Giuliana Piovesan Alves - IPD
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PD&I PESQUISA, DESENVOLVIMENTO E INOVAÇÃO LIPOSSOMAS: PASSADO, PRESENTE E FUTURO ENCAPSULAÇÃO ATIVOS Uso Ativos Livres Área Normal Possíveis Vantagens do Uso de Ativos em Veículos Área Alvo Acesso, Afinidade Efeito: toxicidade? Área Normal Não Acesso, Não Afinidade Efeito Limitado Transporte Facilitado Efeito Ativo Livre Ativo em Veículo Inativação ?? Ambiente Área Alvo Efeito Limitado Ambiente LIPOSSOMAS Histórico Foram descritos na década de 60 por Alec Bangham: “Esférulas de Fosfolipídios” Termo Lipossomas introduzido por Sessa e Weissman – final década 60 Foram usados inicialmente em pesquisa básica: como modelo de membrana celular (mimetização celular) São aplicados em diversas áreas: cosmética, alimentícia, farmacêutica e médica. LIPOSSOMAS Cabeça Polar Hidrofílica Zwitteriônico (dipolar) Molécula Anfifílica Cauda Apolar Hidrofóbica Ácido graxo saturado Ácido graxo insaturado LIPOSSOMAS Moléculas Anfifílicas formam Estruturas Supramoleculares em Água bicamada plana membrana (lamela) Fosfolipídios livres em água Vesícula Multilamelar Vesícula Esférica Unilamelar LIPOSSOMAS O que são lipossomas? Anfifílicas Hidrofílicas Hidrofóbicas LIPOSSOMAS INTERAÇÃO COM CÉLULAS Adsorção Endocitose Fusão Troca Lipídica LIPOSSOMAS Método de Bangham : Hidratação do Filme Seco de Lipídios 1. Evaporação do solvente 2. Formação do filme lipídico seco 3. Hidratação do filme - MLV 4. Uniformização de tamanhos SUV LIPOSSOMAS Tipos MLV, OLV Multi ou Oligolamelar LUV / SUV Unilamelar Grande / Pequeno Transição Fase Temperatura Baixa ORDEM Temperatura Alta DESORDEM MVV Multivesicular LIPOSSOMAS Encapsulação Proteção, Solubilização - 1ª geração Alvo Específico - 2ª geração Anfifílico Hidrofílico Hidrofóbico LIPOSSOMAS Direcionamento do Ativo Inativo: lipossomas convencionais agrupam-se aos tecidos específicos do sistema reticuloendotelial Ativo: alteração da superfície dos lipossomas com ligantes (anticorpos, enzimas, proteína A, açúcares) Físico: lipossomas sensíveis a temperatura ou pH Diretamente ao local LIPOSSOMAS Definir Objetivo Objetivo Alcançado Decidir Compilar/Analisar Resultados Definir Formulação Mental Experimental Análise Manipulação Resposta Solução LIPOSSOMAS - PROCESSOS • Simples • Reprodutível • Escalonável • Controle tamanho lipossomas • Boa relação custo/eficácia e custo/benefício Produto estável e homogêneo LIPOSSOMAS - DESAFIOS Problemas: “Triple S” . “Sterility”’ . “Stability” . “Scale-Up” Contornados através de Novos Equipamentos e Processos – Análise Rigorosa caso a caso 1o RELATO DO USO LIPOSSOMAS P/ TRATAMENTO • Paciente com Doença de Gaucher: deficiência em glucocerebrosidase lisossomal hepatoesplenomegalia • Administração glucocerebrosidase lipossomal através de injeções iv por 13 meses em paciente esplenectomizado • Redução tamanho fígado; melhora função RES • Administração por 5 anos: estabilização do tamanho fígado e da saúde em geral Gregoriadis et al., The Lancet (1977) 116–117 LIPOSSOMAS COMERCIAIS Conhecimento de 1os humanos tratados com lipossomas comerciais (injetável) Daunoxome e Ambisome Doxil LIPOSSOMAS COMERCIAIS Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação Anfotericina B / Ambisome Infecção Fúngica; Leishmaniose 1990 (Europa); 1997 2000 Doxorrubicina / Doxil (USA) e Caelyx (outros países) Sarcoma de Kaposi Câncer de Ovário Câncer de Mama 1995 1999 1999 (EUA) 2003 Daunorrubicina / Daunoxome Sarcoma de Kaposi 1996 Citarabina (Cytosine Arabinoside) / DepoCyt Meningite Linfomatosa Meningite Neoplásica 1999 Fase IV LIPOSSOMAS COMERCIAIS Ativo / Produto Indicação Ano Aprovação Doxorrubicina / Myocet Câncer Mama Metástico 2000 (Europa) Verteporfina / Visudyne Degeneração Macular Miopia Patológica Histoplasmose Ocular 2000 2001 Sulfato de Morfina / DepoDur Dor Pós-Cirúrgica (epidural) 2004 LIPOSSOMAS – FASE III/IV Ativo Indicação Fase Clínica Cisplatina Câncer de Pulmão Fase III Citarabina (Cytosine Arabinoside) Meningite Neoplásica Fase IV Lurtotecan Câncer de Ovário Fase III LIPOSSOMAS – FASE I/II Ativo Indicação Fase Clínica Vincristine Linfoma Não-Hodgin Fase II Paclitaxel Tumor Sólido Avançado Fase I/II Aroplatina Câncer Fase I/II Atra – IV Linfoma Células-T Não-Hodgin Fase II Interleukina 2 Estimulante Imunológico usado com Vacina Câncer Pulmão Fase II Prostraglandina E-1 Doença Arterial Periférica Fase II LIPOSSOMAS – FASE I/II Ativo Indicação Fase Clínica Mitoxantrona Câncer Avançado Fase I/II Cisplatina (Stealth) Câncer Avançado Fase I/II Oxaliplatina Câncer Colo Retal Fase II Topotecan Câncer Avançado Fase I/II Paclitaxel Câncer Pulmão, Mama e Ovário Fase I/II Paclitaxel Câncer Próstata e Pâncreas Fase II Vinorelbina Câncer Avançado Fase I LIPOSSOMAS CONVENCIONAIS Direcionamento Passivo – Sistema Imunológico LIPOSSOMAS CONVENCIONAIS AMBISOME® Anfotericina B Lipossomal – 50 mg/frasco • Administração iv • Pó Liófilo • Após reconstituição com água: dispersão lipossomal amarela e translucente • Excipientes: HSPC, DSPG, Colesterol, Sacarose, Succinato Dissódico Hexahidratado, Alfa-Tocoferol • pH 5,5 AMBISOME® • Utilizado em pacientes com intolerância à terapia com Anf B convencional ou em: idosos, pacientes com AIDS, em tratamento quimioterápico • Diminui toxicidade • Não diminui eficácia fármaco contra o fungo DAUNOXOME® Daunorrubicina Lipossomal – 50 mg, 2 mg/mL • Sarcoma de Kaposi em estado avançado - HIV • Administração iv • Dispersão Lipossomal vermelha e translucente – SUV, Dmédio 45 nm • Excipientes: DSPC, Colesterol, Sacarose, Glicina, Cloreto de Cálcio • pH 4,9 – 6,0 DEPOCYT® Citarabina Lipossomal – 50 mg/ frasco (5 mL) • Meningite Linfomatosa • Administração Intratecal (normal/e a cd 2 semanas: 82 h) • MVV: Suspensão Branca Estéril • Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína • pH: 5,5 – 8,5 Vesículas não concêntricas, cada uma com um cerne aquoso interno que encapsula a solução com o ativo, circundada por uma bicamada lipídica. DEPODUR® Sulfato de Morfina Lipossomal – 10 mg/mL (2 