padrão de bilirrubina

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Laboratório
PADRÃO DE BILIRRUBINA
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POPBIO xxx/xx
PADRÃO DE BILIRRUBINA
FINALIDADE
Reagente para padronização da dosagem de Bilirrubina. Somente para uso diagnóstico in vitro.
PRINCÍPIO
A bilirrubina é dosada por diazotização e formação de azobilirrubina vermelha com absorção máxima em
525 nm. A bilirrubina direta (diglicurônide) é dosada em meio aquoso, enquanto que a total (direta e
indireta) é dosada por ação de potente solubilizador de ação catalisadora.
PRODUTO UTILIZADO
Padrão de Bilirrubina, Catálogo 32
Labtest Diagnóstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000
ANVISA - 10009010010
Padrão: Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Contém 0,3 mg de bilirrubina.
Diluente (1 ampola): Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Contém dimetil sulfóxido.
Preparo do Padrão:
Transferir o conteúdo da ampola (Diluente) para um frasco limpo e seco, tomar 3,0 mL, adicionar ao
frasco do Padrão (nº 1) e misturar. Deixar em repouso durante 5 minutos e agitar novamente. O padrão,
protegido da luz, é estável por 12 horas entre 15 - 25 ºC e 1 mês a 20 ºC negativos (deve ser congelado
e descongelado uma só vez). A concentração do padrão é igual a 10 mg/dL.
Precauções e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação do reagente. Fazer
referência ao manual ou POP de segurança.
2. Os reagentes não abertos, quando armazenados nas condições indicadas são estáveis até a
data de expiração impressa no rótulo. Durante o manuseio, os reagentes estão sujeitos à
contaminação de natureza química e microbiana que podem provocar redução da
estabilidade. O laboratório deve estabelecer a estabilidade em suas condições operacionais.
3. A bilirrubina é muito sensível à luz direta ou indireta. Manter o frasco ao abrigo da luz durante
a preparação do padrão.
EQUIPAMENTOS
1. Fotômetro capaz de medir com exatidão a absorbância em 525 nm ou filtro verde (500 a 540 nm).
2. Pipetas para medir amostras e reagentes.
3. Cronômetro.
Procedimento alternativo
Indicar o método alternativo e os procedimentos para medição dos ensaios, indicando as diferenças
esperadas.
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, número de catálogo),
instruções de preparo e frequência da utilização dos mesmos.
Limites de tolerância
Descrever o procedimento para definição dos limites de tolerância, o sistema adotado para utilização do
mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providências a serem tomadas diante de valores
que ultrapassem tais limites. Fazer referência ao manual ou POP para utilização dos materiais de
controle.
Verificação de novo lote de controles e/ou reagentes
Descrever o procedimento de verificação de novos lotes de controles e de reagentes.
Gerenciamento dos dados
Definir como os dados relativos ao controle da qualidade são arquivados e gerenciados.
Fazer referência ao manual ou POP de garantia da qualidade.
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PROCEDIMENTOS
Utilizar com o sistema Bilirrubina - Labtest (Cat. 31)
Preparo do Diazo Reagente: Adicionar 0,010 mL de Nitrito de Sódio (nº 3) a 0,3 mL do Ácido Sulfanílico
(nº 2). Misturar e usar no dia da preparação.
Dosar o padrão em triplicata. É muito importante que as absorbâncias não variem, entre si, mais que
2%, para que a média das mesmas possa ser utilizada no cálculo do fator de calibração.
Branco
Padrão
Acelerador (nº 1)
1,0 mL
1,0 mL
Ácido Sulfanílico (nº 2)
0,1 mL
----Diazo Reagente
----0,1 mL
Padrão
0,05 mL
0,05 mL
Misturar e esperar 5 minutos. Determinar as absorbâncias dos padrões em 525 nm ou filtro verde (500 a
540), acertando o zero com o branco.
PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS
1. Para manusear e descartar reagentes, aplicar as normas estabelecidas de segurança. Fazer
referência ao manual ou POP de segurança.
2. A limpeza e secagem adequadas do material são fatores fundamentais para a estabilidade
dos reagentes e obtenção de resultados corretos. Fazer referência ao manual ou POP de
limpeza e verificação da qualidade da limpeza dos materiais.
3. A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para
preparar reagentes e usar nas medições, deve ter resistividade 1 megaohm ou
condutividade 1 microsiemens e concentração de silicatos 0,1 mg/L (água tipo II). Para o
enxágüe da vidraria a água pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou
condutividade 10 microsiemens. No enxágüe final utilizar água tipo II. Quando a coluna
deionizadora está com sua capacidade saturada ocorre a produção de água alcalina com
liberação de vários íons, silicatos e substâncias com grande poder de oxidação ou redução
que deterioram os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de
modo imprevisível. Assim, é fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade
da água. Fazer referência ao manual ou POP de água reagente.
CÁLCULOS
Fator de Calibração = 10 / Absorbância do padrão (média)
Bilirrubina (mg/dL) = Absorbância do teste x Fator
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Recommendations on a Uniform Bilirubin Standard. Clin Chem 1962;8:405.
2. Inmetro – Boas Práticas de Laboratório Clínico e Listas de Verificação para Avaliação, Qualitymark
ed., Rio de Janeiro, 1997.
3. Doumas BT, Perry BW, Sasse EA, Straumfjord Jr JV. Clin Chem 1973;19:984.
4. Padrão de Bilirrubina, Instruções de Uso, Labtest Diagnóstica.
Nome
Assinatura
Elaborado por:
Aprovado por:
Implantado por:
Substitui POP:
Revisado por:
Revisado por:
Revisado por:
Desativado por:
Razão:
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Número
Cópias
Data
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Destino