correlaçâo in vitro in vivo de comprimidos de enrofloxacino

CORRELAÇÂO IN VITRO IN VIVO DE COMPRIMIDOS DE
ENROFLOXACINO
Karine Favero Nicorena (2), Gabriela R. Foresti (3), Willian R. R. Almeida (3),
Fabiana E. B. Silva (4)
(2)
Bolsista de Iniciação Científica da Universidade Federal do Pampa. Uruguaiana, RS.
Pesquisador; Universidade Federal do Pampa. Uruguaiana, RS.
(4)
Orientadora; Universidade Federal do Pampa. Uruguaiana, RS.
(3)
RESUMO
Neste trabalho foram avaliadas diferentes condições de dissolução para comprimidos de enrofloxacino e se
estabeleceu uma correlação com os dados da fração absorvida do fármaco (correlação in vitro in vivo –
®
CIVIV). Se utilizou o dissolutor Varian VK 7000 com o aparato pá, a 37°C, velocidade de 50-75 rpm,
volume de meio 400 e se testou meios contendo diferentes concentrações de cloreto de sódio, pepsina e
lecitina de soja. Os meios foram testados em diferentes condições, na qual as condições 2, 7 e 8
apresentaram um modelo linear de correlação nível A entre as frações absorvidas in vivo e as frações
dissolvidas in vitro. A condição 8 foi escolhida para validação do modelo pois a mesma engloba mais
parâmetros comuns as condições que apresentaram correlação a condição fisiológica do TGI de cães. O
método proposto se mostrou adequado para análise do perfil de dissolução de comprimidos de
enrofloxacino, sugerindo-se que a condição de dissolução escolhida simula o comportamento in vivo do
fármaco a partir de dados farmacocinéticos obtidos na literatura.
Palavras-Chave: Enrofloxacino, dissolução, correlação in vitro- in vivo
INTRODUÇÃO
O enrofloxacino é um antibiótico pertencente à classe fluoroquinolonas, sendo utilizado na prática
veterinária no tratamento de doenças respiratórias e infecções gastrointestinais em animais de pequeno e
grande porte (Martinez, McDermott & Walker, 2006). O teste de dissolução é um método utilizado na
indústria farmacêutica para avaliar, in vitro, os fatores que influenciam sobre a biodisponibilidade de um
fármaco em um produto farmacêutico, ou ainda para assegurar que o produto cumpra as especificações. A
avaliação do perfil de dissolução in vitro, pode ser correlacionada com a biodisponibilidade in vivo, quando a
substância apresenta baixa solubilidade, pois nessa condição a dissolução é o fator limitante para a
absorção do fármaco. Na literatura poucos dados sobre a dissolução in vitro de medicamentos de uso
veterinário estão disponíveis, o que restringe o estudo e estabelecimento desta correlação com perfis
farmacocinéticos de distribuição do fármaco in vivo. Portanto, o objetivo deste trabalho é estudar diferentes
condições de dissolução para comprimidos de enrofloxacino, bem como estabelecer uma correlação com
dados da fração absorvida (in vivo) do fármaco (correlação in vitro in vivo – CIVIV).
