ortopesquisa Trabalho original Determinação dos microrganismos encontrados nos bráquetes de Alexander e autoligáveis Determination of microorganisms found in Alexander’s and self-ligating brackets Luís José Gonçalves da Silva* Fernanda Silva Mattos* Márcio Garcia da Silva** Adriano Marotta Araújo*** Eduardo César Werneck**** *Especialista em Ortodontia – IEPC. **Especialista em ortodontia – Centro Tecnológico da Aeronáutica – CTA/São José dos Campos; Professor do curso de Especialização – IEPC. ***Doutor em Ortodontia – Unesp/Araraquara; Professor do curso de Especialização – IEPC; Professor assistente doutor – FOSJC/Unesp. **** Doutorando em Ortodontia – São Leopoldo Mandic/Campinas; Coordenador do curso de Especialização – IEPC. Resumo - A instalação dos aparelhos ortodônticos fixos favorece o acúmulo de placa e dificulta a higienização levando a um aumento no número de microrganismos na cavidade bucal, através do aumento significativo do número de superfícies retentivas dos acessórios ortodônticos. Dentro deste contexto, o objetivo deste trabalho foi determinar a quantidade e o tipo de microrganismo encontrado nos bráquetes autoligáveis e nos de Alexander, em pacientes dos gêneros masculino e feminino, com idades entre 12 e 16 anos, para verificar o tipo de bráquete com o qual se tem um controle maior sobre as bactérias, diminuindo assim os microrganismos patogênicos da microflora bucal. Para tanto, foram analisados 20 pacientes tratados no Instituto de Ensino e Pesquisa de Cruzeiro, com bráquetes de Alexander e autoligáveis (dez com cada bráquete, sendo cinco de cada gênero para cada grupo). As coletas de placa da interface dente/bráquete dos incisivos laterais e dos segundos pré-molares superiores foram realizadas com 20, 24 e 28 semanas após a colagem dos bráquetes. Conclui-se não haver correlação estatística entre os bráquetes de Alexander e autoligáveis em relação a adesão e quantidade de microrganismos. Unitermos - Bactérias; Bráquetes ortodônticos; Aderência bacteriana. Abstract - The installation of orthodontic appliances allows bacteria’s plaque accumulation and leads to a difficult oral hygiene, increasing the number of microorganisms in oral cavity, through an increase in the number of retentive bonding orthodontic accessories. Within this context, the purpose of this study was to determine the amount and type of microorganisms found in self-ligating and Alexander’s brackets, in male and female patients, aged between 12 and 16, to check the type of brackets which has a greater control over the proliferation of the bacteria, reducing the pathogens microorganisms of the oral microflora. To this end, 20 patients were analyzed, treated at the Instituto de Ensino e Pesquisa de Cruzeiro, with Alexander and self-ligating brackets (10 with each bracket, and 5 of each gender for each group). The collect of the plaque in the interface tooth / bracket of the lateral incisors and second premolars were held with 20, 24 and 28 weeks after bond the brackets. It was concluded that there was no statistical correlation between Alexander and self ligating brackets in the bacterial adhesion and number of microorganisms. Key Words - Bacteria; Orthodontics brackets; Bacterial adhesion. Recebido em abr/2010 - Aprovado em maio/2010 OrtodontiaSPO | 2010;43(3):227-34 343 da Silva LJG | Mattos FS | da Silva MG | Araújo AM | Werneck EC Introdução se evitar efeitos lesivos no tecido gengival e no periodonto2. Alguns autores13 avaliaram a colonização das bactérias em Durante o tratamento ortodôntico o desenvolvimento 12 pacientes tratados com aparelhos fixos e relataram que o da placa dental pode estar associada a diversos fatores bráquete com ligadura elástica como elemento de fixação do ambientais e individuais incluindo a composição da dieta, fio exibiu uma maior quantidade de microorganismos na placa higiene oral, exposição ao flúor, quantidade e qualidade quando comparados aqueles com amarrilhos metálicos. da saliva, composição da microflora e fatores de imu- Dentro deste contexto, o objetivo deste trabalho foi de- nidade. Sabe-se que a quantidade de microrganismos terminar a quantidade e o tipo de microrganismo encontrado tende a elevar devido ao fato do bráquete reter resíduos e nos bráquetes autoligáveis e nos de Alexander, em pacientes favorecer o acúmulo de placa dificultando a manutenção dos gêneros masculino e feminino, com idades entre 12 e 16 da higiene oral. O acúmulo da placa bacteriana e a colo- anos, para verificar qual tipo é mais viável no sentido de se ter nização de bactérias dificultam a higienização, podendo um controle maior sobre as bactérias, diminuindo assim os resultar em descalcificação do esmalte dentário . microrganismos patogênicos da microflora bucal. 