sangue e doenas transmissveis

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SER REPRODUZIDA SEM A
REFERÊNCIA DO AUTOR
Considerações sobre o diagnóstico
de doenças transmitidas pelo
sangue
Ms. Paulo Germano de Carvalho
O sangue é uma porta de entrada para
numerosos organismos que provocam doenças
nos seres humanos se não forem eliminados
pelo sistema imunológico. Como muitas dessas
doenças são graves e podem levar o indivíduo
à morte, conhecê-las pode nos ajudar a
preveni-las.
Porque não se deve doar sangue durante alergia, febre ou resfriado?
Porque quem fez tratamento odontológico ou cirurgia fica impedido
de doar?
Porque quem recebeu transfusão só pode doar sangue 1 ano depois?
Porque quem fez tatuagem, piercing
temporariamente impedido de doar?
ou
acupuntura
fica
Porque sâo inabilitados por 12 meses candidatos à doação que
tiveram DST ou que tiveram relações homossexuais e também
profissionais do sexo?
Porque quem tem doenças do coração, rins, fígado não pode doar?
Porque retornar atividade normal apenas 2 horas após a doação?
Porque doadores com história de vida com múltiplos parceiros só
podem doar sangue após 4 meses de relacionamento?
Triagem clínica x triagem sorológica
-- Doença foi identificada em 1984 e no ano seguinte os
primeiros testes para detecção de anticorpos anti-HIV já
estavam disponíveis. Nos EUA.
-Em 1986, um subtipo diferente foi isolado sendo denominado
de HIV-2. Nesse mesmo ano, ocorreram os primeiros estudos
descrevendo a presença do antígeno p24 no soro antes do
aparecimento de anticorpos.
- Em 1988, no Brasil, o Ministério da Saúde determinou a
realização de testes sorológicos para detecção de anticorpos
anti-HIV em todas as doações de sangue.
Sangue total
Plasma rico em plaquetas
Concentrado de
Concentrado de hemácias
Plasma fresco Congelado
plaquetas
Crioprecipitado
Plasma simples
Novas entidades transmitidas pelo sangue foram reconhecidas
HIV
Sífilis
Hepatite B
Malária
Hepatite C
HTLV
Doença de
Chagas
Há outras doenças que podem ser
transmitidas pelo sangue ???
Toxoplasmose
Citomegalovírus
?
Dengue
Sífilis
 Causada por uma bactéria, o Treponema pallidum. É
uma DST que causa uma ferida nos órgãos genitais de
homens e mulheres. Como a ferida desaparece depois de 4
semanas, mesmo sem tratamento, o doente acredita que
ficou curado. Nesse tempo ela pode ser transmitida por
relação sexual.
 O paciente pode ser tratado com antibióticos. Caso
contrario a doença evolui para uma fase crônica e após
alguns anos o sistema circulatório e nervoso estará
comprometido.
 Treponema não é obtido em meios artificiais de cultura e
o tempo de divisão celular é lento.
 Testes : VDRL e FTA-Abs
Imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpo: o
soro do paciente é diluído, colocado sobre o antígeno e
incubado. Após a lavagem, a preparação é incubada com o
conjugado fluorescente.
C
H
A
G
A
S
Doença de Chagas
 Causada por um protozoário, o Tripanossoma cruzi.
Transmitido através do inseto Triatoma infestans que se
abriga em frrestas de parede de barro ou madeira. O inseto
se alimenta de sangue e pica enquanto sua vítima dorme.
Se antes, ele já tiver picado uma pessoa infectada com o
tripanossoma, poderá transmitir o parasito que se reproduz
em seu intestino.
 Ao picar, o barbeiro elimina suas fezes contaminadas; ao
coçar o indivíduo favorece a entrada do tripanossoma que
chega a circulação.
 Raramente ocorre manifestações clínicas na fse inicial
quando há chance de cura. Se evolui para a fase crônica
se instala nos músculos.
 Testes: Quimiol/ Western blot / IFI
TYPES OF ELISA
Elisa – plate (8 x 12)
Hepatíte B
 Infamação do fígado fígado que pode ser causada por
infecções virais ou por agentes tóxicos.
