CBS25. Fagocitose de células apoptóticas infectadas com Streptococcus pneumoniae promove
diferenciação linfócitos Th1
Niño VE, Dejani NN, Verdan FF, Salina ACG, Medeiros AI
Introdução: A rápida e eficiente remoção de células apoptóticas por fagócitos, denominada
eferocitose, é um processo imprescindível para preservação do tecido. Sabe-se que em condições não
infecciosas a fagocitose de células apoptóticas promove a síntese de mediadores como PGE2, TGF-β e
IL-10, que promove um microambiente anti-inflamatório que propicia um microambiente para a
diferenciação celular do tipo Treg. Entretanto, um elegante estudo utilizando células apoptóticas
infectadas com E. coli demonstrou que a fagocitose destas células promove a geração não apenas de
citocinas anti-inflamatórias, como TGF-β, mas também de IL-6 e IL-23, resultando em um
microambiente favorável para a diferenciação de células Th17. A atuação da PGE2 na imunidade
adaptativa vem sendo investigada quanto à diferenciação e ativação de linfócitos Th1, Treg e Th17.
Resultados preliminares de nosso grupo de pesquisa demonstram que a fagocitose de células
apoptóticas infectadas com E. coli, além de promover a síntese de citocinas como IL-6 e TGF-β
também induz a produção de altos níveis de PGE2. Objetivo: Avaliar se o tipo de patógenos, ou PAMP
(Padrões Moleculares Associados ao Patógeno), no interior de células apoptóticas infectadas poderia
influenciar no padrão de diferenciação de células T. Metodologia: Para tanto, como fonte de células
apoptóticas infectadas utilizou-se células RAW264-7 infectadas com uma bactéria Gram-positiva,
Streptococcus pneumoniae (MOI - 1:20, bactérias opzonizadas com 50% de soro imune). Após a 4h de
fagocitose, as células foram irradiadas com UVC(5mJ) e a apoptose foi avaliada pela marcação com 7ADD/Anexina. Para gerar meio condicionado (MC) células dendríticas (CD) foram co-cultivadas com
células apoptóticas infectadas na proporção 1:1, durante 18h. Para o ensaio de diferenciação, linfócitos
T naive (CD25-CD62LHighCD44Low) foram cultivados na presença MC ou citocinas polarizantes para
Th1 ou Th17 na presença de anti-CD3 e anti-CD28. A diferenciação celular foi avaliada mediante a
marcação com anticorpos anti-CD4, anti-IL-17 e anti-IFN. Resultados e Discussão: A porcentagem
de células apoptóticas precoces foi de 15,4% (Anexina+/7AAD) e de apoptóticas tardias 27,63%
(Anexina+/7AAD+). Diferente do observado previamente para E. coli, a diferenciação de linfócitos T
na presença de MC oriundo da fagocitose de células apoptóticas infectadas com S. pneumoniae foi
capaz de promover a diferenciação de 8,46% de linfócitos TCD4+/IFN+ e 0% de linfócitos Th17.
Estes resultados sugerem que durante o reconhecimento e fagocitose de células apoptóticas-infectadas
pelas CD, o tipo de PAMPs no interior de células apoptóticas pode influenciar diretamente a produção
de mediadores solúveis e, portanto condicionar o microambiente para diferenciação das subpopulações
de linfócitos T CD4.
Palavras-chave: Fagocitose, Th1, células apoptóticas.
Apoio financiero: CNPq, FAPESP, PAEDEX.
