Coleção de agentes microbianos de controle biológico

Coleção de agentes microbianos
de controle biológico
Rose Monnerat
EMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia
Bactérias entomopatogênicas
Fungos entomopatogênicos
Fungos fitopatogênicos
Vírus entomopatogênicos
Bacillus thuringiensis
Bactéria tóxica a vários insetos
Coleoptera
Diptera
Lepidoptera
Bacillus sphaericus
Diptera: Culex e Anopheles
Embrapa
Coleção de estirpes de Bacillus spp.
1- Isolamento
Amostras
de diferentes regiões
Solo, água, insetos mortos
2- Bioensaios
Lepidoptera
Anticarsia gemmatalis
Plutella xylostella
Spodoptera frugiperda
2- Bioensaios
Coleoptera
Anthonomus grandis
Alphitobius diaperinus
2- Bioensaios
Diptera
Aedes aegypti
Culex
quinquefasciatus
Simulium spp.
3- Caracterização
Morfologia (ME, MO)
Perfil protéico
kDa
a
b
c
160
105
500 nm
500 nm
75
50
kb
1
500
Perfil gênico
4- Estocagem
350 B. sphaericus
1.900 B. thuringiensis
www.cenargen.embrapa.br/sicom
Finalidades
Pesquisa
Isolar estirpes que apresentem características
ou produzam proteínas tóxicas diferentes
das já conhecidas
Novos bioinseticidas
Novos genes
Nome: S1806
Sorotipo: israelensis
Estoque: 10 ampolas (S, L, FP)
Genes: cry4A, cry4B, cry10,
cry11A, cyt1, cyt2
1806
Toxico para: Aedes aegypti,
Simulium pertinax, Culex
quinquefasciatus
Estirpe
LC 50(ng/ml) - A. aegypti
1806
1.5 (1.1(1.1-2.0)
Bti (IPS82)
6.5 (4.7(4.7-9.1)
Nome: S242
Serotipo: H5
Estoque: 10 ampolas (S, L, FP)
Genes: BinA BinB
Toxico para: Culex quinquefasciatus,
Anopheles darlingi
Estirpe
LC 50 (ng/ml) C. quinquefasciatus
S242
1.3 (0.82 – 2.02)
Controle 2362
4.5 (3.26 – 6.46)
Name: S1905
Serotype: kurstaki
Stock: 10 samples (S, L, FP)
Gene profile: cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B,
cry1I, cry2
Toxic to: Spodoptera frugiperda, Anticarsia
gemmatalis
Strains
A.
gemmatalis
(ng/cm2)
S1905
Btk
Gene cry1Ia
S. frugiperda
LC 50 (ng/cm )
LC 50 (ng/cm2)
0,33 (0,09(0,09-0,70)
1,87 (0,38(0,38-2,37)
13,73 (9,09(9,09-20,09)
28,52 (20,15(20,15-41,89)
Proteína tóxica a lepidópteros e coleópteros
Novos produtos
Bt-horus G
Ponto final
Fim da picada
Cascudex
Finalidades
Prestação de serviços
Determinação de potência (bioensaios)
Anticarsia gemmatalis
Aedes aegypti
Culex quinquefasciatus
Spodoptera frugiperda
Prestação de serviços
Controle de qualidade de produtos biológicos
Verificação da presença de contaminantes
Microrganismo
Especificação
Meio de cultura
B. thuringiensis
Controle
Ágar nutritivo
Coliformes
≤ 10 UFC
Ágar Bile Cristal-Violeta Vermelho
termotolerantes
Neutro
Escherichia coli
≤ 10 UFC
Ágar Macconkey
Enterecocos
≤ 10 UFC
Ágar Confirmatório para Enterococos
Estreptococos
0
Agar Seletivo para Estreptococos
Salmonella
0
Ágar Verde-Brilhante
Fungos
0
Ágar Sabouraud 4%
Prestação de serviços
Isolamento
Caracterização – morfológica, bioquímica e molecular
Armazenamento
Capacitação
Dias de campo – Agricultores do entorno
Cursos
Utilização de produtos a base de Bacillus
thuringiensis para controle do Aedes aegypti
Sistema de qualidade
NGQ- núcleo de controle da qualidade
5S – organização, ordenação, utilização, limpeza e saúde
Diagnóstico – adequação do laboratório
Treinamento de pessoal – registros e conduta
Validação de métodos
Mapeamento de processos
Confecção de POPs
Auditoria interna
Auditoria externa – INMETRO/ANVISA
Obtenção da acreditação – NBR ISO/IEC 17.025/2005
Obrigada !