Sintomas: urina escura,
abdominais e icterícia.
fadiga,
nâuseas,
dores
 90% das pessoas contaminadas pelo vírus conseguem
se curar com ajuda do sistema de defesa. Além do sangue,
o vírus pode ser transmitido por meio de relações sexuais
desprotegidas.
Testes: utiliza pelo menos 3 marcadores
imunológicos para o diagnóstico: HBsAg, anti-HBc
e anti-HBs
Hepatite B –
Diagnóstico laboratorial:
• Exames inespecíficos semelhantes aos da
hepatite A;
• Sorologia – Marcadores:
– HBsAg→ indica infecção atual (aguda ou crônica);
– Anti-HBc→ IgM indica infecção em atividade; IgG
indica evolução para a resolução;
– HBeAg → indica replicação viral (é secretado);
– Anti-HBs→ indica cura (ou vacinação).
HEPATITE B AGUDA:
HEPATITE B CRÔNICA:
Marcadores sorológicos e eventos clínicos
em um caso de HVB aguda ictérica
P.I.
4-26
sem
Fase aguda (ictérica)
pródromos
1 a 2 sem
icterícia
2 a 12 sem
Fase pós-ictérica
2 a 18 sem
Sintomas
HBsAg
anti-Hbc
HBeAg
IgM anti-HBc
Tempo
Marcadores sorológicos e eventos clínicos
em um caso de HVB em evolução para cura
Fase pós-ictérica
2 a 18 sem
anti-Hbc
IgM anti-HBc
Tempo
Marcadores sorológicos e eventos clínicos
em um caso de HVB curada
Fase de convalescença
anos
anti-Hbc
anti-HBs
anti-HBe
Tempo
Marcadores sorológicos em paciente
vacinada contra a HVB
anos
anti-HBs
Tempo
Marcadores sorológicos e HVB
crônica
P.I.
4-26
sem
Fase aguda (ictérica)
pródromos
1 a 2 sem
Fase pós-ictérica
icterícia
2 a 12 sem
Sintomas
HBsAg
anti-Hbc
Anti-Hbe
Anti-Hbe
HBeAg
IgM anti-HBc
Tempo
Hepatite C
Hepatite C
 Foi identificado em 1989 quando era responsável pelos
casos nos pacientes transfundidos. Atualmente são raras
as transmissão pelo sangue devido o uso de testes
moleculares.
Hoje são transmitidos através de procedimentos
realizados com instrumentos que perfuram a pele e que
são reutilizados sem a devida esterilização. Também por
sringas compartilhadas.
 Evolução para doença crônica é comum, podendo se
manifestar sob a forma de cirrose hepática e evoluir para
cancer hepático.
 Testes: Quimiol./ testes de ácidos nucléicos
Hepatite C –Epidemiologia:
• Distribuição mundial, com incidências variáveis.
• Estima-se que haja mais de 170 milhões de portadores do HCV
no mundo, e cerca de 6 milhões no Brasil.
• Transmissão principalmente através de sangue (transfusões,
agulhas contaminadas). Transmissão sexual pouco freqüente, e
de risco difícil de calcular.
• Transmissão perinatal pouco freqüente.
• Presente no leite materno (transmissão não confirmada).
• Era a principal causa de hepatite pós-transfusional (até 1991).
História natural da HVC
Infecção
Hepatite
aguda
20%
80%
Hepatite
crônica
Resolução
80%
20%
Estável
Cirrose
~20%
Descompensada
~75%
1-4% ao ano
Lentamente
progressiva
0
Tempo (anos)
Carcinoma
Hepatocelular
20-30
HTLV
 Foi descrito em 1980 e age diretamente sobre os
linfócitos podendo causar leucemia e uma doença que
compromete o movimento das pernas chamada de
paraparesia espástica.
 Outros meios de contaminação são o compartilhamento
de seringas contaminadas, contato sexual sem
preservativos.
 Não existe cura, mas alguns medicamentos podem
reduzir os efeitos.
 Testes: Quimiol./ Western Blot
AIDS
HIV
 O vírus destroi as células do sistema imunológico,
especialmente linfócitos e macrófagos. Assim outros
microorganismos podem ataca-lo causando doenças que
os indivíduos não infectados pelo hiv não se desenvolve
devido a ação do sistema de defesa.
