Estrutura, processamento e síntese Estrutura Ribonucleotídeo Fita de RNA Tipos: RNA ribossomal RNA transportador RNA mensageiro RNA encontrados nos núcleos RNA transportador 15 % RNA celular De 74 – 95 resíduos de nucleotídeos No mínimo 1 RNAt para cada aa Bases incomuns Pareamento de bases intracadeia Molécula adaptadora Modificações pós-transcricionais Processamento do tRNA RNA ribossomal Diferentes tipos Procariotos e mitocôndrias de eucariotos ○ 23S, 16S e 5S Eucariotos ○ 28S, 18S, 5,8S e 5S Constituem 80% RNA da célula S - Svedberg RNA 5S Modificações pós-transcricionais Processamento do rRNA RNA mensageiro 5% RNA celular Heterogêneo em tamanho e sequência de bases Transporte de informações do DNA para o citossol Molde para a síntese protéica Tipos Policistrônico Monocistrônico Modificações pós-transcricionais mRNA de eucarioto após modificações nas extremidades Modificações pós-transcricionais Remoção de sequências intervenientes (introns) no mRNA de eucariotos Processo corte-junção (splincing) ○ Envolve RNAs nucleares (RNAsn) associados às proteínas Mutações em sítio de corte junção ○ Proteínas aberrantes Modificações pós-transcricionais Corte-junção do mRNA Corte-junção alternativo de mRNA Podem ocorrer processos diferentes com pré-RNAm de um mesmo gene, em tecidos diferentes Múltiplas variações de mRNA e proteínas Transcrição em procariotos Único tipo de RNA polimerase Diferentes subunidades Enzima central Atividade de polimerase 5’ – 3’ Holenzima Subunidade sigma + enzima central ○ Reconhecimento da região promotora no DNA 5ª subunidade função desconhecida Fases da transcrição em procariotos Iniciação Ligação da holoenzima às regiões promotoras ○ Caixa de Pribnow ○ Sequência -35 Fases da transcrição em procariotos Alongamento Desnaturação local da hélice de DNA Aparecimento de supertorção ○ DNA topoisomerases I e II Fases da transcrição em procariotos Terminação Processos Independente de rô ○ Sequência encontrada na maioria dos genes de procariotos ○ Resulta na formação de estrutura em grampo no mRNA Dependente de rô ○ Envolve uma ATPase com atividade de helicase Inibidores da transcrição em procariotos Rifampicina Inibição da iniciação ○ Ligação à subunidade β da RNA polimerase Dactinomicina Liga-se a matriz de DNA ○ Movimento da RNA polimerase é inibido Transcrição em eucariotos Polimerases diferentes para síntese de tRNA, mRNA e rRNA Polimerase I ○ Síntese de precursores dos RNAs 28S, 18S e 5,8S RNA polimerase II ○ Síntese dos precursores dos mRNAs e RNAsn pequenos Polimerase III ○ Síntese de RNAs pequenos RNAt, RNA 5S, RNA sn Promotores da transcrição para a RNA-polimerase III Caixa TATA (caixa Hogness) Caixa CAAT Caixa GC Fatores de transcrição em eucariotos Fatores gerais de transcrição CTF, SP1, TFIID ○ Ligação à sequência consenso Fatores gerais de transcrição adicionais (TFIIs) Montagem do complexo de inciação Recrutamento da RNA –pol II Fatores de transcrição em eucariotos Elemento estimulador Localizações das sequências estimuladoras em eucariotos