Sumário da aula prática B1

MICROBIOLOGIA / MEDICINA
2004 / 2005
Sumário das aulas práticas nºs B18 e B19
BACILOS GRAM NEGATIVO
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Conhecer características gerais da família Enterobacteriaceae.
Conhecer provas laboratoriais características da família Enterobacteriaceae.
Executar sementeiras de bacilos Gram negativo em meios de cultura selectivos e
diferenciais (CLED, MacConkey, Levine e SS agar).
Executar provas bioquímicas: fermentação da glicose, redução dos nitratos e prova das
oxídases.
Conhecer características gerais dos géneros mais importantes da família
Enterobacteriaceae.
Conhecer provas laboratoriais para diferenciação de géneros e espécies desta família.
Observar e analisar as sementeiras de bacilos Gram negativo em meios de cultura selectivos
e diferenciais.
Analisar as provas bioquímicas: fermentação da glicose, redução dos nitratos e prova das
oxídases.
Executar algumas provas bioquímicas: sementeira em meio de Kligler, meio de ureia, meio
de água peptonada com triptofano, meio de Simmons, meios para executar a prova MR/VP,
e meios para a descarboxilação da lisina e desaminação da fenilalanina.
Analisar as provas bioquímicas executadas.
Identificar a bactéria estudada através da utilização de tabelas de provas bioquímicas.
Aprender a usar tabelas de provas bioquímicas para Enterobacteriaceae e outros bacilos
Gram negativo.
TEXTO DE APOIO:
Consultar o Texto de Apoio das aulas práticas B11 (pág. 29 a 39)
MÉTODOS LABORATORIAIS PARA O ESTUDO DE BACILOS GRAM-NEGATIVO
A importância da família Enterobacteriaceae
Características para a inclusão de uma bactéria nesta família
Espectro das infecções
Géneros mais importantes
Colheita da amostra e sua manipulação
Especificidades de acordo com o produto biológico colhido
Isolamento e identificação
Exame directo - exame a fresco e exame com coloração
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MICROBIOLOGIA / MEDICINA
2004 / 2005
Exame cultural - selecção de meios de cultura a utilizar (meios selectivos e outros)
- importância do produto biológico colhido e da suspeita clínica
Provas bioquímicas “clássicas” e sistemas miniaturizados comerciais (ver abaixo)
Métodos serológicos - estirpes patogénicas específicas (ex: Escherichia coli
O157:H7, Escherichia coli K1, ...), objectivos epidemiológicos e suas limitações
(reacções cruzadas com bactérias da mesma família e outros microrganismos)
Provas de sensibilidade aos antimicrobianos - sua importância
BACILOS GRAM NEGATIVO – uso de sistemas miniaturizados
Sistemas miniaturizados para identificação de bactérias da família Enterobacteriaceae
A identificação dos microrganismos existentes num produto biológico faz-se pela
observação microscópica da sua morfologia, tipo de associação, comportamento a diversas
técnicas de coloração, características de crescimento em vários meios de cultura e estudo de
actividades enzimáticas e bioquímicas.
A observação das diversas características culturais exige um considerável número de
meios de cultura, tubos, placas de petri, e muito trabalho do Técnico.
Com a finalidade de reduzir gastos e tempo, foram desenvolvidos vários sistemas
miniaturizados produzidos por laboratórios comerciais que permitem a identificação rápida de
microrganismos.
Alguns destes sistemas usam códigos, de modo a poderem ser computadorizados.
Dois daqueles sistemas:
Enterotubo II
API 20 E
foram já apresentados e qualquer deles é destinado à identificação de vários microrganismos,
entre os quais os bacilos Gram negativo pertencentes à família das Enterobactereaceae
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