GASTROENTERITES VIRAIS Lígia Galhardi Laboratório de Virologia Dep. Microbiologia/CCB/UEL Vírus que infectam o intestino? Infecção viral X doença Associados a G-E: Não associados a G-E • Rotavirus • Adenovirus entéricos (40, 41, 50 e 51) • Calicivirus • Astrovirus • Coronavirus • Torovirus • Polio • Coxsackie A e B • Echovírus • Enterovírus 68-71 • Hepatite A e E • Adenovírus 1-39 • Reovírus Mais comuns: Adenovírus Astrovírus Rotavírus Norovírus - Norwalk Calicivírus Sapovírus Epidemiologia: Cunliffe, N.A., et al. 2010. Healthcare-associated Viral Gastroenteritis among Children in a Large Pediatric Hospital, United Kingdom. Vol. 16, No. 1. Epidemiologia: Epidemiologia: Kane EM, Turcios RM, Arvay ML, Garcia S, Bresee JS, Glass RI. The epidemiology of rotavirus diarrhea in Latin America. Anticipating rotavirus vaccines. Rev Panam Salud Publica. 2004;16(6):371–7. GASTROENTERITES VIRAIS ROTAVÍRUS Família – Reoviridae Diâmetro: 65-75 nm 7 grupos (A, B, C) - subgrupos e sorotipos Virion: Core (proteínas VP1, VP2 e VP3) Capsídeo interno (VP6 - grupos) Capsídeo externo (sorotipos) VP7 - Sorotipo G (14) VP4 - Sorotipo P (12) ROTAVÍRUS Ácido Nucléico – RNA df segmentado (11 genes) – 16.500 - 21.000 pb Classe I Classe II Classe III Classe IV REPRESENTAÇÃO ESTRUTURAL DO ROTAVÍRUS ROTAVÍRUS Modulação de Ca intracelular Classificação fenotípica (eletroforétipos) dos Rotavírus Mutações ou rearranjos Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A Sorotipos (neutralização ou EIA) e genótipos (RT-PCR); (Proteólise) (Glicosilação) Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus já descritos 1) Cepas mais comuns: G1P1A[8], G2P1B[4], G3P1A[8] e G4P1A[8] – (92% casos humanos). 2) Cepas circulantes no Brasil: G5, G8, G10, G12 E P3. 3) Cepas já identificadas em áreas em desenvolvimento: G3P8[11], G4P6[1], G4P8[11], G5P2A[6], G5P1A[8], G1P1A[8], G6P3[9], G6P11[14], G8P6[1], G1P1A[8], etc. EPIDEMIOLOGIA - Sorotipos R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8 Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A (Soares LS, et al. Molecular characterization of G1 human rotaviruses detected in children from Belém, Pará, Brazil. Rev Pan-Amaz Saude 2010; 1(1):125-130): G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[8] and G9P[8]. R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8 VACINA No Brasil DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Material: fezes Coleta: entre o 1º e o 4º dia Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica Pesquisa de Antígeno Viral: Imunofluorescência Enzimaimunoensaio Aglutinação em Látex Eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) PCR DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica detecção dos RV em 80 a 90 % das fezes positivas DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Imunoensaio enzimático DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Imunocromatografia DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Aglutinação em látex DIAGNÓSTICO LABORATORIAL EGPA DIAGNÓSTICO LABORATORIAL PCR DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Isolamento do vírus em célula: - rim de macaco (MA-104 e LLC-MK2) e de carcinoma de cólon intestinal humano (Caco-2). ECP em MA-104: aumento de refringência, seguido de redução do volume citoplasmático, com formação de grumos celulares e células repuxadas, com distribuição focal Sorotipagem e neutralização DIAGNÓSTICO LABORATORIAL MA-104 cells, mock- (A, D and G), SA-11 (B, E and H) and 1154 (C, F and I) infected cells at 24, 48 and 72 hpi (lanes A, D and G), respectively