padrão de hemoglobina

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Laboratório
PADRÃO DE HEMOGLOBINA
POPBIO xxx/xx
PADRÃO DE HEMOGLOBINA
FINALIDADE
Reagente para padronização da dosagem de Hemoglobina. Somente para uso diagnóstico in vitro.
PRINCÍPIO
O Fe (II) do heme da hemoglobina, oxihemoglobina e carboxihemoglobina é oxidado para o estado
férrico pelo ferricianeto, formando hemiglobina (Hi), que se combina com o cianeto ionizado para
produzir cianeto de hemiglobina (HiCN), que é medido em 540 nm.
PRODUTO UTILIZADO
Padrão de Hemoglobina, Catálogo 47
Labtest Diagnóstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000
ANVISA - 10009010028
Padrão - HiCN 10 g/dL: Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Contém cianeto de potássio 500 mg/dL.
Precauções e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação do reagente. Fazer
referência ao manual ou POP de segurança.
2. Os reagentes não abertos, quando armazenados nas condições indicadas são estáveis até a
data de expiração impressa no rótulo. Durante o manuseio, os reagentes estão sujeitos à
contaminação de natureza química e microbiana que podem provocar redução da
estabilidade. O laboratório deve estabelecer a estabilidade em suas condições operacionais.
3. O reagente contém derivados de sangue humano e se mostrou negativo para HIV e HBsAg,
quando examinado por EIE. Entretanto nenhum teste conhecido, pode assegurar que
produtos derivados de sangue humano não transmitam doença. Recomenda-se portanto,
manuseá-lo como sendo potencialmente infectante. O reagente foi incubado a 56º C durante 4
horas.
EQUIPAMENTOS
1. Fotômetro capaz de medir com exatidão a absorbância em 540 nm ou filtro verde (520 a 550 nm).
2. Pipetas para medir amostras e reagentes.
3. Cronômetro.
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, número de catálogo),
instruções de preparo e frequência da utilização dos mesmos.
Limites de tolerância
Descrever o procedimento para definição dos limites de tolerância, o sistema adotado para utilização do
mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providências a serem tomadas diante de valores
que ultrapassem tais limites. Fazer referência ao manual ou POP para utilização dos materiais de
controle.
Verificação de novo lote de controles e/ou reagentes
Descrever o procedimento de verificação de novos lotes de controles e de reagentes.
Gerenciamento dos dados
Definir como os dados relativos ao controle da qualidade são arquivados e gerenciados.
Fazer referência ao manual ou POP de garantia da qualidade.
PROCEDIMENTOS
Utilizar com o sistema Hemoglobina - Labtest Cat. 43.
Dosar o padrão em triplicata. É muito importante que as absorbâncias não variem, entre si, mais que 2%
para que a média das mesmas possa ser utilizada no cálculo do fator de calibração .
Reagente de Cor de Uso
Padrão
Padrão
5,0 mL
0,02 mL
Misturar e esperar 5 minutos e determinar as absorbâncias dos padrões em 540 nm ou filtro verde (520
a 550), acertando o zero com água destilada. A cor é estável várias horas.
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PADRÃO DE HEMOGLOBINA
POPBIO xxx/xx
Precauções e cuidados especiais
1. Para manusear e descartar reagentes, aplicar as normas estabelecidas de segurança. Fazer
referência ao manual ou POP de segurança.
2. A limpeza e secagem adequadas do material são fatores fundamentais para a estabilidade
dos reagentes e obtenção de resultados corretos. Fazer referência ao manual ou POP de
limpeza e verificação da qualidade da limpeza dos materiais.
3. A água utilizada no laboratório deve ter a qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para
preparar reagentes e usar nas medições, deve ter resistividade 1 megaohm ou
condutividade 1 microsiemens e concentração de silicatos 0,1 mg/L (água tipo II). Para o
enxágüe da vidraria a água pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou
condutividade 10 microsiemens. No enxágüe final utilizar água tipo II. Quando a coluna
deionizadora está com sua capacidade saturada ocorre a produção de água alcalina com
liberação de vários íons, silicatos e substâncias com grande poder de oxidação ou redução
que deterioram os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de
modo imprevisível. Assim, é fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade
da água. Fazer referência ao manual ou POP de água reagente.
4. Não desprezar o reagente de cor estoque, de uso ou o utilizado na dosagem em pias e
recipientes que contenham resíduos de ácido sulfúrico.
CÁLCULOS
10
Fator de Calibração =
Fator de
Absorbância do padrão (média)
Hemoglobina (g/dL) = Absorbância do teste x Fator
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Drabkin, D.L., Austin, J.H.: J. Biol Chem. 112:51, 1935.
2. Henry, R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W.: Clinical Chemistry, Principles and Technics, 2nd ed.
New York, Harper & Row, 1974.
3. Inmetro – Boas Práticas de Laboratório Clínico e Listas de Verificação para Avaliação, Qualitymark
ed., Rio de Janeiro, 1997.
4. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-501.
5. Reference Procedure for the Quantitative Determination of Hemoglobin in Blood: NCCLS vol. 4 Nº 3 .
6. International Committee for Stardardization in Hematology: J. Clin. Path. 31:139, 1978.
7. Padrão de Hemoglobina, Instruções de Uso, Labtest Diagnóstica.
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Assinatura
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Razão:
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Número
Cópias
Data
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Destino