática e
apresenta uma baixa homologia com outras CCPs já estudadas.
No caso da CCP de Neisseria, uma proteína de cobre, azurina, irá ser caracterizada
pela primeira vez por ser importante para a função da CCP nesta bactéria, e a função
e interacção com a CCP de Neisseria irá ser explorada.
Metodologias
Expressão heteróloga e homóloga de proteínas e sua purificação (diversas
cromatografias), espectroscopia de visível, determinação de estrutura por NMR, RTPCR, actividades enzimáticas.
Local de realização experimental
Lab: 617 e Lab. de RMN – Dep. Química, FCT-UNL
Contactos
Orientadora: Sofia R. Pauleta. Contacto: [email protected], Gab. 634, ext 10967
Página web: https://sites.google.com/site/spauletagroup/home