mL) • Dor Pós-Cirurgia • Liberação prolongada por 48 horas • Administração Epidural • MVV: Suspensão Branca Estéril • Excipientes: DOPC, DPPG, Colesterol, Trioleína e Tricaprilina • pH: 5,0 – 8,0 VISUDYNE® Verteporfina Pó Liófilo – 15 mg / frasco • Degeneração Macular, Miopia Patológica, Histoplasmose Ocular • Administração iv • Verteporfina é ativada por luz: mistura 1:1 de 2 isômeros (I e II) • Terapia fotodinâmica: Laser de baixa energia • Liofilizado verde escuro • Após reconstituição com 7 mL de água: 2 mg/mL (7,5 mL) • Excipientes: DMPC, EPG, Ascorbil Palmitato, Hidroxitolueno Butilado, Lactose LIPOSSOMAS STEALTH LIPOSSOMAS STEALTH DOXIL® Doxorrubicina Lipossomal – 2 mg/mL • Sarcoma de Kaposi, Câncer de Ovário e de Mama • Administração iv (normalmente a cd 4 semanas) • Lipossomas “Stealth”: Liberação prolongada (metoxiPEG) – 55 h • Dispersão lipossomal estéril vermelha translucente (SUV) • + 90% Doxorrubicina encapsulada • Excipientes: HSPC, DSPE-MPEG, Colesterol, Sulfato de Amônia, Histidina, Sacarose • pH 6,5 LIPOSSOMAS ELÁSTICOS FLEX POWER® Salicilato de Trolamina 10% • Tecnologia FlexSomes • Usado p/ artrite, tendinite e dor nas costas, ombros, pescoço, joelho, tornozelo... VIROSSOMAS www.crucell.com EPAXAL® Vacina Hepatite A • Primeiro produto baseado na Tecnologia Virossomas • Sem alumínio: maior tolerabilidade • Induz a formação de anticorpos nos 10 primeiros dias • Após segunda dose: proteção por 20 anos • Registro em + de 40 países • Em 2008 lançamento Epaxal Junior INFLEXAL® Vacina Influenza • Tecnologia Virossomas • Introduzida em 1997 • Registro em 43 países • Única vacina que pode ser usada para todas faixas etárias (a partir 6 meses) LIPOSSOMAS CATIÔNICOS CATIÔNICOS Aplicações: Médico-farmacêuticas (vacina- terapia gênica) LIPOSSOMAS / DNA Desidratação Rehidratação controlada + + + ++ + + + + + Lipossomas Catiônicos Multilamelares Complexação Eletrostática Condições controladas + - - Complexo DNA/Lipossoma Catiônico -- - DNA plasmídeo + - - - - - + + DNA Plasmídeo (600 nm) + + ++ +- + ++ + + - - + ++ + + ++ + + + + + Lipossoma Catiônico Desidratação Rehidratação controlada + - + + +- - - + + + + - + + - -- + + - -+ + + + ++ - + + + -+ + + + ++ + + + + ++ + ++ + Lipossoma Catiônico Lipossoma catiônico encapsulando DNA (250 nm) Rosada, Torre et al., 2008 LIPOSSOMAS Perspectivas Futuras • Lipossomas Polimerizados: administração oral • Lipossomas Magnéticos: direciona/o por campo magnético LIPOSSOMAS Perspectivas Futuras • Lipossomas com microbolhas + ultrassom: - potencial p/ tratamento trombose - potencial p/ entrega ativos • Lipossomas com microbolhas + temperatura: potencial p/ tratamento não-invasivo tumor cérebro LIPOSSOMAS Terapia Gênica: Introdução de material genético exógeno nas células alvo com o objetivo de corrigir ou eliminar a nível molecular as causas de patologias que envolvam fatores genéticos Cura completa após única administração e sem efeitos adversos small interfering RNA Uso Lipossomas como Vetor Catiônicos Sensíveis ao pH
