PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO Desobstrução da Probe do Citômetro de Fluxo BD FACS Canto II Data de Elaboração 11/01/16 POP N°04 Página 01 de 04 PROCEDIMENTO 1. Parar a aquisição da atual amostra 2. Retirar o tubo da probe. 3. Colocar o tubo Hipoclorito de Sódio (tubo H) na probe do equipamento. 4. No software FACSDiva, clicar no botão <Cytometer>, localizado na barra superior, selecionar a opção <Cleaning Modes> e logo após, selecionar a opção <Cleaning Flow Cell>. 5. Repetir o item 4. PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO Desobstrução da Probe do Citômetro de Fluxo BD FACS Canto II Data de Elaboração 11/01/16 POP N°04 Página 02 de 04 6. Retirar o tubo Hipoclorito de Sódio (tubo H) da probe do equipamento. 7. No software FACSDiva, clicar no botão <Cytometer>, localizado na barra superior, selecionar a opção <Cleaning Modes> e logo após, selecionar a opção <SIT Flush>. 8. Colocar um tubo de amostra na probe para verificar se o sistema de fluidos foi desobstruído. 9. Caso ainda esteja obstruído, repetir os passos 3 a 8. ATENÇÃO! 1. Se estiverem acontecendo sucessivas obstruções do sistema de fluidos, é provável que o experimento esteja com algum dos seguintes problemas: (1) número excessivo de células; (2) presença de grumos celulares; (3) células de tamanho maior do que a capacidade da célula de fluxo do equipamento; (4) presença de sujeira em amostras não filtradas. 2. Caso o sistema de fluidos continue obstruído, deverá ser realizada a limpeza do sistema de fluidos, de acordo com o POP nº 10 - Limpeza do Sistema de Fluidos entre Experimentos. 3. Caso o tubo Hipoclorito de Sódio (tubo H) esteja vazio, o mesmo poderá ser enchido da seguinte forma: 1. No carrinho de fluidos, localizar o filtro de ar do FACS Cleaning Solution (filtro do meio). PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO Desobstrução da Probe do Citômetro de Fluxo BD FACS Canto II Data de Elaboração 11/01/16 POP N°04 Página 03 de 04 2. Soltar a mangueira inferior que está conectada ao carrinho de fluidos, apertando o clipe metálico. 3. Apertar a ponta dessa mangueira contra a parte interna do tubo H, de modo que a FACS Cleaning Solution escorra para dentro do tubo. PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO Desobstrução da Probe do Citômetro de Fluxo BD FACS Canto II Data de Elaboração 11/01/16 POP N°04 Página 04 de 04 4. Reposicionar a mangueira no carrinho de fluidos, cuidando para fazer o encaixe correto. NATUREZA DAS ALTERAÇÕES REVISÃO NÚMERO DATA ALTERAÇÕES