Cinética enzimática

Bioquímica A BMQ121 – Enfermagem
Bloco II – Prof. Responsável: Didier Salmon
EXERCÍCIO DIRIGIDO I – ENZIMAS
1. Cinco diferentes reaçôes contendo 10-9 M de uma enzima X foram realizadas com cinco
concentrações diferentes de sustrato, foram medidas as velocidades iniciais das reações
e anotadas na tabela abaixo:
a) Determine Km e Vmax
b) Será que a enzima X é alostérica (homotrópica)? Justifique
2. As prostaglandinas pertencem à classe dos eicosanóides, moléculas derivadas de ácidos
graxos exerçando uma variedade de ações extremamente diversas sobre os tecidos. Esses
compostos são responsáveis da produção de febre, inflamação e sensação de dor. As
prostaglandinas são derivadas do ácido araquidônico numa reação catalisada pela
prostaglandina H2 sintase ou ciclooxigenase. Essa enzima usa o oxigênio para converter o
ácido araquidônico em PGG2, o precursor direto da várias prostaglandinas. Observe os dados
da cinética da reação catalisada pela prostaglandina H2 sintase e determine por gáfico a Vmáx
e o Km da enzima.
[Ácido araquidônico]
(mM)
Taxa de formação de PGG2
(mM/min)
0.5
1.0
1.5
2.5
3.5
23.5
32.2
36.9
41.8
44.0
Taxa de formação de PGG2 + 10
mg/ml de Ibuprofeno
(mM/min)
16.7
25.3
30.5
37.0
39.0
O Ibuprofeno é um analgésico e anti-inflamatório utilisado para o tratamento de estados
dolorosos. O Ibuprofeno inibe a prostaglandina H2 sintase ou seja a síntese das
prostaglandinas como consequência uma redução da inflamação e da dor. Grafique os dados
da terceira coluna e determine o tipo de inibição exercida pelo ibuprofeno sobre a
prostaglandina H2 sintase. Justifique usando um gráfico de Lineweaver-Burke (duplo-recíproco)
3. A anidrase carbónica é fortemente inibida pelo fármaco diurético, o acetazolamida, que reduz
a alta pressão ocular no glaucoma (acúmulo de fluido intracelular). A anidrase carbónica
desempenha um papel importante neste processo assim como em outros processos de
secreção porque essa enzima participa na regulação do pH e do conteúdo em bicarbonato em
fluidos corporais. Utilizando os dados da curva experimental da reação inicial da velocidade
inicial (v0) vs [S] determine a natureza da inibição pela droga e justifique.