EFEITO DO EXERCÍCIO FÍSICO NA MORFOLOGIA DO TECIDO ADIPOSO BRANCO E MARROM DE RATOS OBESOS ALIMENTADOS COM DIETA DE CAFETERIA Maiara Mikuska Cordeiro (PROVIC/UEPG), Dionizia Xavier Scomparin (Orientadora), e-mail: [email protected]. Universidade Estadual de Ponta Grossa/Departamento Biologia Geral Fisiolopatologia, obesidade, exercício. Palavras-chave: Diabetes mellitus tipo II, exercicio, obesidade, incretinas, analogos GLP-1. Resumo: O excesso de tecido adiposo corporal está diretamente relacionado a resistência à insulina. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do tratamento com o análogo do GLP1 em ratos obesos obtidos pelo pela ingestão de uma dieta hipercalórica chamada dieta de cafeteria. Animais machos foram obtidos do biotério da Universidade aos 21 dias de vida e foram divididos em 4 grupos associados ao exercício físico: Grupo Dieta de cafeteria (DIETA EXE), Grupo com ração comercial (CONT. EXE), Grupo animais dieta que receberam injeções subcutâneas aos 80 dias de vida de GLP1: DIETA EXE GLP-1 e CONT. EXE GLP-1, sendo que nestes dois últimos grupos os animais aos 90 dias foram sacrificados, qual foi coletado o sangue, estoques de tecido adiposo para avaliar a obesidade, quais apresentaram alto taxa de hipertrofia de seus adipócitos, não verificando diminuição com o tratamento no grupo DIETA EXE GLP-1. A comparação entre grupos foi feita através do teste ANOVA, seguida pelo pós-teste de Bonferroni (p<0,05). Ao final dos 90 dias de ingestão de dieta hipercalórica, o peso final dos grupos CONT. EXE (340,8 ± 15,63) CONT. EXE GLP1(331±10,86), DIETA EXE(361,0 ±12,28), qual obteve-se um aumento (p<0,05) nos triglicerídeos do grupo DIETA EXE e diminuição no grupo tratado com exercício aliado ao fármaco. Concluímos desta forma que o tratamento com análogo de GLP-1 associado ao fármaco não obteve potencialização em relação a diminuição efetiva nos estoques de gordura em animais tratados com dieta, mas proporcionou diminuição em alguns dados bioquímicos. Introdução A obesidade está entre os males que afetam a saúde da humanidade durante o século XXI sendo considerada como a principal causa de mortes evitáveis (PAULI.; et al.; 2008). Isso se deve pelo fato do alto estoque de gordura presente no corpo do individuo, associado a falta de exercício tendo assim como resultado o sobrepeso qual é um fator promotor da obesidade e de outras doenças entre elas a com destaque a diabetes mellitus tipo II. (CESARETTI; 2006). Um fármaco sintético encontra-se em teste para regular a insulina destes pacientes que sofrem com a diabetes, este fármaco é produzido através de hormônios chamadas incretinas, hormônios intestinais liberados após a ingestão alimentar têm sido implicadas na fisiopatologia da hiperglicemia do diabetes tipo II, em especial o GLP-1 “glucagon likepeptide-1( LYRA et. Al., 2006). O hormônio GLP-1 é secretado nas células L no intestino, precisamente no íleo e duodeno. Os efeitos desse hormônio são; realizar saciedade, suprimir a produção de glucagon, estimular a secreção de insulina nas células pancreáticas β, ampliar a eliminação de glicose, desacelerar o esvaziamento gástrico, aumentar a sensibilidade a insulina (CHACRA, 2006). Sendo assim o presente trabalho testa a hipótese de como este fármaco age em animais que foram alimentados a base de uma dieta, chamada de dieta de cafeteria aliada ao exercício físico, qual deve esperasse que o exercício aliado ao fármaco tenha efeitos positivos sobre a redução nos