universidade federal rural do rio de janeiro pró-reitoria de

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO
PRÓ-REITORIA DE PESQUISA E PÓS GRADUAÇÃO
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM
CIÊNCIA TECNOLOGIA E INOVAÇÃO AGROPECUÁRIA
PROGRAMA ANALÍTICO
DISCIPLINA:
NOME: DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
CÓDIGO: IV-1228
CRÉDITOS/CARGA HORÁRIA: 3 cr, 45 h
PROF. RESPONSÁVEL: Miliane Moreira Soares de Souza, Carlos Mazur, Carlos Alberto da
Rocha Rosa
OBJETIVOS:
Proporcionar informações atualizadas ao pós-graduando que colaborem para sua formação
profissional no desenvolvimento de rotinas de diagnóstico para os principais grupos de
microorganismos de importância em Medicina Veterinária.
EMENTA:
Amostras clínicas e seu processamento. Indicações, obtenção, transporte e conservação.
Diagnóstico direto. Isolamento, seleção de meios, semeadura, identificação bioquímica e antigênica.
Visualização de microorganismos. Critérios de patogenicidade.
PROGRAMA ANALÍTICO:
Parte I: Introdução
1. Relação entre a Microbiologia e as outras Ciências. Conceito de Microbiologia Celular:
antecedentes, estado atual e perspectivas
2. Natureza das associações simbióticas. Microbiota normal. Comensalismo. Mutualismo.
Colonialismo. Oportunismo. Parasitismo: etapas da patogênese.
3. Adesão dos patógenos às células hospedeiras. Estruturas do hospedeiro e dos microorganismos
implicados na adesão. Conseqüências da adesão sobre os microorganismos e as células hospedeiras.
4. Invasão da célula hospedeira por microrganismos. Mecanismos de invasão
microbiana:bacteriana, micótica e viral: manipulação do cito-esqueleto da célula hospedeira. Rotas
de invasão. Seleção de um nicho intracelular. Conseqüências da invasão. Infecção.
5. Interferência dos patógenos microbianos com o ciclo e a morte celular do hospedeiro. Controle
do ciclo celular: inibição e indução da proliferação. Controle da apoptose: Inibição e indução da
morte celular.
Parte II: Laboratório de Microbiologia:
1. Biossegurança. O Laboratório de Microbiologia. Desinfecção. Esterilização
2. Amostras. Coleta, transporte e conservação. Amostras para cultivo de microrganismos aeróbios
ou anaeróbios. Amostras para diagnóstico virológico. Envio de amostras ao laboratório.
Manipulação de amostras no laboratório de Microbiologia.
3. Visualização e cultivo de microrganismos. Microscopia. Métodos de coloração. Métodos de
cultivo. Meios de cultivo. Meios de cultivo para diversos fins. Princípios fisiológicos e nutricionais.
Inoculação de meios de cultivo primário
Parte III: Diagnóstico
1) Bacteriología básica
a) Gênero Staphylococcus spp: Isolamento em Ágar sangue, Ágar manitol vermelho de fenol, Ágar
Baird Parker e Ágar Vogel Johnson; Identificação presuntiva : Coloração de Gram, teste do
hidróxido de potássio a 30% e prova da catalase. Identificação específica: prova de coagulase (livre
e ligada), VP, fermentação de áçucares, redução de nitratos, produção de urease, produção de
Dnase.
b) Gênero Streptococcus spp: Isolamento e determinação do tipo hemolítico em agar sangue.
