Seqüência parcial de cDNA do gene de hialuronidase do veneno

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
Palavras-chave: Vespidae , veneno, cDNA, RACE-PCR,
sequenciamento, hialuronidase
Silva, GP da1; Suemasu, CN1; Hayashi, P1; Viviani, VR1; Brochetto-Braga, MR1
Instituto de Biociências - Departamento de Biologia – UNESP – Rio Claro - SP.
Seqüência parcial de cDNA do gene
de hialuronidase do veneno de Polybia
paulista (Hymenoptera: Vespidae):
análise e inferências filogenéticas
Polybia paulista, conhecida popularmente como “paulistinha” é uma vespa muito comum
no Sudeste do Brasil, especialmente no estado de São Paulo. Considerando que esta vespa é
responsável por uma grande incidência de acidentes importantes sob o ponto de vista médico,
faz-se necessário a caracterização dos principais alérgenos de veneno, através da determinação dos
mecanismos de ação, estrutura e organização gênica. Desta forma, neste trabalho determinamos e
analisamos a sequência parcial de nucleotídeos de um dos alérgenos mais importantes do veneno
de Polybia paulista, a enzima hialuronidase. O cDNA foi obtido através da extração de mRNA
utilizando-se abdômens de insetos recém capturados ou armazenados a –85ºC. As reações de
amplificação dos fragmentos de interesse foram realizadas através de RACE-PCR a partir de
iniciadores gene-específicos. Os fragmentos gerados foram diretamente seqüenciados e os dados
obtidos foram analisados e comparados com seqüências similares armazenadas no Gene Bank.
A sequência determinada apresentou 690 pb e maior identidade de nucleotídeos (90%) e de
aminoácidos (87%) com a espécie Polistes annularis e menor identidade com as espécies Vespula
vulgaris, Dolichovespula maculata, Apis cerana cerana. O fragmento protéico encontrado apresentou
230 aminoácidos e peso molecular de 55908,71 Daltons, sendo constituído pelos aminoácidos Ala,
Cys, Gly e Thr. Uma característica comum dos alérgenos de veneno de vespas é a sua identidade
com outras proteínas de nosso ambiente, tal como ocorre com a sequência de cDNA aqui obtida,
a qual apresentou 34% de identidade com a HYAL 1, correlacionada com a progressão de câncer
de bexiga em humanos. Estes resultados, embora preliminares, indicam que a hialuronidase é
um alérgeno bastante conservado, permitindo assim, o estabelecimento de relações filogenéticas.
Além disso, fornecem importantes subsídios para o estudo da reatividade imunológica cruzada
entre os venenos de abelhas e vespas, relevantes para alguns pacientes com múltipla sensibilidade
a ferroadas destes insetos.
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