estoques de gordura bem como em dados bioquímicos como glicemia, colesterol e triglicerídeos. Materiais e métodos Foram utilizados 36 ratos Wistar provenientes da Universidade Estadual de Ponta Grossa, com 21 dias de vida mantidos com água e ração balanceada (Nuvilab®) com livre acesso ao alimento (ad libittum), mantidos no ciclo de luz artificial de 12 horas claro 12 horas escuro alocados em gaiolas contendo 3 animais. Com isso foram separados 4 grupos para os experimentos, sendo estes: Grupo CONTROLE EXE; animais que receberam ração comercial e realizaram o exercício físico. Grupo DIETA EXERCITADO grupo qual foi submetido á uma dieta hipercalórica aliada ao exercício. Grupo CONTROLE EXERCITADO GLP-1; animais que receberam ração comercial aliada ao exercício, sendo que estes foram submetidos à aplicação de injeções subcutânea de análogos de GLP1 na concentração de 14 mcg. As aplicações iniciaram-se apenas aos dez dias que antecedem a eutanásia dos mesmos, qual ocorreu aos noventa dias. Grupo DIETA EXERCITADO GLP-1; animais que receberam dieta de cafeteria e realizaram o e exercitado de natação; além de aplicações subcutâneas de GLP-1, utilizando o mesmo método do grupo anterior. A dieta admistrada aos animais é chamada de hipercalórica e consiste no inicio dos 30 dias de vida até os 90 dias de vida do animal. Após esse período em que os animais são considerados obesos, neste momento há o sacrifício dos animais. Qual é durante o sacrifício ocorre a coleta dos órgãos para analise histológicas das gorduras: mesentérica, perigonadal, retroperitonial e interescapular, além de sangue para a dosagens de bioquímicos. Os resultados foram obtidos através de análises estastíticas de média ± erro padrão da média expressos entre dois grupos utilizado o teste ANOVA one-way e pós-teste de Bonferroni. Resultados e Discussão Parâmetros fisiológicos e metabólicos A obesidade foi avaliada pelo cálculo do Índice de Lee e pela retirada de depósitos de gordura da cavidade abdominal (mensentérica, epididimal e retroperitoneal). O peso do tecido marrom interescapular também foi avaliado. Todos os dados foram expressos em peso total da gordura por animal (gramas). Os dados foram mensurados e encontram-se sumarizados na tabela 1. Além disso amostras de sangue foram coletados para dosagens bioquímicas. As concentrações plásmaticas de triglicerídeos (mg/dL) e colesterol total (mg/dL) foram determinadas pelo método enzimático-Trinder. Os animais que foram alimentados com a dieta hipercalórica não tiveram aumento significativo da massa corporal DIETA EXE , DIETA EXE GLP-1. Mostrando-se controverso aos estudos já realizados como ZHANG (et al.; 2010) qual mostraram que animais alimentados com dieta hipercalorica/cafeteria apresentam um aumento de peso final maior. Este resultado pode ser explicado pelo fato que os animais realizaram exercício físico, desta forma o efeito do exercício físico promoveu esse balanço energético adequado da quantidade ingerida e quantidade gasta. Tabela 2. Parâmetros morfofisiológicos analisados, baseados em análises estatísticas em ±EPM. PESO CNA INDICE DE LEE CONT. EXE 340,8 ± 15,63 22,7 2,48 CONT. EXE GLP-1 331,0 ±10,86 22,56 2,49 DIETA EXE 361,0 ±12,28 22,8 2,47 DIETA EXE GLP-1 352,5 ±9,775 23,08 2,46 Com relação a glicemia e colesterol total não foram encontradas diferenças significativas de p<0,05 entre animais Controles e Dietas. Estudos que utilizam técnicas de biologia molecular mostram que o treinamento físico promove