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AVALIAÇÃO DO EFEITO DA LINAGLIPTINA SOBRE A ATIVIDADE DA
CREATINA QUINASE EM CÉREBRO DE RATOS JOVENS E ADULTOS
Melissa Benedet 1; Dra. Gislaine Tezza Rezin (Orientadora)2
INTRODUÇÃO
A Organização Mundial de Saúde define obesidade como acúmulo anormal ou
excessivo de gordura, de modo que possa comprometer a saúde do indivíduo (WHO, 2013).
Sua prevalência vem crescendo substancialmente nos últimos anos, constituindo uma
pandemia mundial (Nguyen e El-Serag, 2010). No grupo de doenças crônicas não
transmissíveis, a obesidade pode ser classificada como uma doença, assim como um fator de
risco para outras doenças deste grupo (BRASIL, 2011). Dentre as comorbidades associadas à
obesidade, se destacam as doenças cardiovasculares e metabólicas (WHO, 2013). Nesse
sentido, estudos vem demonstrando que a obesidade pode estar diretamente relacionada com a
resistência insulínica (Kahn, 2006; Wang, 2009), uma vez que insensibiliza órgãos receptores
de glicose para a ação da insulina (Cerf, 2013), sendo dessa forma um fator de risco constante
para o diabetes mellitus tipo 2 (Sociedade Brasileira de Diabetes, 2009).
Neste contexto, o tratamento para obesidade fundamenta-se em uma abordagem
multidisciplinar, a qual compreenda uma série de medidas conservadoras, como dieta e
exercícios (ABESO, 2010). No entanto, um crescente número de pacientes necessita de
suporte farmacológico para alcançar os objetivos desejados (Jiménez, 2013). Contrasta com
esse fato, a disponibilidade de medicamentos para o tratamento da obesidade. Em 2010, no
Brasil, haviam cinco medicamentos registrados para essa finalidade: anfepramona
(dietilpropiona), femproporex, mazindol, sibutramina e orlistate (ABESO, 2010). No entanto,
em virtude de questionamentos relacionados à sua eficácia e segurança, assim como a
presença de efeitos indesejáveis, diversas dessas classes foram retiradas do mercado, o que
tornou o arsenal terapêutico bastante limitado (Paumgartten, 2011).
Diante desse fato, demais medicamentos utilizados para outras finalidades, mas que
apresentam efeito sobre o peso corporal estão sendo investigados com o intuito de introduzilos no tratamento da obesidade (Faria et al., 2010; Powell, 2011). Como exemplo, é possível
citar os fármacos que atuam otimizando o sistema incretina (Baretic, 2012). Os análogos do
peptídeo similar ao glucagon tipo I (GLP-1), assim como os inibidores da enzima dipeptidil
peptidase-4 (DPP-4) são novas classes de antidiabéticos que vem demonstrando efeito
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satisfatório no controle da glicemia (Russel-Jones e Gough, 2012), assim como vantagens na
redução e manutenção do peso corporal (Nauck, 2009).
Por conseguinte, a linagliptina é o mais recente inibidor da DPP-4, o qual inibe,
seletivamente, esta enzima e dessa forma prolonga a meia-vida do peptídeo insulinotrópico
dependente de glicose (GIP) e GLP-1 endógeno, diminuindo assim a hiperglicemia em
pacientes com diabetes mellitus tipo 2 (Forst et al., 2011; Nauck, 2011). Contudo, além de sua
ação insulinotrópica, estudos vem apontando um efeito benéfico quanto à manutenção do peso
corporal (Kern et al., 2012; Vickers et al., 2012).
Neste contexto, considerando que a obesidade está intimamente relacionada ao
diabetes, a linagliptina, o qual auxilia no controle da glicemia, pode contribuir positivamente
na manutenção de peso corporal. Tendo em vista que são poucos os medicamentos com
finalidade terapêutica voltada para obesidade, a avaliação da atividade da creatina quinase se
faz necessária para melhor entender os efeitos da linagliptina, bem como colaborar na busca
por novos alvos terapêuticos para tratar a obesidade
Palavras-chave: Linagliptina. Obesidade. Creatina quinase.
_____________________
1
Acadêmica de Medicina da Unisul. Bolsista do Art170. E-mail: [email protected]
2
Professora do Programa de Mestrado em Ciências da Saúde da Unisul. E-mail: [email protected]
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OBJETIVOS
O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade da creatina quinase em cérebro de
ratos submetidos a administração de linagliptina.
MÉTODOS
No presente estudo foram utilizados ratos machos, pertencentes à linhagem Wistar
(Rattus norvegicus), com 30 e 60 dias de idade, pesando entre 100-150g e 250-300g,
provenientes do biotério da Universidade do Vale do Itajaí (Univali). Os animais foram
divididos em dois grupos experimentais (agudo e crônico). No experimento agudo os ratos
receberam uma única administração oral de linagliptina nas doses de 1; 7,5 e 15mg/Kg ou
salina. Doze horas após a administração os animais foram mortos por decapitação. No
experimento crônico os ratos receberam administrações orais de linagliptina nas doses de 1;
7,5 e 15mg/Kg ou salina, uma vez ao dia, durante sete dias. Doze horas após a última
administração os animais foram mortos por decapitação.
Após a morte dos ratos, o cérebro foi removido e o hipotálamo, córtex pré-frontal,
cerebelo, hipocampo, estriado e córtex posterior foram isolados para as análises bioquímicas.
As estruturas cerebrais foram homogeneizadas. O homogeneizado foi centrifugado a 800 x g
por 10 minutos e o sobrenadante foi armazenado a -40°C. As proteínas totais foram
determinadas pelo método de Lowry e colaboradores (1951). Ainda, a atividade da creatina
quinase foi determinada de acordo com Hughes (1962).
