aula_10_gastroenterites_2016

Gastrenterites:
 Inflamação da mucosa intestinal
causando diarréia, náusea, vômito e
dor abdominal.
Eliason & Lewan, 1998.
 Incidência: cerca de 1 bilhão de casos/ano
crianças com menos de 5 anos.
 Diarréia aguda: mortalidade de 800.000 casos/ano
(crianças < 5 anos de idade).
WHR, 2005
Causas de Gastrenterites na Infância
Países
Desenvolvidos
Em Desenvolvimento
Vírus associados a Gastrenterites
Rotavírus
Norovírus
Astrovírus
Adenovírus
entéricos
ROTAVÍRUS
• 1973: Bishop et al.
• 1977: Linhares et al.  Brasil
Família: Reoviridae
Gênero: Rotavírus
Partícula Viral:
 esférica
 sem envelope
 70nm de diâmetro
 capsídeo de simetria icosaédrica (triplo capsídeo viral)
- Genoma: 11 segmentos de RNA dupla fita
Rotavírus: Estrutura e Genoma
Core: VP1
VP2
VP3
Capsídeo interno:
VP6 (grupos A a G)
Capsídeo externo:
VP7 (G)
VP4 (P) – espículas
Sensíveis à protease
Ptns Não- estruturais
NSP1-NSP5
*NSP4:
enterotoxina viral
Rotavírus: Classificação em Grupos
A
B
VP6
7 Grupos:
C
D
E
F
G
VP6: classificação em grupos
testes diagnósticos
humanos
Rotavírus do Grupo A: Classificação binária
Genótipos
P
(25)
G
(15)
VP4
4
VP7
9
Humanos : Genótipos Comuns: G1P[8], G3P[8], G4P[8], G2P[4], G9
Propriedades físico-químicas


Resistentes à pH ácido, álcool 70%,
detergentes orgânicos, ao meio extracelular por
semanas.
Sensíveis à hipoclorito de sódio 3%, álcool 92%,
formol, UV, beta-propriolactona.
Rotavírus: Transmissão
 Transmissão: fecal-oral, respiratória e fômites
 Eliminação: 1 trilhão de partículas/g de fezes
 Dose Infectante: 10 partículas
 Idade da primeira infecção: 0 a 24 meses
 Período de incubação: 24 a 48 horas
A distribuição dos Rotavírus no Brasil tem características
sazonais nas regiões tropicais (RJ,SP,PR), mas não nas equatoriais
(AM,PA).
Ciclo de replicação dos Rotavírus
Lise mediada pela NSP4
Rotavírus: Patogênese e manifestações clínicas
 Infecção limitada à mucosa
intestinal, quase sempre
 Processo
diarréico
natureza osmótica
 NSP4: ”enterotoxina viral”
A. Vilo normal
(delgado e longo)
B. Vilo atrofiado, epitélio
destruído, hiperplasia das
criptas
de
Rotavírus: Diagnóstico laboratorial
Detecção do antígeno viral:
 Ensaio imunoenzimático
 Aglutinação em latex
Detecção do genoma viral:
símio
grupo A em humanos
- Eletroforese em policrilamida...RNA com 11 segmentos gênicos
-Isolamento do vírus em cultura de células
RV gp A  Genotipagem:
Reação em cadeia pela polimerase (RT-PCR)
Rotavírus: Diferentes genótipos
- Mutações
- Duplicação ou deleção no genoma
- Reestruturação (reassortment)
4
7
8
9
Rotavírus: Profilaxia
• Vacina atenuada de vírus humano (RotaRix® – cepa RIX4414)
com especificidade para G1P[8] – via oral;
• Vacina reestruturada bovina-humana pentavalente (RotaTeq®)
com especificidade G1, G2, G3, G4 e P8.- via oral
Ambas estão no PNI (Programa Nacional de Imunizações) do
Brasil – para crianças até 1ano de idade. Importante queda na
mortalidade e no número de casos graves.
Efeitos adversos: intussuscepção
Norovírus:
1972: Kapikian e col. por ME detectaram os NV  surto
de GE em escola primária de Norwalk, EUA
1990: Família: Caliciviridae
Gênero: Norovirus Norwalk like virus
small round structured viruses
Sapovirus
Vírus Sapporo
Partícula Viral:
- esférica (calix = taça)
 sem envelope
  30nm de diâmetro
 capsídeo de simetria icosaédrica: VP1 e VP2
- Genoma: RNA fita simples (+)
Kapikian, 2000.
Epidemiologia dos NV
 Via de transmissão:
fecal-oral, aerossóis contaminados com vômito ...
Transmissão eficiente devido à alta infecciosidade
 Surtos em hospitais, clínicas,
escolas, navios, restaurantes.
 Sazonalidade controversa
 Prevalência: 6% - 23%
 Acomete todas as
faixas etárias
NV: Diagnóstico laboratorial
Detecção de NV pela PCR
 ME: difícil identificação morfológica

EIE
-protocolo descrito
pelo “Centers for Disease
Control and Prevention”.
Mon 432-434: GI
Mon 431-433: GII
 RT-PCR
Seqüenciamento
213 pb
Astrovírus humanos (HAstV):
1993:
Família: Astroviridae
Gênero: Mamastrovirus
Partícula Viral:
- esférica (astro = aspecto de estrela com 5 ou 6 pontas)
 sem envelope
 28 nm de diâmetro
 capsídeo de simetria icosaédrica: VP1 e VP2
- Genoma: RNA fita simples (+)
Surtos em hospitais, escolas
- Sazonalidade: controverso
- Prevalência: 10% em crianças hospitalizadas até 5 anos
30% em creches (crianças até 3 anos de idade)
HAstV: Diagnóstico laboratorial


PCR
-protocolo descrito
ME: difícil (10% partículas aspecto estelar)
por Noel et al. (1995),
iniciadores Mon 269 –
270.
EIE
RT-PCR
Sequenciamento
Caracterização molecular
449 pb
Prevalência das infecções por HAstV, NV, RV e AdV

Amostras de crianças hospitalizadas no RJ