Estrutura, processamento e síntese

Estrutura, processamento e
síntese
Transcrição



Importância
Produtos
Características:
 Alta seletividade
○ Diferenciação
bioquímica dos
tecidos
 Transcritos primários
podem ser
modificados
Estrutura do RNA
Ribonucleotídeo
(ribonucleosídeo fosfatado)
Fita simples de RNA
Tipos:
RNA ribossomal
 RNA transportador
 RNA mensageiro
 RNAs nucleares

RNA transportador

Molécula adaptadora
 No mínimo 1 RNAt
para cada aa
15 % RNA celular
 74 – 95 resíduos de
nucleotídeos
 Bases incomuns
 Pareamento de bases
intracadeia

Modificações pós-transcricionais
Processamento do tRNA
RNA ribossomal

Diferentes tipos
 Procariotos e
mitocôndrias de
eucariotos
○ 23S, 16S e 5S
 Eucariotos
○ 28S, 18S, 5,8S e 5S

Constituem 80% RNA
da célula
S - Svedberg
RNA 5S
Modificações pós-transcricionais
Processamento do rRNA
RNA mensageiro
 Transporte
de informações do DNA para o
citossol
 Molde para a síntese protéica
 Tipos
○ Policistrônico
○ Monocistrônico
 5%
RNA celular
 Heterogêneo em tamanho e sequência de
bases
Modificações pós-transcricionais
mRNA de eucarioto após modificações
nas extremidades
Modificações pós-transcricionais
mRNA
 Remoção
de sequências
intervenientes (íntrons) no mRNA de
eucariotos
 Processo corte-junção (splincing)
○ Envolve RNAs nucleares (RNAsn)
associados às proteínas
 Mutações em sítio de corte junção
○ Proteínas aberrantes
Modificações pós-transcricionais
Corte-junção do mRNA
Partícula de
ribonucleoproteína
nuclear pequena
Corte-junção alternativo de mRNA

Podem ocorrer
processos diferentes
com pré-RNAm de
um mesmo gene,
em tecidos
diferentes
 Múltiplas variações
de mRNA
○ Proteínas diferentes
Transcrição em procariotos

Único tipo de RNA
polimerase
 Diferentes subunidades

Enzima central
 Atividade de polimerase
5’

3’
Holenzima
 Subunidade sigma +
enzima central
○ Reconhecimento da
região promotora no
DNA

5ª subunidade
 função desconhecida
Fases da transcrição em
procariotos

Iniciação
 Ligação da holoenzima RNA-polimerase às
regiões promotoras
○ Caixa de Pribnow
○ Sequência -35
Fases da transcrição em
procariotos

Alongamento
 Desnaturação local da hélice de DNA
 Aparecimento de supertorção
○ DNA topoisomerases I e II
Fases da transcrição em
procariotos
Terminação
 Processos

 Independente de rô
○ Sequência encontrada na
maioria dos genes de
procariotos
○ Resulta na formação de
estrutura em grampo no
mRNA
 Dependente de rô
○ Envolve uma ATPase com
atividade de helicase
Inibidores da transcrição em
procariotos

Rifampicina
 Ligação à
subunidade β da
RNA polimerase
○ Inibição da iniciação

Dactinomicina
 Ligaçaõ à matriz de
DNA
○ Inibição do
movimento da
RNA polimerase
Transcrição em eucariotos

Classes diferentes de polimerases para síntese de
tRNA, mRNA e rRNA
 Polimerase I
○ Síntese de precursores dos RNAs 28S, 18S e 5,8S
 RNA polimerase II
○ Síntese dos precursores dos mRNAs e RNAsn
pequenos
 Polimerase III
○ Síntese de RNAs pequenos
 RNAt, RNA 5S, RNA sn
Promotores da transcrição para
a RNA-polimerase II



Caixa TATA (caixa Hogness)
Caixa CAAT
Caixa GC
Fatores de transcrição em
eucariotos

Fatores gerais de
transcrição
 CTF, SP1, TFIID
○ Ligação à sequência
consenso

Fatores gerais de
transcrição adicionais
(TFIIs)
 Montagem do complexo
de iniciação
 Recrutamento da RNA –
polI
 Modulação da iniciação
Fatores de transcrição em
eucariotos

Fatores gerais de
transcrição adicionais
(TFIIs)
 Montagem do complexo
de iniciação
 Recrutamento da RNA
–Polimerase II
 Modulação da iniciação
Localizações das sequências
estimuladoras em eucariotos