A análise estatística foi realizada através do programa estatístico Statistical Packege
for the Sciences (SPSS 17.0). Os dados foram avaliados pela análise de variância de uma via
(ANOVA), seguida pelo post hoc Tukey. A significância estatística foi considerada para
valores de p<0,05. O projeto foi aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais da
Universidade do Sul de Santa Catarina sob protocolo nº 13.009.4.03.IV.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Nossos resultados mostraram que no experimento agudo os animais jovens tiveram
inibição na atividade da creatina quinase no cerebelo (1; 7,5 e 15mg/kg) e hipocampo (1; 7,5 e
15mg/kg). Por outro lado, após administração aguda de linagliptina em ratos adultos a
atividade da creatina quinase foi ativada no córtex posterior (1; 7,5 e 15mg/kg). No
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experimento crônico, os animais jovens tiveram a atividade da creatina quinase ativada no
hipotálamo (7,5 e 15mg/kg), hipocampo (7,5 e 15mg/kg) e córtex posterior (15mg/kg). Além
disso, a atividade da creatina quinase também foi ativada no hipotálamo (7,5 e 15mg/kg) e
córtex posterior (1; 7,5 e 15mg/kg) de ratos adultos. Diante dos nossos resultados nós
podemos observar que uma única administração e repetidas administrações de linagliptina em
ratos jovens e adultos altera o metabolismo energético no cérebro dos animais, sugerindo
assim um desequilibrio na produção de ATP e, consequentemente, na homeostase energética.
CONCLUSÕES
Nossos resultados mostraram que a administração aguda e crônica de linagliptina em
ratos jovens e adultos alteram o metabolismo energético cerebral.
REFERÊNCIAS
ABESO. Associação Brasileira para o Estudo da Obesidade e da Síndrome
Metabólica. Atualização das diretrizes para o tratamento farmacológico da obesidade e do
sobrepeso. 2010.
Baretić M. Targets for medical therapy in obesity. Digestive Diseases 2012; 30: 168172.
BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Departamento de
Análise de Situação de Saúde. Plano de ações estratégicas para o enfrentamento das doenças
crônicas não transmissíveis (DCNT) no Brasil, 2011.
Cerf ME. Beta cell dysfunction and insulin resistance. Frontiers in Endocrinology
2013; 4: 1-12.
Faria AM, Mancini MC, Melo ME, Cercato C, Halpern A. Progressos recentes e
novas perspectivas em farmacoterapia da obesidade. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e
Metabologia 2010; 54: 516-529.
Forst T, Uhlig-Laske B, Ring A, Ritzhaupt A, Graefe-Mody U, Dugi KA. The oral
DPP-4 inhibitor linagliptin significantly lowers HbA1c after 4 weeks of treatment in patients
with type 2 diabetes mellitus. Diabetes Obesity and Metabolism 2011; 13: 542–550.
Hughes BP. A method for estimation of serum creatine kinase and its use in
comparing creatine kinase and aldolase activity in normal and pathologic sera. Clinica
Chimica Acta 1962; 7: 597–604.
5
Jiménez EG. Obesity: Etiologic and pathophysiological analysis. Endocrinologia y
Nutricion 2013; 60: 17-24.
Kahn SE, Hull RL, Utzschneider KM. Mechanisms linking obesity to insulin.
Resistance and type 2 diabetes. Nature 2006; 444: 840-846.
Kern M, Klöting N, Niessen HG, Thomas L, Stiller D, Mark M, Klein T, Blüher M.
Linagliptin improves insulin sensitivity and hepatic steatosis in diet-induced obesity. OLoS
One 2012; 7: 3874.
Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with the Folin
phenol reagent. The Journal of Biological Chemistry 1951; 193: 265-267.
Nguyen DM, El-Serag HB. The Epidemiology of Obesity. Gastroenterology Clinics of
North America 2010; 39: 1–7.
Nauck MA, Vilsbøll T, Gallwitz B, Garber A, Madsbad S. Incretin-Based Therapies:
Viewpoints on the way to consensus. Diabetes care 2009; 32: S223-231.
Nauck MA. Incretin-based therapies for type 2 diabetes mellitus: properties, functions,
and clinical implications. American Journal of Medicine 2011; 124: 3–18.
Paumgartten FJR. Tratamento farmacológico da obesidade: a perspectiva da saúde
pública. Caderno de Saúde Pública 2011; 27: 404.
Powell AG, Apovian CM, Aronne LJ. New Drug Targets for the Treatment of
Obesity. Clinical Pharmacology & Therapeutics 2011; 90: 40-51.
Russell-Jones D, Gough S. Recent advances in incretin-based therapies. Clinical
Endocrinology 2012; 77: 489-99.
Sociedade Brasileira De Diabetes. Diretrizes da Sociedade Brasileira de Diabetes
2009.
Vickers SP, Cheetham SC, Birmingham GD, Rowley HL, Headland KR, Dickinson K,
Grempler R, Hocher B, Mark M, Klein T. Effects of the DPP-4 Inhibitor, Linagliptin, in DietInduced Obese Rats: A Comparison in Naive and Exenatide-Treated Animals. Clinical
Laboratory 2012; 58: 787-799.
Wang X, Ding X, Su S, Spector TD, Mangino M, Iliadou A, Snieder H. Heritability of
Insulin Sensitivity and Lipid Profile Depend on BMI: Evidence for Gene–Obesity Interaction.
Diabetologia 2009; 52: 2578–2584.
WORLD HEALTH ORGANIZATION. Obesity and overweight 2013.
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FOMENTO
O trabalho teve a concessão de Bolsa do Artigo 170.