Monitorização ambiental - microbiologia CET em Qualidade Ambiental Teste 2 de avaliação de resultados de aprendizagem Ano letivo 2012/2013 NOME_____________________________________ Nº________________ CLASSIFICAÇÃO ____________ Parte 1. Perguntas de resposta curta [8.0 valores] 1. [1.0 valor] Defina qualidade da água. 2. [1.0 valor] Distinga poluição de contaminação. 3. [1.0 valor] 4. [1.0 valor] 5. [1.5 valor] 6. [1.0 valor] 7. [1.5 valor] Indique três dos critérios que se devem ter em consideração para escolher um indicador de qualidade microbiológica da água. De acordo com o Decreto-Lei nº306/2007, o que é a água destinada ao consumo humano doméstico? Indique as utilizações da água que devem obedecer a legislação sobre qualidade microbiológica e a identifique a respetiva legislação. Descreva de forma sucinta o método da inoculação por incorporação e da contagem de UFC, exemplificando com um indicador microbiológico de qualidade da água. Descreva de forma sucinta o método da inoculação de tubos múltiplos e determinação do NMP, exemplificando com um indicador microbiológico de qualidade da água. Parte 2. Atribua a cada descrição a letra do indicador microbiológico correspondent e [5.0 val ores; 0.3846 valo r cada let ra co rret a] A) Clostridium perfringens; B) Coliformes fecais; C) Coliformes não fecais; D) Enterococos; E) Escherichia coli; F) Pseudomonas aeruginosa; G) Teor microbiano total (nº de UFC a 22 e a 37ºC) 8. ___Bactérias com forma de bacilo, Grampositivas, anaeróbias, esporuladas, redutoras de sulfito, com longo período de permanência na água e de sobrevivência dos seus esporos, indicadoras de contaminação fecal antiga. 11.___Bactérias com forma de bacilo, Grampositivas, anaeróbias facultativas, crescem em condições aeróbias em meio de cultura seletivo com sais biliares e fermentam lactose em 48h a 37ºC com produção de ácido e gás. 9. ___Bactérias com forma de cocos, Grampositivas, crescem entre 10 e 45ºC, a pH 9.6, em meio de cultura com 6.5% de cloreto de sódio (NaCl), 40% de sais biliares e em concentrações elevadas de azida; reduzem azul-de-metileno em 0.1% de leite e conseguem sobreviver a 60ºC durante 30 minutos. 12.___Bactérias com forma de bacilo, Gramnegativas, aeróbias, oportunistas, patogénicas e com elevada resistência a antibióticos. 10.___Bactérias com forma de bacilo, Grampositivas, anaeróbias facultativas, crescem em condições aeróbias em meio de cultura seletivo com sais biliares e fermentam lactose em 24h a 44.5ºC com produção de ácido e gás. 13.___Bactérias do grupo dos coliformes fecais, que podem causar várias doenças que originam diarreias. 14.___Valores muito elevados indicam uma grande quantidade de matéria orgânica facilmente biodegradável. A) Coliformes fecais; B) Coliformes totais; C) Escherichia coli; D) Estreptococos fecais; E) Teor microbiano total 15.___ Inoculação de tubos múltiplos com caldo bagg, incubação a 37ºC durante 48 horas e observação da alteração da cor do meio de roxo para amarelo. 18.___ Inoculação de tubos múltiplos com caldo peptonado, incubação a 44.5ºC durante 24 horas e observação da formação de um anel cor-derosa após adição do reagente de Kovacs. 16.___ Inoculação de tubos múltiplos com caldo bílis 19.___ Inoculação por incorporação em meio PCA verde brilhante, incubação a 37ºC durante 48 extrato de levedura, incubação a 22ºC e a 37ºC e horas e observação da formação de gás. contagem de unidades formadoras de colónia. 17.___ Inoculação de tubos múltiplos com caldo bílis 20.___Capacidade de produção de indol. verde brilhante, incubação a 44.5ºC durante 24 horas e observação da formação de gás. [Página 1 de 2] Parte 2. Responda às questões seguintes indicando todos os cálculos que efetuar (8valores) 21.Imagine que vai fazer a análise de uma amostra de água doce superficial destinada à produção de água para consumo humano (Decreto-Lei 236/98) utilizando o método dos tubos múltiplos (5 tubos por diluição) seguido da determinação do NMP. a. [5.5 valores] Para fazer a enumeração de coliformes totais e fecais indique: i. Quantos tubos precisará e quais as suas características. ii. Os meios de cultura que terá que preparar, as suas características e os seus volumes. iii. Sabendo que para preparar um litro do meio de cultura necessita de 40 g do preparado em pó, quantas gramas terá que pesar para preparar a quantidade necessária dos tipos de meio de cultura? b. Após a análise verificou que na amostra de água não existiam Salmonelas e para os restantes indicadores microbiológicos obteve os resultados apresentados na tabela abaixo. [1.5 valor] Coliformes totais Coliformes fecais Estreptococos fecais Inoculação de 10 mL 1 2 3 4 5 + + - + + + - + - + - + + Inoculação de 1 mL 1 2 3 4 5 + + - + - + - + - + + - - Inoculação de 0.1 mL 1 2 3 4 5 - - - + - - - + - - - - - NC Cél/100 mL i. Indique o número característico dos resultados para cada indicador microbiológico, preenchendo o espaço na tabela. ii. Consultando a tabela de McCrady fornecida, diga quantas células de cada indicador existem em cada 100 mL da água analisada, preenchendo o espaço na tabela. iii. Compare os resultados obtidos com os valores máximos recomendáveis do Decreto-Lei 236/98 e conclua acerca da qualidade microbiológica da água e do tratamento que deverá sofrer, justificando. [Página 2 de 2]