um aumento da atividade da tirosina-quinase dos receptores de insulina, aumento da translocação dos transportadores de glicose do músculo esquelético (GLUT-4), aumento da fosforilação dos substratos do receptor de insulina (IRS-1 e 2) e de sua associação à PI3-kinase (CORTRIGHT; DOHM, 1997; LUCIANO et al., 2002). Sendo assim, dependendo da severidade da doença, estas adaptações moleculares podem ou não ser refletidas em menores concentrações de glicose, sendo dados que se assemelham com os dados obtidos neste estudo. Já nós triglícérides, notou-se diferenças significativas, segundo o pós-teste de Bonferroni, onde os níveis de triglicerides sofreram maiores alterações. Onde os grupos CONT. EXE, CONT EXE GLP-1 são diferentes do grupo DIETA EXE, qual mantém níveis altos em relação ao grupo que recebeu o tratamento com GLP-1. Sabe-se que o treinamento físico promove um aumento da utilização dos lipídeos para o metabolismo energético e aumento da atividade das enzimas-chave de mobilização e oxidação dos lipídios, podendo reduzir as concentrações circulantes desses substratos, e em especial dos AGLs em animais diabéticos treinados (KRAUS et al., 2002).Como os estoques de gordura estão inteiramente associados ao progresso na resistência a insulina, agravando desta maneira o quadro de insulino-dependentes. Os resultados obtidos verificaram que os estoques de gordura mesentérica para o grupo Controle Exercitado mostrou-se diferentes para os demais grupos exceto para o grupo Controle Exercitado GLP-1 qual se deve pelo fato do análogo de GLP-1 ser admistrado nestes animais, produza um efeito de saciedade, visto que foi comprovado em 1996, por Turton e colaboradores em que observaram esse fato em ratos que foram submetidos ao jejum. (TURTON et al.; 1996) Conclusões Dessa forma concluímos que o exercício físico aliado ao tratamento com GLP 1 não obteve potencialização na diminuição dos estoques de gordura, todavia pode-se verificar que o grupo que recebeu tratamento com análogo de GLP-1 e realizou exercício físico houve diminuição de seus níveis de triglicerídeos em relação ao grupo que recebeu a dieta e realizou o exercício. Referências: __AL-AWWADI NA, BORNET A, AZAY J, ARAIZ C, DELBOSC S, CRISTOL JP, ET AL. Red wine polyphenols alone or in association with ethanol prevent hypertension, cardiac hypertrophy, and production of reactive oxygen species in the insulin- resistant fructose-fed rat. J Agric Food Chem 2004;52:5593-7. __CARPINELLI, A. R.; PICINATO, M C.; STEVANATO, E.; OLIVEIRA, H R.; CURI, R. Insulin secretion induced by palmitate: A process fully dependent on glucose concentration. Diabetes Metabolism Reviews, New York, v.28, p.337-44, 2002. __CHACRA, A. R. Efeito fisiológicas das incretinas. Johns Hopkins Advanced Studies in Medicine, São Paulo, Vol. 6, Jul. 2006. __CONVIGTON, D. S.; XUE, H.; PIZZINI, R. Streptozotocin and alloxan are comparable agents in the diabetic model of impaired would healing. Diabetes Res., v.23, p.47-53, 1993. __LYRA, R.; OLIVEIRA, M.; LINS, D.; CAVALCANTI, N. Prevenção do Diabetes Mellitus tipo 2. Arq Bras Endocrinol Metab, Recife, v. 50, n. 2, abr. 2006 __ TURTON, M.D.; O'SHEA, D.; GUNN I, BEAK S. A.; et al. A role for glucagon-like peptide-1 in the central regulation of feeding. Nature. v. 4; p. 69-72. 1996. __ZHANG, N.; HUAN, Y.; HUANG H. et al. Atorvastatin improves insulin sensitivity in mice with obesity induced by monosodium glutamate. Acta pharmacologia sinica, v. 31, n.1 p. 34-42, jan 2010.