Curso: FARMÁCIA Apostila de práticas de: DISCIPLINA
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Curso: FARMÁCIA Apostila de práticas de: DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA CLÍNICA Curso: FARMÁCIA Instituto de Ciências da Saúde AULA Disciplina: MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA CLÍNICA 1 Titulo da Aula: Semeadura bacteriana OBJETIVO: O procedimento de semeadura bacteriana é importante para a execução da maior parte dos exames microbiológicos. A aula também deve abordar a questão da seletividade dos meios de cultura. PROCEDIMENTO: Semeadura por esgotamento 1) Flambar a alça bacteriológica 2) Recolher de uma placa pré-cultivada uma colônia de bacteriana. 3) Semear por esgotamento em placa de ágar chocolate, sangue e MacConkey. 4) Encubar por 48horas. 5) Verificar o crescimento e isolamento das colônias. MATERIAIS Solução salina Placa com S. aureus pré isolados para a aula Placa ágar sangue Placa ágar Chocolate Placa ágar Mac Conkey EQUIPAMENTOS QUANTIDADE 10 ml(por grupo) 01 por grupo 1 por grupo 1 por grupo 1 por grupo Alças bacteriológicas QUANTIDADE 01 por grupo Estufa 01 Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos. Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança Curso: FARMÁCIA AULA Disciplina: Microbiologia e Micologia Clínicas Instituto de Ciências da Saúde Titulo da Aula: Coloração de Gram e revisão de morfologia bacteriana 2 OBJETIVO: A avaliação da morfologia microbiana é muito importante para a execução da maior parte dos exames microbiológicos. A coloração de Gram também deve ser revisada dada sua grande importância no diagnóstico clínico das amostras microbiológicas. TÉCNICA COLORAÇÃO DE GRAM 1) Em uma lâmina pingar uma gota de solução salina estéril. 2) Recolher uma colônia pré-cultivada com alça bacteriológica. 3)Colocar a colônia selecionada junto à lâmina e homogenizar. 4) Fixar o esfregaço no calor. 5)Cobrir o esfregaço com cristal de violeta por 1 minuto. 6) Lavar o esfregaço ccom água corrente removendo o excesso de corante. 7) Cobrir o esfregaço com lugol por 1 minuto 8) Repetir passo 6. 9) Descorar com álcool acetona até remover o excesso de corrante. 10)Repetir passo 6 11) Cobrir o esfregaço com safranina por 30 segundos. 12) Lavar e secar 13) Examinar ao microscópio (1000x) MATERIAIS Solução salina Corantes para a coloração de Gram Cristal de Violeta, Lugol, Álcool –Acetona e Safranina Placas pré cultivadas com S. aureus Placas pré cultivadas com E.coli Óleo de imersão QUANTIDADE 10 ml(por grupo) 01 por grupo 01 por grupo 01 por grupo 01 por grupo 01 por grupo EQUIPAMENTOS Lâminas Microscópios Alças bacteriológicas Estufa 37°C QUANTIDADE 05 por grupo 01 por grupo 01 por grupo 01 Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos. Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança: Curso: FARMÁCIA AULA Disciplina: Microbiologia e Micologia Clínicas Instituto de Ciências da Saúde Titulo da Aula:Diagnóstico dos cocos Gram + 3 Os cocos gram positivos são um importante grupo de bactérias causadoras de patologias nos seres humanos. A identificação das principais bactérias deste grupo é de vital importância em laboratórios clínicos. Procedimento Verificação da morfologia das bactérias (lâminas pré preparadas) Prova da catalase 1)Em uma lâmina pingar uma gota de água oxigenada. 2)Remover um colônia pré semeada e adicionar à lâmina. 3)Homogeneizar e verificar a formação de bolhas(Staphylococcus sp) ou não(Streptococcus sp). Verificação de hemólise em ágar sangue 1) Em placas pré semeadas com Estreptococos, sollicitar ao aluno que verifique o tipo de hemólise (halo esverdeado , incolor e sem hemólise ) MATERIAIS Água oxigenada Alças bacteriológicas Lâminas Placas de Ágar sangue Placas pré- semeadas com Staphylococcus e Streptococcus EQUIPAMENTOS Microscópio QUANTIDADE 100 ml 01 por grupo 05 por grupo 01 por grupo 01 por grupo QUANTIDADE 01 por grupo Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos. Curso: FARMÁCIA AULA Disciplina: Microbiologia e Micologia Clínicas Instituto de Ciências da Saúde Titulo da Aula:Antibiograma 4 Procedimento O antibiograma se constitui da principal prova microbiológica. Esta prova direciona o tratamento antimicrobiano das infecções. Procedimento: 1) Semear bactérias (por espalhamento) em Ágar Müller Hinton 2) Colocar com pinça os discos de antibiograma sobre o meio 3) Encubar por 48 horas. 4) Verificar o crescimento ou não de bactérias. 5)Medir o diâmetro dos halos de inibição em cada disco. Se igual ou superior a 2 centímetros(considerar sensível) . MATERIAIS QUANTIDADE 1 por grupo 1 por grupo 1 por grupo EQUIPAMENTOS QUANTIDADE 01 Ágar Müller Hinton Discos de Antibiograma Alça de Drigalski Estufa 37°C Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos. Curso: FARMÁCIA AULA Disciplina: Microbiologia e Micologia Clínicas Instituto de Ciências da Saúde Titulo da Aula:Provas Bioquímicas 5 Procedimento As provas bioquímicas são essenciais para o diagnóstico e identificação das bactérias patológicas. A interpretação dos resultados desta provas bioquímicas, permite ao profissional identificar o microrganismos. Procedimento: Prova TSI Esta prova avalia em um só tubo a utilização de glicose e lactose pelas bactérias, esta prova também verifica a formação de h2S pelas bactérias. 1) Semear bactérias (bacilos gram negativos previamente semeador)por picada e por estrias na superfície do meio TSI. 2) Encubar por 24 horas. 3) Verificar os resultados no cilindro do tubo e na superfície do tubo Cilindro ácido (amarelo) e rampa alcalina (vermelha) Fermentação apenas da glicose Cilindro ácido (amarelo) e rampa ácida (amarela) Fermentação da lactose e glicose. Produção de gás observa-se se o houve fratura no meio. Verificação do uso da lactose 1)Semear bacilos gram negativos em ágar Mac Conkey 2) Verificar a formação de colônias Pink (lactose positivas) 3) Encubar a 37°C por 48horas. MATERIAIS Ágar TSI Ágar MacConkey Alças bacteriológicas Bacilos gram negativos pré cultivados QUANTIDADE 1 por grupo 1 por grupo 1 por grupo 1 por grupo EQUIPAMENTOS Estufa 37°C QUANTIDADE 01 Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos.
