Aula prática de Bioquímica Geral e Bucal Profa. Alessandra Barone Titulação da saliva em ácido lático para verificação da capacidade de tamponamento salivar. Ácido lático Fórmula molecular C3H6O3 Massa molar 90.08 g/mol Acidez (pKa) 3.85 A capacidade tampão da saliva (CTS) é a propriedade de a saliva manter o seu pH constante a 6,9-7,0 graças a seus tampões mucinato/mucina, bicarbonato/ácido carbônico, fosfato monoácido e fosfato diácido. Proposta da aula prática: Avaliar a capacidade de tamponamento salivar através da titulação da saliva com ácido lático 0,1 N , necessário para baixar o pH salivar de 6,9 para 3,7,ponto de viragem do ácido lático. Essa viragem de pH será visualizada através do indicador de pH alaranjado de metila, amarelo-laranja em ph 6,9 e rosa em ph 3,7 Material utilizado: Suporte para bureta Presilhas Bureta Erlenmeyer 25 mL graduado Béquer 50 mL Pipeta volumétrica Caneta pipetadora Solução de ácido lático 0,1 N Saliva Alaranjado de metila Gase Peneira Conta gotas Procedimento: 1. Recolher aproximadamente 15ml de saliva em um béquer. 2. Transferir 10 Ml de saliva coada para o erlenmeyer 3. Adiciona duas gotas de alaranjado de metila. 4. Inserir 50 mL de ácido lático 0,1 N na bureta. 5. Acertar a bureta verificando a posição do menisco e retirando o excesso de bolhas que possam estar acumuladas . 6. Adicionar no erlenmeyer, gota a gota, a solução de ácido lático contida na bureta, sempre misturando as soluções. 7. Verificar o momento de viragem do alaranjado de metila, anotando a quantidade de ácido lático gasto. 8. Calcular a concentração de tampão salivar. 9. Calcular o índice de suscetibilidade à cárie dental. Obs: O ácido lático foi obtido de uma concentração original de 1M, ou seja , 90,08 g em 1L de água. Para obter-se uma solução 0,1M: 90,08g/L --------------1M X --------------------- 0,1M 9,0 g /L Conversão de normalidade para molaridade N= M.X onde x é o número de H ionizáveis. 0,1 = M.1 M= 0,1 Cálculos: Concentração do tampão: Ca.Va = Cb.Vb Suscetibilidade à cárie dental: Multiplica-se por 10 o volume de ácido láctico gasto. Resultado: Pacientes medianamente suscetíveis à cárie dental: CTS = 40 Pacientes resistentes à cárie dental : CTS > 40 Pacientes muito suscetíveis à cárie dental : CTS < 40 Referências bibliográficas: ARANHA, Flávio Leite, Bioquímica odontológica, 3.ed-São Paulo: Sanvier, 2009) SOUZA, VT. Bioquímica clinica, 4 ed., Porto Alegre: Editora Médica Missau, 2003 PARADA, Carlos. Bioquímica Básica, 8 ed., São Paulo: Editora MNP, 2008