METODOLOGIA
®
Os perfis de dissolução de comprimidos de enrofloxacino 50 mg (Baytril ) foram avaliados em equipamento
®
dissolutor Varian VK 7000 utilizando o aparato pá, temperatura do meio a 37°C, velocidade de rotação 5075 rpm, volume de meio 400 ml e tempos de amostragem entre 10 – 60 min. Meios de dissolução contendo
diferentes concentrações de cloreto de sódio (NaCl), pepsina e lecitina de soja foram testados. As condições
testadas na avaliação da dissolução foram determinadas a partir daquelas que mais se aproximavam do
trato gastrintestinal (TGI) de cães, levando-se em conta o pH, volume do meio e velocidade de rotação do
aparato (o qual simula o movimento peristáltico) (Vertzoni et al, 2012). As amostras foram analisadas em
espectrofotômetro UV-Vis Perkin Elmer® (modelo Lambda 35) a 273 nm. O método de dissolução foi
validado para os seguintes itens: especificidade, linearidade, precisão, exatidão e robustez. Com a
finalidade de selecionar o meio que refletisse as características fisiológicas caninas de maneira mais
fidedigna possível, foi realizado um estudo de correlação entre os perfis de dissolução obtidos com os
meios formulados e os dados farmacocinéticos em cães disponibilizados pelo Food and Drug Administration
®
(FDA) para o Baytril Flavour 50mg (FDA, 1997). Atribuiu-se um modelo farmacocinético de um
compartimento aberto para os dados de perfil plasmático e os mesmos transformados em fração da dose
absorvida (FA) usando o método de Wagner-Nelson. Os valores de fração de fármaco dissolvido obtidos
nos ensaios de dissolução foram plotados com os dados de fração de fármaco absorvido com o intuito de
Anais do 8º Salão Internacional de Ensino, Pesquisa e Extensão – Universidade Federal do Pampa
estabelecer uma correlação linear de nível A para as condições de dissolução em estudo. Os dados foram
avaliados por regressão linear simples. Foi usado um fator de correção (time scaling) para ajuste da relação
tempo para dissolução in vitro vs. tempo para absorção in vivo. Nesta etapa, foram excluídos os perfis de
dissolução que não apresentaram dissolução completa (no mínimo 80% em 60 min). A partir do
estabelecimento da CIVIV, foi escolhida a condição in vitro mais adequada para validação do modelo
proposto.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
A Tabela 1 mostra a regressão linear obtida no estabelecimento da CIVIV para as diferentes condições de
dissolução testadas.
Tabela 1 – Análise de regressão para CIVIV usando fator de correção (time scaling).
Condição
Coeficiente angular
Intercepto
R²
C2
0,9587
2,7341
0,99
C3
1,1196
-17,627
0,9462
C6
1,1138
-15,902
0,9532
C7
0,9945
1,4261
0,9898
C8
0,9692
4,3509
0,9878
C9
1,1215
-17,639
0,9431
C10
1,1046
-17,193
0,9463
C11
1,1212
-17,604
0,9433
C12
0,9112
8,5615
0,978
As condições 2, 7 e 8 apresentaram um modelo linear de correlação nível A entre as frações absorvidas in
vivo e as frações dissolvidas in vitro (Tabela 1). Para estas condições foram obtidas regressões lineares
satisfatórias e coeficientes angulares próximos da unidade. A condição 8 foi escolhida para validação do
modelo pois a mesma engloba mais parâmetros comuns as condições que apresentaram correlação e
relativos a condição fisiológica do TGI de cães (CAVALCANTE, 2009). O resultado da correlação foi usado
para recalcular a fração absorvida predita e o erro de predição avaliou a exatidão do modelo proposto.
Segundo o FDA (1997), o erro deve estar abaixo de 10%, indicando que os dados de dissolução podem ser
utilizados como alternativa para estudos in vivo. Não foram observados erros superiores a 10%.
CONCLUSÕES
O método proposto se mostrou adequado para análise do perfil de dissolução de comprimidos de
enrofloxacino. Sugere-se que a condição de dissolução escolhida simula o comportamento in vivo do
fármaco a partir de dados farmacocinéticos obtidos na literatura, contribuindo para uma avaliação inicial
sobre a biodisponibilidade do fármaco nesta forma farmacêutica e para as condições fisiológicas descritas, a
partir da correlação com os dados in vitro proposta. Estudos posteriores devem ser conduzidos para avaliar
as condições fisiológicas no trato gastrintestinal de cães bem como os fatores que influenciam na absorção
do fármaco (como por ex. Jejum/estado alimentado).
REFERÊNCIAS
CAVALCANTE, L. F. H.; GOUVÊA, A. S.; MARQUES, J. M. V. Degeneração retiniana em gatos associada ao uso de enrofloxacina.
Acta Veterinaria Brasilica, v.3, p.62-68, 2009.
FDA. Guidance for Industry: Dissolution testing of immediate release solid oral dosage forms, extended release solid oral dosage forms:
development, evaluation and application of in vitro/in vivo correlations, 1997.
MARTINEZ, M.; MCDERMOTT, P.; WALKER, R. Pharmacology of the fluoroquinolones: A perspective for the use in domestic animals.
The Veterinary Journal, London, v. 172, p. 10–28, 2006.
Anais do 8º Salão Internacional de Ensino, Pesquisa e Extensão – Universidade Federal do Pampa