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TÍTULO: PADRONIZAÇÃO DA TÉCNICA DE IMUNOCIQTOOUÍMICA PARA DIFERENCIAÇÃO
LINFOCÍTICA NO LINFOMA CANINO
CATEGORIA: EM ANDAMENTO
ÁREA: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E SAÚDE
SUBÁREA: MEDICINA VETERINÁRIA
INSTITUIÇÃO: UNIVERSIDADE ANHEMBI MORUMBI
AUTOR(ES): CAROLINE GABRIELLY MALACHIAS SOUTO
ORIENTADOR(ES): MÁRCIO ANTÔNIO BATISTELA MOREIRA
COLABORADOR(ES): LÍVIA MENDES MIRANDA
PADRONIZAÇÃO
DA
TÉCNICA
DE
IMUNOCIQTOOUÍMICA
PARA
DIFERENCIAÇÃO LINFOCÍTICA NO LINFOMA CANINORESUMO
O referido trabalho tem por finalidade testar, padronizar e integrar a técnica de
Imunocitoquímica para diferenciação linfocítica do Linfoma Canino na rotina
laboratorial do Hospital Veterinário Anhembi Morumbi (HOVET). O material coletado
será submetido à Imunofenotipagem objetivando a reação antígeno-anticorpo via
marcadores celulares específicos anti-CD3 para linfócitos B e anti-CD79α para
linfócitos T.
INTRODUÇÃO
Os linfomas caninos representam um vasto e diversificado conjunto de neoplasias
malignas hematológicas que compartilham em comum a origem nas células
linfóides. Seus sítios primários são os órgãos sólidos do sistema linfático (linfonodos,
baço), entretanto podem acometer os demais órgãos devido à capacidade de
migração e disseminação destas células por todo o organismo animal sendo assim
responsável por volta de cinco a dez por cento de todas as neoplasias que
acometem os cães e 90% das neoplasias do sistema hematopoiético nesta espécie
(Vail, 2000/2003; Figueira et al.,2002; Daleck et al., 2008).
A etiologia ainda é pouco conhecida e considerada multifatorial em razão da
impossibilidade de se apontar um único agente etiológico que justifique o
desenvolvimento da neoplasia (Vail & Young, 2007).
As classificações do linfoma canino fundamentam-se na localização anatômica,
critérios citológicos e histológicos, além das características imunofenotípicas (Vail &
Young, 2007). Segundo, Teixeira (2008) o pesquisador Kiel (Lennert et al., 1978) foi
o pioneiro a propor a imunofenotipagem, ou seja, a diferenciação celular linfocítica
em B e T em conjunto ao critério morfológico de classificação conferindo assim alto
valor prognóstico e indicação temporal de reincidência da doença. Esta
diferenciação ocorre por meio do emprego de marcadores celulares específicos, os
anticorpos CD3, para células T, e CD79α, para as células B (Milner et al., 1996).
Caniatti, et al. (1996) afirma que a determinação do imunofenótipo dos linfomas em
células B e T, através de técnicas de imunocitoquímica, surgem como um recurso de
importante auxílio no estabelecimento de protocolos clínicos de tratamento de forma
mais rápida e eficiente. Contudo, ainda são poucos os estudos abordando a técnica
de Imunocitoquímica através de preparados citológicos coletados por Punção
Aspirativa por Agulha Fina (PAAF) na análise dos linfomas caninos. Esta técnica
apresenta como vantagens o desconforto mínimo ao paciente e a possibilidade de
coletas variadas (Vernau
et al., 2001), além de custo acessível e rapidez no
diagnóstico (Suzano, 2004).
OBJETIVOS
Padronizar e integrar a técnica de Imunocítoquimica através de amostras citológicas
coletadas por PAAF compatíveis com Linfoma Canino com posterior categorização
de ambos os subtipos celulares B e T, a fim de contribuir com o prognóstico,
tratamento e diagnóstico diferencial da enfermidade, além de abordar a
predominância e a relação dos subtipos encontrados dentro da espécie supracitada.
METODOLOGIA
Serão coletadas 80 amostras citológicas por PAAF de linfonodos externos, internos
e nódulos linfáticos de animais que participem do ciclo de atendimento do HOVET,
escolhidos de maneira aleatória, diagnosticados com linfoma canino de qualquer tipo
citomorfológico ou que apresentem suspeita clínica. O material coletado será
submetido à imunofenotipagem através da imunocitoquímica.
DESENVOLVIMENTO
O presente trabalho se encontra no estágio de consulta á revisão bibliográfica e de
seleção de animais diagnosticados ou com suspeita clínica de linfoma canino,
incluindo a coleta inicial de 10 amostras citológicas, através de PAAF de linfonodos
externos, pertencentes à rotina do HOVET para futuro processamento.
RESULTADOS PRELIMINARES
Até o momento foram selecionadas e coletadas, por PAAF, dez amostras de
preparados citológicos de linfonodos externos para análise citomorfológica e
confirmação de suspeita clínica de linfoma canino. Dentro dos dez casos citados,
três eram ainda não diagnosticados e apresentaram resultados compatíveis com a
neoplasia referida. O diagnóstico citomorfológico é de suma importância para o
projeto, tanto para a futura análise Imunocitoquímica, quanto para estabelecer uma
correlação entre e o subtipo linfocítico encontrado.
FONTES CONSULTADAS
Caniatti, M, et al: Canine Lymphoma: Immunocytochemical Analysis of Fine-Needle
Aspiration Biopsy. Vet Pathol. 33:204 – 212, 1996.
Suzano, S. M. C. Classificação Citológica e Imunocitoquímica dos Linfomas Caninos.
Botucatu, 2004. 110 p. Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista.
Vail, D.M.; YOUNG, K.M. Hematopoietic tumors. In: Withrow, S.J.; Macewen, E.G.
Small animal clinical oncology. 4. ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 2007.
Texeira, T.S. Imunofenotipagem: Ferramenta Prognóstica para Linfoma em Cães e
Gatos. Rio de Janeiro: Pós-Graduação em Patologia Clínica Veterinária,
Universidade Católica de Brasília, 2008. 46p. Monografia de Conclusão de Curso.
Milner, R. J. et al. Immunophenotypic classification of canine malignant lymphoma on
formalin-fixed paraffin wax-embedded tissue by means of CD3 and CD79a cell
markers. Onderstepoort J. Vet. Res., v. 63, p. 309-313, 1996.
Figueira, R; et al. Linfossarcoma em cães. Ciência Rural, Santa Maria,
v.32,n.5,p.895-99,2002.
Morrison, W.B. A fresh look at lymphoma in dogs and cats. In Proceedings of the
North American Veterinary Conference Congress, Orlando, Florida, 13-27 January,
2007.
Daleck, C.R; et al.Oncologia em cães e gatos. São Paulo: Roca, 2008 p.481-505.
Vail, D.M. Hematopoietic tumors. In: Ettinger, S.J.;Feldman, E.C. Textbook of
veterinary internal medicine. Philadelphia: Saunders, 2000. p.507-522.
Vernau, K. M.; et al. Primary canine and feline nervous tumors: intraoperative
diagnosis using the smear technique. Veterinary Pathology, v. 38, n. 1, p. 47-57,
2001.
Lennert k, Malignant Lymphomas other than Hodgkin’s disease, New York; SpringerVerlag; 1978.