 Testes: Quimiol./ Western Blot
 Testes de ácidos nucléicos
A tecnologia de amplifi cação de ácidos nucléicos (NAT) é
constituída de testes in vitro qualitativos para detecção direta do
RNA e DNA de agentes infecciosos.
São constituídos
basicamente por três etapas: preparação da amostra de sangue,
incluindo a extração do ácido nucléico viral e sua purifi cação ou
captura; amplifi cação do RNA ou do DNA complementar
(cDNA) alvo e detecção do produto amplifi cado.
Características do diagnóstico das
doenças transmitidas pelo sangue
 Quando não tratada, normalmente evoluem para fase
crônica, salvo hepatite B.
 São em sua maioria de origem viral e por isso seu
isolamento é caro e difícil de se adaptar em grandes rotinas
laboratoriais.
Testes sorologicos e moleculares são APROPRIADOS.
Descrição Geral das Provas
de Confirmação
Western Blot – Principio do ensaio


Uma tira teste é incubada com uma diluição de amostra e controle .
Depois de uma lavagem, incuba-se a tira com anti-globulina
humana (marcada).Até aquí, é similar as técnicas imunoenzimáticas
tradicionais.
Padrões de controles e amostra para pesquisa de antiHIV pelo método de Western Blot
Metodologia traz novos regras:
Sorocnversão
Janela imune
Zona cinza
Reprodutibilidade
Especificidade
Sensibilidade
Marcadores do HIV no Sangue durante
infecção/Janela Imunológica do HIV
•
•
•
•
Infectividade Teórica : dia zero
Detecção de HIV RNA : dia 11
Detecção de HIV Ag p24 : dia 16
Detecção de Anticorpo HIV :
– Lisado / Rec / IgG = 40 dias
– Anti-HIV1/2 = 32 dias
– Detecção de IgM e IgA = dia 22
RESPOSTA IMUNE AO AGENTE
INFECCIOSO
Imunidade inata
Imunidade
0 a 4 horasinata
0 a 4 horas
Imunidade inata
4Imunidade
a 96 horasinata
4 a 96 horas
Imunidade
Imunidade
adaptativa
(>adaptativa
96 h)
(> 96 h)
Infecção
Infecção
Infecção
Infecção
Interação com
Interação
fatores com
fatores
inespecíficos
inespecíficos
Reconhecimento
Reconhecimento
dos PAMP
dos PAMP
Transporte Ag
Transporte
Infecção
para os Ag
Infecção
para os
linfonodos
linfonodos
Remoção do
Remoção
agente do
agente
infeccioso
infeccioso
Ativação dos
Ativação dos
fagócitos
fagócitos
Ativação dos
Ativaçãoem
dos
linfócitos
linfócitos
repouso em
repouso
Remoção do
Remoção
agente do
agente
infeccioso
infeccioso
Proliferação e
Proliferação e
diferenciação
diferenciação
Remoção do
Remoção
agente do
agente
infeccioso
infeccioso
SENSIBILIDADE E ESPECIFICIDADE
Doença
Teste
presente
ausente
+
VP
FP
-
FN
VN
VP + FN
VN + FP
VP: TEM DOENÇA E O TESTE É POSITIVO
FN: TEM DOENÇA E O TESTE É NEGATIVO
FP: NÃO TEM DOENÇA, MAS O TESTE É POSITIVO
VN: NÃO TEM DOENÇA E O TESTE É NEGATIVO
Considerações finais
 Doenças transmitidas pelo sangue estão entre as
mais frequentes em nosso meio e podem ser
transmitidas por outras formas.

Doadores de
sangue
com resultados
positivos/inclonclusivos são encaminhados aos
serrviços para tratamento a fim de diminuir as
chances de evolução para fase crônicas e oferecer
melhor qualidade de vida aos pacientes.
 Apesar dos esforços em diminuir a janela
imunológica com a utilização de testes mais
sensíveis para diagnóstico da doença, a conclusão
final exige dos casos exigem profissionais
capacitados para execução dessa tarefa.
Investir em conhecimento rende sempre melhores
juros.”
Benjamin Franklin
Obrigado...