Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ EFEITO SINERGICO ENTRE O OLEO ESSENCIAL DE BACCHARIS TRINERVIS LAM PERS ASTERACEAE E O CETOCONAZOL FRENTE A CEPAS DE TRICHOPHYTON RUBRUM Antonio Carlos Nogueira Sobrinho Elnatan Bezerra de Souza Maria Rose Jane Ribeiro Albuquerque Soraya Marques Ribeiro Rafael Pereira Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle INTRODUÇÃO: Alguns fungos podem adquirir potencial patogênico, promovendo infecções micóticas, quadros de hipersensibilidade e micetismo (LACAZ et al., 2002). Um agravante na prevenção e diminuição de novos casos de micoses consiste na ausência quase total de vacinas antifúngicas, limitadas ao campo animal, ainda de eficácia variável (GARCÍA; BLANCO, 2000). Em relação à descoberta de novas drogas antifúngicas, os produtos naturais são amplamente utilizados, e os resultados apresentam grande utilidade contra infecções fúngicas. Baccharis trinervis (Lam.) Pers. é uma planta perene rizomatosa, de porte ereto e arbustivo, com pouca ramificação, medindo de 80 a 140 cm de altura (ALBUQUERQUE et al., 2004). Conhecida popularmente no Brasil como “assapeixe-fino” e “assapeixe-branco”, apresenta distribuição no continente americano do México até Argentina, tendo seu uso na medicina popular como antisséptico, digestivo e para tratamento de picada de cobras (SHARP et al., 2001). OBJETIVO: Este trabalho objetivou investigar o potencial sinérgico do óleo essencial de B. trinervis e do derivado imidazólico cetoconazol contra cepas do dermatófito T. rubrum. MATERIAL E MÉTODOS: As partes aéreas da espécie vegetal Baccharis trinervis foram coletadas no período de floração na Serra da Meruoca, Sobral, Ceará-Brasil, no domínio Caatinga. A exsicata da planta, correspondente à coleta, encontra-se depositada no Herbário Prof. Francisco José de Abreu Matos (HUVA) da Universidade Estadual Vale do Acaraú, autenticada pelo Dr. Elnatan Bezerra de Souza sob o registro 3651. As partes aéreas de B. trinervis (271,36 g), foram acondicionadas em balão de 5 L, juntamente com 1,5 L de água e submetidas ao processo de hidrodestilação em aparelho tipo-Clevenger por um período de 2 h. As cepas fúngicas foram provenientes do estoque em ágar batata à -20 ºC, gentilmente cedidas pelo Laboratório de Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA). Foram usadas duas cepas do dermatófitos Trichophyton rubrum (LABMIC 0101, LABMIC 0102) mantidas em solução salina (NaCl a 0,9%), a 28 ˚C. O efeito do composto combinado com antifúngico padrão foi determinado pela técnica do checkerboard, método usado para determinar a interação das drogas através do cálculo do Índice de Concentração Inibitória Fracional (FICI). O FICI é calculado pela adição da Concentração Inibitória Fracional (FIC) Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ para cada um dos compostos ensaiados, sendo definida como a adição dos valores de CIM de cada fármaco na combinação e CIM do mesmo fármaco sozinho (WHITE et al., 1996). O sinergismo foi definida como o índice de FICI < ou = 0,5, efeito aditivo quando o índice é de FICI entre 0,5 e 1,0, indiferente com FICI > 1,0 e < ou = 4,0 e antagonismo com FICI > 4.0) (WHITE et al., 1996; PYUN; SHIN, 2006). Todos os experimentos foram realizados em triplicata e os resultados normalizados pelo cálculo da média geométrica. RESULTADOS E DISCUSSÃO: No ensaio de atividade modulatória foram utilizados as cepas T. rubrum LABMIC 0101 e T. rubrum LABMIC 0102, no qual a combinação do imidazólico