Eletroforese capilar

Débora C. Rocha
1004595
Julia C. Ferreira
1302770
Moises M Rosa
1302440
Yasmin C. Ferreira
1302975
ELETROFORESE CAPILAR
Introdução
A Eletroforese é um método de visualização e separação de macromoléculas bastante
utilizados nos laboratórios de bioquímica, e também uma ferramenta muito importante
aplicada à análise de proteínas. É um método baseado na separação de partículas
carregadas em um campo elétrico que são arrastadas por uma solução tampão durante sua
migração através de um suporte sólido ou gelatinoso. A velocidade dessa migração está
diretamente relacionada à sua carga forma e tamanho.
Funcionamento
A Eletroforese Capilar (CE),segue as mesmas premissas da eletroforese clássica, porém,
a separação é conduzida por tubos capilares (15 a 100 µm de diâmetro interno e 30 a 100
cm de comprimento), preenchidos com um eletrólito condutor e submetidos à ação de um
elevado campo elétrico. O uso de capilares gera maior eficiência e redução do tempo de
análise, pois minimiza as limitações relativas ao efeito Joule, visto que a geometria do
capilar favorece a dissipação do calor gerado pela passagem da corrente elétrica.
A Figura 2 mostra um esquema padrão de
CE, onde a fonte regulável de alta tensão
(valores até 30 kV) é usada para
estabelecer um campo elétrico ao longo do
tubo capilar. Esta fonte é conectada,
através de eletrodos à dois reservatórios
contendo uma solução de eletrólitos. Um
dos eletrodos é conectado a um cabo
condutor da fonte, e o outro é conectado a
um fio terra, que resulta na obtenção de um
ânodo
(+)
e
um
cátodo
(-),
respectivamente. Inicialmente, o tubo
Figura 1.
capilar (sílica fundida) é preenchido com
uma solução de eletrólitos conveniente, geralmente uma solução tampão aquosa. Em
1/5
seguida, um volume da solução de amostra, da ordem de 1 a 20 nanolitros, é introduzido
na extremidade frontal do capilar (geralmente o ânodo), pela substituição de um dos
reservatórios da solução tampão por outro que contém a amostra. A detecção dos
compostos separados é feita na extremidade final do capilar. Após a introdução da
amostra, as extremidades do capilar e os eletrodos são imersos nos reservatórios que
contêm a solução tampão para completar o contato elétrico. Para minimizar os efeitos
térmicos, o capilar deve ser mantido à temperatura constante.
Figura 2.
Consumíveis
2/5
Especificações Técnicas
3/5
Figura 3.
Informações
Comerciais
4/5
Fabricante
Fornecedor
Beckman Coulter
Sebia
MedWOW
MedWOW
Sciex
Esalab
Valor (US$)
Estado
10.000,00 Usado
12.500,00 Usado
80.000,00 a
Novo
150.000,00
Referências Bibliográficas
SKOOG, Douglas A; HOLLER, James F; NIEMAN, Timonthy. Princípios de Análise
Instrumental. 6ed. Porto Alegre: Bookman, 2009.
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http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S010040421997000500010&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Acessado em 01 de novembro de 2015.
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http://www.agilent.com/en-us/products/capillary-electrophoresis-ce-ms/ce-ce-mssystems Acessado em 04 de novembro de 2015.
http://www.agilent.com/en-us/products/capillary-electrophoresis-ce-ms/ce-ce-mssystems/7100-ce-system#specifications Acessado em 04 de novembro de 2015.
http://www.chem.agilent.com/store/en_US/LCat-SubCat2ECS_45932/PremiumRefurbished-Equipment?navAction=push&navCount=1 Acessado em 04 de novembro
de 2015.
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