Apresentação do PowerPoint - IBB

CONTROLE DE POPULAÇÕES
MICROBIANAS
Prof. Ary Fernandes Junior
Departamento de Microbiologia e Imunologia
Instituto de Biociências - UNESP
Distrito de Rubião Júnior s/n
CEP 18618-000/ Botucatu/ SP /Brasil
Tel. 14 3811. 6240/6058 - fax 14 3815 3744
[email protected]
Dessecação e Salga
Egípcios: Embalsamento
Persas: Recipientes de prata e cobre
para água
Ignaz Phillip Semmelweis (1818-1865)
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em
operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir
incidência de infecção)
Controle de Populações Microbianas: ????
Alguns princípios importantes
O agente deve afetar diretamente o microrganismo;
O efeito normalmente não é instantâneo (tempo de
exposição);
Levar em conta o número e natureza dos
microrganismos presentes no material.
Controle da
população
microbiana
Destruir, inibir ou
remover
microrganismos
Agentes físicos
Agentes químicos
Microrganismos em números aceitáveis ou
ausência
dos mesmos
Escolha de um método ??
Material
Objetivos
Algumas Definições
Esterilização: Destruição de toda e qualquer
forma de vida (formas vegetativas, esporos,
fungos, vírus, etc) de um material
Desinfecção: Destruição de microrganismos
patogênicos presentes num material inanimado
(Desinfetantes)
Anti-sepsia: Destruição de microrganismos
patogênicos num tecido vivo (Antissépticos)
(Caracteristicas ??)
Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a
entrada de microrganismos num material (vivo
ou não) ou reduzir o número dos já presentes
(Profilaxia)
AGENTES FÍSICOS
Calor (Seco e Úmido)
-Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em
que todos os microrganismos em uma suspensão líquida
serão mortos por calor em 10 minutos
-Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de
tempo em que todos os microrganismos serão mortos
-Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo
(minutos) em que 90 % de uma população microbiana
em uma determinada temperatura será morta
103
102
D = 5 min
101
D é o tempo, em minutos, em uma determinada temperatura, capaz de
causar uma redução em 90% no número de células ou esporos
presentes numa suspensão, ou, número de minutos necessários para a
curva de sobreviventes atravessar 1 ciclo log.
Calor Seco: Oxidação do Protoplasma
Flambagem (Bico de Bunsen)
Fornos (Forno Pasteur)
Incineração
Bico de Bunsen
Forno Pasteur
Incineração
Calor Úmido Desnaturação de Proteínas
Dissolve lipídeos
Maior poder de penetração  Mais eficiente
Fervura: (100C/15 min.)
(Não destroe Esporos e alguns Vírus
(Hepatite A).
Autoclavação: Vapor
d’água sob pressão
(121C/15’)
(Autoclave) Uso
para esterilização de
materiais
(Meios de cultura,
instrumento
cirúrgicos, vidrarias,
etc).
Pasteurização:
Eliminar microrganismos patogênicos de
substâncias que não suportam temperaturas
elevadas.
Tipos  Lenta (62,8C/30 min) 5C.
Rápida (71,7C/15 seg.)  5C
(Reduz contagem entre 97 e 99%)
UHT – Ultra High Temperature
ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE
(1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-Homogeneizador; (6)Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; (8)-Vapor de Aquecimento; (9)-Leite
Pasteurizado
Pasteurização: O leite é aquecido a 65ºC e depois
resfriado a 0ºC em banho-maria, para eliminar os
microorganismos
Tindalização (= Esterilização fracionada)
(Uso para meios nutritivos)
70 a 100C/30 min.  Incubação
100oC/30 min – 1º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 2º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 3º dia
Baixas Temperaturas (-70 a –196oC) ????
Nitrogênio líquido
-196o C
Preserva
Freezer
-70o C
Filtração: Separa microrganismos de materiais
fluídos (Remoção mecânica).
Eficiência - Depende da malha do filtro
( 1 m)
Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais
(Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
Câmara de Fluxo Laminar (Filtração e Ultra Violeta)
Radiações Não Ionizantes (Ultra-Violeta)
Ionizantes (Beta, Gama, Raio X)
UV   = 210 a 328 nm (240 a 280 nm)
(Absorvida pelo DNA e proteínas)
Efeitos Diretos  Mutação,
Formação de Dímeros de
Timina e Inibição de Enzimas;
Efeitos Indiretos  Formação de O3 no ar e
H2O2 na água.
Baixo Poder de Penetração  Usos ???
Radiações Ionizantes (X,  e Gama)
(Elevado poder de penetração Alimentos
embalados)
Ioniza macromoléculas  Altera composição
química da célula
Aparelhagem dispendiosa
(Uso para substâncias e materiais sensíveis
ao calor)
Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em
sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
Vibrações Sônicas:  200.000 Hz
Mecanismo: Gases em solução na célula 
Microbolhas  Choques com a parede 
Lise da célula bacteriana (Cavitação)
Microondas
Pressão Osmótica
Dessecação
AGENTES QUÍMICOS
Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes
Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente
as bactérias tornam-se resistentes.
Drogas Antimicrobianas
Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da
célula bacteriana. São os antibióticos e
quimioterápicos.
Mecanismos de Ação
Azitromicina
Claritromicina
Estreptograminas
(Quinopristina/
Dalfopristina)
Tigeciclina
Síntese de
lipídeos
Platensimicina
Streptomyces platensis
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico),
Isopropílico (+ eficiente)
Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes.
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos,
Vírus) (Pouco ativo contra esporos)
Tempo de exposição: 10 a 15 min.
Fenóis e Derivados
Desinfetante: (5%) (Duplofen)
Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR.
Tempo de exposição: Efeito é imediato.
Coeficiente fenólico
ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE
DA MEMBRANA CELULAR
Detergentes (Surfactantes)
Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora)
Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações)
Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: 10 a 30 min.
Produto com atividade
antimicrobiana e de
detergência. É formulado a
partir do princípio ativo
Cloreto de Alquil
Dimetil Benzil Amônio,
que lhe confere a ação
antimicrobiana e o Nonil
Fenol Etoxilado (Tensoativo
não iônico), que lhe confere
a ação de detergência.
INATIVAÇÃO DE ENZIMAS
Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH)
Oxidam Grupamentos Sulfidrilas:
R-SH
-2H
R-S-S-R
R-SH
H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI),
Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina),
Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR
(Pouco ativos sobre esporos)
Tempo de exposição: Efeito imediato
O princípio ativo do PVPI
(polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo
que com suas propriedades
germicidas amplamente
conhecidas, reduz a flora
bacteriana em curto espaço de
tempo
Substituem Grupamentos Sulfidrilas:
Cl
R-SH
R-S
+
Hg
R-SH
Hg + 2 HCl
R-S
Cl
Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia
gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
AGENTES ALQUILANTES
Substituem átomos de hidrogênio em radicais
(R-NH2, OH, R-SH, R-COOH)
Formaldeído  Usado na forma gasosa (Fumegação)
Glutaraldeído  Solução Aquosa (Glutarex)
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos.
Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas
Prolongado sobre esporos
Óxido de Etileno  Gás Tóxico e Explosivo.
UM BOM DESINFETANTE.
Espectro de ação amplo,
Ação rápida e irreversível
Perda mínima de potência por ação do ambiente,
Estabilidade em sua composição química,
Não provocar danos ao homem e animais
durante aplicação,
Tolerado por materiais,
Fácil aplicação,
Econômico.
Lavar as mãos
ainda continua
sendo uma das
soluções para
os problemas
enfrentados
pela
Microbiologia
Clínica
MUITO OBRIGADO