1 A cavidade oral é um ecossistema microbiológico que consiste em vários nichos que permitem a colonização de Material e métodos bactérias . Com a instalação da aparatologia fixa, novas 2-4 áreas propícias para colonização desses microrganismos são Para a realização deste trabalho utilizou-se 20 pacientes criados , através do aumento significativo do número de su- (dez do gênero masculino e dez do feminino) residentes na perfícies retentivas dos acessórios ortodônticos. Além disto, cidade de Cruzeiro-SP, tratados ortodonticamente com apara- a quantidade de carboidrato presente na placa dental também tologia fixa, sem exodontia, no Instituto de Ensino e Pesquisa aumenta tornando mais difícil a sua remoção . de Cruzeiro (IEPC), com idade entre 12 e 16 anos e dentição 15 5 Os bráquetes metálicos promovem mudanças ecológicas permanente. Nenhum paciente fazia uso de medicamentos no ambiente bucal através do decréscimo do pH e da alteração (sic). Todos os pacientes receberam instrução de higiene oral em quantidade e qualidade da placa bacteriana . Dentre as simplificada (IHOS). 6-8 diferenças na composição bacteriana da placa de pacientes que Foi realizada colagem direta com resina composta (Fill Ma- estão sendo tratados ortodonticamente pode-se destacar que, gic - Vigodent) dos bráquetes de Alexander (Abzil - 3M) em dez com o aumento do número de colônias, as bactérias tendem a pacientes (cinco de cada gênero) e dos bráquetes autoligáveis mover-se para um grupo mais patogênico . (GAC) nos outros dez (também cinco de cada gênero), ambos 9 O biofilme bacteriano é caracterizado por cocos gram- com encaixe 0.018” x 0.030”. A coleta da placa bacteriana a ser positivos, enquanto na placa maturada uma flora mais complexa analisada se deu após 20 (coleta 1), 24 (coleta 2) e 28 (coleta pode ser observada com microrganismos gram-negativos, 3) semanas da instalação dos bráquetes sendo que nesta última flagelos e algumas espiroquetas . As espécies mais presentes o acessório foi removido para a contagem dos microrganismos. associadas a mucosa bucal são os Streptococcus, sendo que Para as coletas 1 e 2 utilizou-se o mesmo explorador sendo os S. mitis e S. oralis são mais comuns nos tecidos moles, e que, a cada coleta, este era levado ao rubro. Após a coleta o os S. sanguis e S. gordonii estão presentes nos tecidos moles material foi acondicionado em solução salina em tubo de ensaio e na placa nas mesmas proporções . com brain heart infusion (BHI). 10 11 Os Streptococcus são microrganismos dominantes nas Na coleta 3, o bráquete foi removido e acondicionado em células epiteliais bucais de uma a duas vezes mais que outras tubos de ensaio para realizar a coleta da placa dental formada bactérias . A colonização por S. mutans e Lactobacillos é ao redor dos mesmos. A coleta foi realizada na região de inci- maior em dentes com aparatologia ortodôntica fixa do que em sivo lateral e pré-molar superior do lado direito. O material foi pacientes que não possuem nenhum dispositivo, aumentando mantido em temperatura ambiente em solução salina para que . suas características físico-químicas não se modificassem. Em Os Streptococcus obedecem a um receptor específico em sítios seguida, os pacientes foram cadastrados por números para que disponíveis nos constituintes salivares. Quando o nível salivar não houvesse nenhum problema de identificação. 7 o risco de desmineralização do esmalte e lesões de cáries 12-14 diminui, a adesão destes microrganismos também diminui A amostra, composta de placa bacteriana em meio de tubo juntamente com a colonização das bactérias aos aparelhos de BHI, foi encaminhada ao laboratório e submetida a semeadu- ortodônticos . Programas de conscientização de higiene antes ra por esgotamento em placas de Petri contendo ágar sangue do tratamento ortodôntico são estritamente recomendadas para através do uso da alça de platina, em câmara de fluxo laminar. 