Efeitos do veneno de Dinoponera australis (Hymenoptera

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Efeitos do veneno de Dinoponera australis
(Hymenoptera, Ponerinae) na expressão
do receptor Toll-Like 4 em células
mononucleares de sangue periférico humano
Santana, FA1,2; Bonetti, AM1; Terra, APS3; Silva-Teixeira, DN3; Goulart, LR1; Vieira, CU1,3
Instituto de Genética e Bioquímica, Universidade Federal de Uberlândia
2
Universidade Estadual de Goiás - Quirinópolis
3
Universidade Federal do Triangulo Mineiro
[email protected]
1
Paravras-chave: Dinoponera, veneno, TLR4, imunidade inata, PCR quantitativo
A análise dos componentes do veneno de himenópteras é uma fonte rica de informação sobre a função e mecanismos
biológicos desse veneno. É importante, também, por desencadear reações alérgicas em humanos e por apresentar
aplicações terapêuticas. Os receptores Toll-like (TLRs) são proteínas transmembranas caracterizadas por seqüências
extracelulares repetidas ricas em leucina capazes de reconhecer um amplo grupo de padrões moleculares associados à
patógenos (PAMPs) de diferentes espécies de microrganismos e fundamentais para a ativação da resposta imune inata.
A estimulação de diferentes tipos de TLRs tem sido associada ao desenvolvimento de respostas pró ou antiinflamatórias,
dependendo do tipo de receptor toll, da formação ou não de heterodímeros e da via de transdução de sinal utilizada.
Este trabalhou analisou o efeito de diferentes concentrações de veneno bruto da formiga Dinoponera australis sobre a
expressão do mRNA do gene TLR4 em células mononucleares de sangue periférico (PBMC) por PCR Tempo Real.
Sangue humano foi obtido de doadores voluntário, coletados em tubos contendo heparina. PBMC foram isoladas por
centrifugação em gradiente de densidade Ficoll- Pague. PBMC foram cultivadas em meio RPMI 1640 contendo 5%
de soro fetal bovino, em placas de 24 wells, sendo 1 x 106 células por well. Foram utilizadas diferentes concentrações
de veneno bruto (0,5; 1 e 3 ug/well) de Dinoponera australis para estimular PBMC por 24 horas. A expressão do
gene TLR4 foi mensurada em níveis relativos utilizando a equação 2-∆∆CT. Como referência, foi utilizado os níveis de
expressão de TLR4 em PBMC não estimulada. Os níveis de expressão gênica foram determinados por PCR temporeal e normalizados com os níveis de expressão do gene constitutivo HPRT. O veneno bruto, na concentração de 3ug,
diminui significativamente a expressão do mRNA do gene TLR4 em cultura de PBMC humano. Esses dados sugerem
que algum componente do veneno bruto dessa formiga tem efeito modulador na expressão de TLR4.
Apoio Financeiro: FAPEMIG, UEG, UFTM, UFU.
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