roteiro análise de água para 04-12 - UFMT

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO
CAMPUS UNIVERSITÁRIO DO ARAGUAIA
ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA
I. OBJETIVOS:
Preparar e executar teste presuntivo de análise bacteriológica da água
Determinar o número mais provável (NMP) de bactérias coliformes em amostra de
água
II. MATERIAL
Reagentes: caldo LST e agar nutriente, água destilada
Equipamentos e utensílios: espátulas, vidrarias (pipetas, provetas, béckers, bastão
de vidro, erlenmeyers, tubos de ensaio), autoclave, capela de fluxo laminar, bico de
bunsen).
III. PROCEDIMENTO
A. Teste presuntivo em tubos com caldo LST
1. Identifique 3 séries de 3 tubos
2. Agite vigorosamente a amostra a ser analisada;
3. Transfira assepticamente 3 alíquotas de 1mL; 3 alíquotas de 0,1 mL e 3 alíquotas
de 0,01 mL para cada uma das 3 séries de 3 tubos contendo o caldo LST e tubos
de durhan invertidos;
4. Incube a 37° C por 24 h;
5. Avalie o resultado e consulte a tabela do NMP para conversão dos resultados
obtidos em número presuntivo de coliformes/100 mL da amostra;
B. Contagem total de bactérias heterotróficas por plaqueamento
1. Agite vigorosamente a amostra a ser analisada;
2. Transfira alíquotas de 0,1 mL para duas placas de petri;
3. Adicione agar nutriente fundido e mantido em banho maria a aproximadamente
50°C. Misture suavemente e deixe solidificar;
4. Incube a 37° C por 24 h
5. Avalie o número de colônias formadas.