DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR
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DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR ESTRUTURA DO RNA POLÍMERO DE RIBONUCLEOTÍDIOS PURINAS: A e G PIRIMIDINAS: C e U LINEAR FITA ÚNICA CRESCIMENTO DA CADEIA 5’ – 3’ SINTETIZADO Á PARTIR DE UM MOLDE DE DNA TIPOS DE RNA: RNA MENSAGEIRO RNA RIBOSSÔMICO RNA TRANSPORTADOR snRNAs TRANSCRIÇÃO TRANSCRIÇÃO DE PROCARIOTOS RNA mensageiro policistrônico uma única RNA Polimerase promotores POLIMERASE DE PROCARIOTOS Ex. E. coli Função Uma enzima que tem várias subunidades: Liga seq, reguladora Forma ligação fosfodiéster Liga--se ao DNA molde Liga Reconhece o promotor e inica a síntese Seqüências consenso da região promotora de E. coli “Regiões conservadas”: sítio de início (em geral uma purina), TATA box (-10), seqüência consenso TTGACA (-35), distancia entre -10 e -35 de ~17 pares de bases. INICIAÇÃO ELONGAÇÃO TERMINAÇÃO região palíndrome rica em C e G e sequencia terminal será rica em U Terminação Rho dependente Proteína Rho ajuda a terminação da transcrição de certos genes detectando sinais de terminação adicionais CÉLULA EUCARIÓTICA TRANSCRIÇÃO EM EUCARIOTOS RNA mensageiro -carrega a informação genética para os ribossomos -monocistrônico -processado antes de ser considerado maduro e ser exportado do núcleo RNA Polimerase II é quem transcreve os genes que serão traduzidos em proteínas, ela identifica: -promotores -fatores de transcrição -códon de iniciação (AUG) -códons de terminação (UAA, UGA, UAG) A extremidade 5’ da molécula de RNA é “encapada” no início da transcrição pela adição de um nucleotídio contendo G metilado (trifosfato de 7-metilguanosina). Depois da clivagem a enzima Poli(A) polimerase adere uma cauda de A = cauda poli A A transcrição em eucariontes é regulada por elementos cis e trans RNA POLIMERASES DE EUCARIOTOS RNA POLIMERASES DE EUCARIOTOS TIPO LOCAL TRANSCRITOS CELULARES I NUCLEO rRNAs 18S,5.8S,28S II NUCLEOPLASMA precursores de mRNA e snRNA III NUCLEOPLASMA tRNA e 5s rRNA PROMOTORES TATA box, em torno da posição -25 CAAT box GC box Octamer box FATORES DE TRANSCRIÇÃO ENHANCER Alguns elementos de regulação atuam a distâncias de 50 kb ou mais A cauda poli A que pode ter de 80 a 250 resíduos, é adicionada depois de uma clivagem e não é codificada. TRANSCRITO PRIMÁRIO GENES DE EUCARIOTOS SÃO INTERROMPIDOS Processamento do RNA Estudo de processamento por microscopia eletrônica: DNA contendo o gene para ovoalbumina –hibridizado com mRNA de ovoalbumina. TIPOS DE ÍNTRON Grupos I e II - encontrados em genes de cloroplastos e mitocôndrias – remoção (splicing) autocatalítica. Grupo III- encontrado nos transcritos primários de mRNA no núcleo– remoção (splicing) catalisada por spliceossomos (formam alças, rompem ligações fosfodiester, unem as extremidades dos exons). Spliceossomo=complexo formado por ribonucleoproteinas pequenas Processamento alternativo Ex. Processamento do transcrito primário do gene de α-tropomiosina Alguns antibióticos e toxinas agem nas RNAs polimerases Exemplos: Antibiótico rifampicina – liga a subunidade β de bactérias Toxina α-amanitina do cogumelo amanita phalloides age em RNA polimerases nucleares (tipo I) de eucariotos
