56º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010 Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 307 Estudo da regulação de microRNAs em cana-deaçúcar em resposta a bactérias patogênicas Rojas, CA; Almeida, KL; Torres, S; Thiebaut, F; Lanfranco PM; Hemerly AS; Ferreira, PCG Laboratório de Biologia Molecular de Plantas, Instituto de Bioquímica Médica, CCS, Universidade Federal do Rio de Janeiro, 21941-590, Rio de Janeiro, RJ, Brasil. [email protected] Palavras-chave: cana-de-açúcar, patogênese, microRNAs, Solexa.e Acidovorax. A cana-de-açúcar possui enorme importância não só pela produção de açúcar, como porque é a base da produção de biocombustíveis no país. No entanto, a cultura da cana enfrenta diversos problemas para obtenção de maiores rendimentos, entre os quais figuram diversos estresses abióticos (seca, frio, solos ácidos) e as doenças causadas por microorganismos, tais como o raquitismo da soqueira (Leifsonia xili), escaldadura da folha (Xanthomonas albilineans), estria vermelha (Acidovorax avenae), vírus do mosaico (vírus SMV) e ferrugem laranja (Puccinia melanocephala). Embora de extrema importância, pouco se sabe dos mecanismos moleculares que acontecem no estabelecimento destas doenças e das alterações patológicas decorrentes. Estudando as diferentes respostas em variedades contrastantes enquanto a susceptibilidade ou resistência é possível evidenciar estratégias biológicas bem sucedidas no combate aos microorganismos patogênicos. Recentemente pequenas moléculas de RNA denominadas microRNAs têm sido descritas como importantes reguladoras de outros genes, em diversas situações biológicas. Adicionalmente, a literatura sugere que estas moléculas poderiam estar envolvidas também em situações de patogênese. O objetivo geral deste projeto é entender os mecanismos moleculares envolvidos na interação que acontece entre a cana-de-açúcar e bactérias patogênicas. Para este fim, foram utilizadas plantas de cana-de-açúcar da variedade SP 70-1143 crescidas in vitro, as quais foram inoculadas com Acidovorax avenae ou Xanthomonas albilineans e mantidas durante uma semana. Após este tempo as plantas foram avaliadas fenotipicamente a fim de quantificar os sintomas da doença. Posteriormente foi extraído o RNA total das plantas, o qual foi utilizado para o estudo da expressão gênica dos microRNA da cana-de-açúcar. O RNA total de plantas tratadas e plantas controle foi extraído e seqüenciado mediante tecnologia Illumina, a fim de obter um panorama genômico da expressão diferencial entre plantas doentes vs. sadias. Vários microRNAs tiveram a sua expressão modulada na presença de bactérias patogênicas. Utilizando PCR em tempo real a modulação destes microRNAs foi confirmada. Mediante ferramentas bioinformáticas foi construída uma lista de genes alvo de regulação dos microRNAs modulados. Estes resultados sugerem que bactérias patogênicas em cana-deaçúcar provocam a resposta da maquinaria de silenciamento gênico responsável pela produção de microRNAs. Apoio financeiro: FAPERJ, CNPq e Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Fixação Biológica de Nitrogênio.