Monitorização ambiental | Parte A.microbiologia CURSO DE ESPECIALIZAÇÃO TECNOLÓGICA EM QUALIDADE AMBIENTAL 2012/2013 Informação: a unidade de formação Monitorização Ambiental é composta por duas partes; a parte A.microbiologia tem peso de 40% e a parte B.análises físico-químicas tem peso de 60% na nota final Funcionamento da parte A.microbiologia Uma aula de 2.5 horas/semana durante 13 semanas (32 horas letivas). Sala de aula: F1.Man.1 Avaliação: 2 testes escritos (50%) + 2 relatórios de grupo (40%) + 1 relatório individual (10%) Calendarização das atividades letivas e de avaliação 1|MÉTODOS BÁSICOS EM MICROBIOLOGIA Aula 1| 26-set-2012 Apresentação da parte A.microbiologia: regras e modo de funcionamento, calendarização das aulas e da avaliação, bibliografia e legislação. Normas básicas de utilização do laboratório de microbiologia. Microbiologia e microrganismos: introdução. A importância dos métodos de assepsia em microbiologia: inoculação de caixas de Petri com meio de cultura (agar nutritivo) por exposição ao ar. Aula 2| 28-set-2012 Observação dos resultados das inoculações (parte 1). Observação macroscópica de colónias; distinção de fungos filamentosos. Protocolo 1.2: elaboração de uma preparação a fresco, observação e caracterização microscópica; distinção de bactérias, leveduras e fungos filamentosos; registo das observações efetuadas. Aula 3| 03-out-2012 Observação dos resultados das inoculações (parte 2). Protocolo 1.3: a coloração de Gram, objetivos e procedimentos. Observação e caracterização microscópica após coloração; caracterização e distinção de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas; registo das observações efetuadas. Avaliação: entrega de um relatório individual das observações efetuadas. Aula 4| 10-out-2012 1 Protocolo 1.1: elaboração, distribuição e esterilização de meios de cultura sólidos; agar de dextrose de batata (PDA ) e 2 agar para contagem em placas (PCA ). Circuito de recuperação de material num laboratório de microbiologia (lavagem e esterilização pelo calor seco em estufa, esterilização pelo calor húmido, funcionamento do autoclave). 1 O meio de cultura PDA destina-se à cultura de fungos em caixas de Petri, com inoculação por exposição ao ar. Nesta fase, faz-se a esterilização em Erlenmeyers ou em frascos, espera-se que o meio arrefeça (solidifica) e guarda-se no frio. Na aula seguinte, o meio tem que ser liquefeito, efetuando-se a distribuição em caixas de Petri. 2 O meio de cultura PCA destina-se à cultura de bactérias através de dois métodos. Para o método da exposição ao ar utiliza-se o mesmo procedimento descrito para o PDA. Para o método da inoculação por incorporação, o meio é distribuído em tubos de ensaio, esterilizado e guardado no frio. Na aula seguinte liquidifica-se e usa-se diretamente do tubo como descrito no protocolo. Monitorização ambiental | microbiologia CET em Qualidade Ambiental 2012/2013 Página |2 2|QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE SUPERFÍCIES E DO AR INTERIOR Aula 5| 12-out-2012 Protocolo 1.1 (conclusão): distribuição do resto dos meios de cultura elaborados na aula anterior em caixas de Petri. Protocolo 2.3: amostragem com zaragatoa e inoculação por incorporação em meio PCA para determinação do número de UFC de bactérias aeróbias mesófilas totais. Qualidade microbiológica de superfícies. Parâmetros microbiológicos e respetivos valores, métodos e técnicas. Aula 6| 17-out-2012 Leitura dos resultados da aula anterior (qualidade de superfícies). Protocolo 1.8: Contabilização do número de unidades formadoras de colónia (UFC) e cálculos Interpretação dos resultados, comparação com legislação e discussão. Registo das observações efetuadas e elaboração do relatório. Protocolo 2.1: amostragem por sedimentação. Inoculação em PDA para determinação do número de UFC de fungos e em PCA para determinação do número de UFC de bactérias. Qualidade microbiológica do ar. Legislação: parâmetros microbiológicos e respetivos valores, métodos e técnicas. Aula 7| 19-out-2012 Leitura dos resultados da aula anterior (qualidade do ar). Protocolo 2.1: Cálculo do número de unidades formadoras de colónia (UFC) por unidade de volume. Interpretação dos resultados, comparação com legislação e discussão. Registo das observações efetuadas e elaboração do relatório. Aula 8| 24-out-2012 Avaliação: (1) entrega do relatório sobre qualidade do ar e qualidade de superfícies; (2) teste escrito de avaliação de resultados de aprendizagem. 3|QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA Aula 9| 26-out-2012 Protocolo 1.1: preparação e distribuição de meios de cultura líquidos e sólidos: Protocolo 3.2 (1º tempo): meio PCA (teor microbiano total) Protocolo 3.4 (1º tempo): caldo bílis verde brilhante de concentração simples e de concentração dupla (coliformes e coliformes fecais) + caldo peptonado (Escherichia coli) Protocolo 3.6: (1º tempo): caldo bagg de concentração simples e de concentração dupla (estreptococos fecais) Qualidade microbiológica da água. Legislação: parâmetros microbiológicos e respetivos valores, métodos e técnicas. Aula 10| 31-out-2012 Protocolo 3.1: recolha de amostras de água. Inoculação e incubação (2º tempo dos Protocolos 3.2, 3.4 e 3.6). Aula 11| 02-nov-2012 Leitura de resultados, repicagem e incubação (3º tempo dos Protocolos 3.2, 3.4 e 3.6). Cálculos, discussão e conclusões. Elaboração do relatório (início). Aula 12| 07-nov-2012 Leitura de resultados (4º tempo do Protocolo 3.4). Cálculos, discussão e conclusões. Elaboração do relatório (conclusão). Aula 13| 09-nov-2012 Avaliação: (1) entrega do relatório sobre qualidade do ar e qualidade de superfícies; (2) teste escrito de avaliação de resultados de aprendizagem.