cetoconazol com o óleo essencial de B. trinervis propiciou uma redução dos valores de CIM para ambas as cepas de T. rubrum. A redução mais significativa ocorreu nos ensaios com a cepa LABMIC 0102, cujo índice de concentração inibitória fracionária (FICI) foi menor (0,5) quando comparado com a cepa LABMIC 0101, cujo valor de FICI foi de 1,0. Portanto, para a cepa LABMIC 0102 a atividade modulatória foi sinérgica e para a cepa LABMIC 0101 a atividade foi aditiva. Para a espécie B. trinervis este é o primeiro relato de atividade antifúngica do seu óleo essencial contra dermatófitos e de potencialização do efeito em combinação do produto natural com uma droga padrão. O dermatófitos T. rubrum é um dos principais fungos responsáveis pela casuística de infecções dermatofíticas (HIRUMA et al., 2012, GUPTA; NAKRIEKO, 2015). Inúmeros produtos naturais, tais como extratos e óleos essenciais de plantas têm sido utilizados para modificar a atividade antibiótica de fármacos por meio da técnica do checkerboard. Na literatura é reportada atividade modulatória de drogas antifúngicas com produtos naturais, como atividade relatada para Zuccagnia punctata Cav. e Larrea nitida Cav. (BUTASSI et al., 2015), Thymus vulgaris L. e Cinnamomum cassia L. (PEKMEZOVIC et al., 2015). CONCLUSÃO: O teste de sensibilidade antimicrobiano revelou uma promissora atividade antifúngica in vitro frente cepas de T. rubrum. O ensaio de atividade modulatória com a combinação do antifúngico padrão cetoconazol e o óleo essencial demonstrou uma potencialização de atividade antifúngica do produto natural combinado com o cetoconazol, o que revelou uma redução significativa nos valores de CIM para todas as cepas testadas. Novos estudos devem ser desenvolvidos com o óleo essencial de B. trinervis, ensaiando contra outros micro-organismos patógenos além da investigação de outras possíveis atividades biológicas, atividade anti-inflamatória e mecanismo de ação. REFERÊNCIAS ALBUQUERQUE, M. R. J. R.; SILVEIRA, E. R.; UCHÔA, D. E. A.; LEMOS, T. L. G.; SOUZA, E. B.; SANTIAGO, G. M. P.; PESSOA, O. D. L. Chemical Composition and Larvicidal Activity of the Essential Oils from Eupatorium betonicaeforme (D.C.) Baker (Asteraceae). Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 52, n. 22, p. 6708-6711, 2004. BUTASSI, E.; SVETAZ, L. A.; IVANCOVICH, J. J.; FERESIN, G. E.; TAPIA, A.; ZACCHINO, S. A. Synergistic mutual potentiation of antifungal activity of Zuccagnia punctata Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Cav. and Larrea nitida Cav. extracts in clinical isolates of Candida albicans and Candida glabrata. Phytomedicine, v. 22, n. 6, p. 666-678, 2015. GARCÍA, M. E.; BLANCO, J. J. Principales enfermedades fúngicas que afectan a lós animales domésticos. Revista Iberoamericana de Micología, v. 17, p. 2-7, 2000. GUPTA, A. K.; NAKRIEKO, K. A. Trichophyton rubrum DNA strain switching increases in patients with onychomycosis failing antifungal treatments. British Journal of Dermatology, v. 172, n. 1, p. 74-80, 2015. HIRUMA, M.; KANO, R.; SUGITA, T.; MOCHIZUKI, T.; HASEGAWA, A.; HIRUMA, M. Epidemiological aspects of Trichophyton rubrum var. raubitschekii in Japan. The Journal of Dermatology, v. 39, n. 12, p. 1000-1001, 2012. LACAZ, C. 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Comparison of three different in vitro methods of detecting synergy: time-kill, checkerboard, and E test. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, v. 40, n. 8, p. 1914-1918, 1996.