Identificação presuntiva : Coloração de Gram, teste do hidróxido de potássio a 30% e prova da
catalase. Isolamento em meios de cultura com azida sódica e cristal violeta.Diferenciação entre as
espécies: hidrólise do hipurato, hidrólise da esculina, fermentação de lactose sorbitol, trealose,
salicina e inulina, redução do leite mais azul de metileno.
c) Gênero Bacillus spp. : Isolamento em Ágar sangue e Ágar Infusão de Cérebro e coração (BHI);
Identificação presuntiva : Coloração de Gram, teste do hidróxido de potássio a 30% e prova da
catalase. Diferenciação entre as espécies: teste de motilidade (meio de SIM, meio de Edwards),
fusão e tipo de crescimento em gelatina, ação das bactérias sobre o leite, redução do nitrato,
fermentação de açúcares.
d) Gênero Clostridium: Isolamento em agar base Columbia + sangue em anaerobiose.
Identificação: API (anaeróbios).
e) Enterobactérias: Isolamento em meios de seletivos e diferenciais : MacConkey, EMB,
Salmonella-Shigella, Endo C.Identificação presuntiva : Coloração de Gram, teste do hidróxido de
potássio a 30% e prova da catalase. Identificaçãobioquímica: Comportamento em ágar tríplice
açúcar-ferro (TSI), motilidade em tubo, produção do Indol, fermentação de açúcares, redução do
nitrato, produção de gelatinase, produção de urease, degradação do citrato e do malonato
2) Micologia
a) Micoses superficiais:
- Infecções cutâneas Gêneros: Microsporum, Trichophyton, Scopulariopsis, Malassezia,
Trichosporum - Micoses subcutâneas: Gêneros: Sporothrix Alternaria, Cladosporium, Curvularia
b) Micoses oportunistas:
- Leveduras - Gêneros: Candida, Cryptococcus. Prototheca
- Filamentosos - Gêneros: Aspergillus, Pythium, Penicillium,
c) Micoses sistêmicas:
Gêneros: Histoplasma, Blastomyces, Coccidioides, Paracoccidioides
d) Micotoxicoses
3) Virologia
a) Introdução à Virologia: histórico, composição morfo-estrutural e funcional do vírus.
b) Ciclo de replicação viral: permissividade celular, especificidade vírus-célula, etapas de
replicação viral.
c) Genética viral: noções básicas em biologia molecular, variação antigênica, mutação evolução dos
vírus.
d) Cultivo de vírus: sistema hospedeiros, noções teóricas em cultura de células.
e) Patogênese nas infecções virais: Fatores e mecanismos de patogenicidade viral, tipos interação
vírus-celulas.
f) Imunidade nas infecções virais: resposta humoral e celular nas infecções virais e seus
mecanismos de ação.
g) Diagnóstico das infecções virais: métodos de diagnóstico virológico.
h) Isolamento viral, imunofluorescência, imunoensaio enzimático, hibridização molecular e PCR
(amplificação enzimática de ácidos nucléicos)
BIBLIOGRAFIA:
BERGEY. S. Manual of determinative bacteriology. 9 a ed. Ed. John G. Holt. Williams and
Wilkins Co., USA, 1994.
CARTER, G.R.; COLE, J.R. Diagnostic procedures in veterinary bacteriology and micology. 5a ed.
Academic Press, 1990. 620p. ISBN 9780121617752
FERREIRA, A .W.; ÁVILA, S. L. M. Diagnóstico laboratorial das principais doenças infecciosas e
Auto-Imunes. Ed. Guanabara Koogan, 2001. 443p.
JAWETZ, E.; MELNICK, J. L.; ADELBERG, E. A. Microbiologia médica. 25a ed., Ed. McGraw
Hill Brasil, 2010. ISBN
8580550718
KONEMAN, E. W.; ALLEN, S. D. ; JANDA, W. M. ; SCHRECKENBERGER, P. C. ; WINN,
W.C. Diagnóstico microbiológico: Texto e Atlas Colorido. 6a ed., Ed. Guanabara Koogan, 2008.
1760p.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Brock biology of microorganisms. 9a d.,
Editora Prentice-Hall, 2000.
RIPPON, J. W. Medical Mycology - The pathogenic fungi and he pathogenic Actinomycetes. 3rd
Edition - W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1988.