15 344 OrtodontiaSPO | 2010;43(3):227-34 ortopesquisa As placas foram incubadas em estufa a 35ºC, enriquecida com CO2, por aproximadamente 18 horas. Resultados Inicialmente, as colônias sugestivas gram-negativas foram As bactérias encontradas segundo a análise laboratorial identificadas pelo método de Rugai (Newprov), e em caso de encontram-se na Tabela 1. Observando-a, podemos verificar identificação duvidosa, submetidas a análise pelo equipamento que as maiores quantidades de bactérias presentes na placa Mini API – Biomeriex. As colônias com aspectos sugestivos de bacteriana nas coleta 1, 2 e 3 foram respectivamente os Estafilococos foram submetidas aos testes de Catalase e a Streptococcos Grupo D, as Pseudomonas spp e a Escherichia Aglutinação (Staph-test). Já as sugestivas de Estreptococos coli , sendo esta última a que teve maior frequência nos três foram submetidas as seguintes análises: catalase, tipo de períodos analisados. hemólise (alfa, beta, gama), testes de PYR, bile escuna, NaCl As bactérias mais observadas foram separadas em dois 6.5%, sensibilidade à bacitracina, sulfametazol-trimetoprima e grupos de acordo com o bráquete utilizado (Alexander e auto- optoquina. ligável), conforme a Tabela 2. As bactérias com perfil de identificação não esclarecido Após obtenção das bactérias mais frequentes nos dois pelas técnicas supracitadas foram encaminhadas a laboratório tipos de bráquetes observados, foi aplicado o teste qui-quadrado microbiológico de referência (Fleury Medicina Diagnóstica), para cada espécie, sendo que o resultado não foi estatisticamen- composta de bráquete imerso em tubo contendo 0,9 ml de te significante, ou seja, os pacientes que usam elástico como solução salina (NaCl 0.9%). meio ligação têm a mesma tendência para adquirir bactérias Utilizando-se pipeta semiautomática, foram transferidos do que aqueles que usam bráquetes autoligáveis (Tabela 3). 100 microlitros (µl) da solução salina semeada para os tubos contendo BHI e realizada diluição seriada (1;10,1;100;1;000, 1;10000,1;100000,1;1000000.), em câmara de fluxo laminar. Os tubos contendo as diluições foram incubados em estufa a 37ºC por aproximadamente 18 horas. Efetuada a leitura visual, observando-se a presença de TABELA 2 - BACTÉRIAS OBSERVADAS NOS DIFERENTES TIPOS DE BRÁQUETES UTILIZADOS (ALEXANDER E AUTOLIGÁVEL) Tipo de bráquete: Alexander Autoligável turvação dos meios BHI, obteve-se a diluição até a qual houve Tipos de bactérias: crescimento bacteriano e, portanto, a contagem de colônias. Escherichia coli 7 9 A análise estatística foi realizada para as bactérias de maior Klebsiella spp 2 5 relevância, pela aplicação do qui-quadrado (x²), com nível de Stafilococcos epidermidis 7 4 Lactobacillus sp 4 2 Streptococcos grupo D 3 6 Stafilococcos aureus 1 0 Streptococcos equinus 0 1 Frequência de bactérias por tipo de bráquete 24 27 significância 0,05. TABELA 1 - BACTÉRIAS MAIS ENCONTRADAS NA COLETA DO MATERIAL DA INTERFACE DENTE X BRÁQUETE Tempo de coleta tipo de bactérias 20 semanas 24 semanas 28 semanas Coryne bactérium sp 0 1 0 Pseudomonas spp 0 6 0 Aeromonas 0 1 1 Escherichia coli 5 5 6 Klebsiella spp 2 1 4 Stafilococcos epidermidis 3 3 5 Lactobacillus sp 3 2 1 Streptococcos grupo D 7 0 2 Stafilococcos aureus 0 0 1 Streptococcos equinus 0 1 Total de pacientes 20 20 TABELA 3 - TESTE QUI-QUADRADO PARA AS BACTÉRIAS MAIS OBSERVADAS (VALORES DE P) Tipos de bactérias: Valores de p Escherichia coli 1,25 Klebsiella spp 1,98 0 Stafilococcos Epidermidis 1,82 20 Streptococcos grupo D 1,82 OrtodontiaSPO | 2010;43(3):227-34 345 da Silva LJG | Mattos FS | da Silva MG | Araújo AM | Werneck EC Discussão Deve-se destacar A aparatologia ortodôntica fixa aumenta o número de superfícies retentivas aumentando a aderência da placa bacteriana . que os pacientes que O acúmulo de placa pode resultar na descalcificação do esmal- apresentavam bactérias 5,8 te16 e, consequentemente, aumentar o risco de desenvolvimento de lesões de cárie7,17-19. Pacientes tratados ortodonticamente consideradas patogênicas tem composição da placa bacteriana diferenciada em relação não apresentaram nenhum aqueles sem aparatologia6, sendo maior a colonização por distúrbio de saúde a ponto de Streptococos mutans e Lactobacillos, por exemplo, que pro- se levantar o questionamento movem a desmineralização do esmalte12-14. Neste estudo foram encontrados diversos tipos de bacté- sobre determinada doença rias, sendo as de maior frequência: Klebsiella ssp, S. Epider- causada por um determinado midis, E. Coli, S. Epidermidis, S. Grupo D, dentre outras. As bactérias mais observadas foram separadas em dois grupos patógeno. No entanto, cabe de acordo com o bráquete utilizado (Alexander e autoligável) e ressaltar a importância de foram submetidas a uma nova contagem. orientações preventivas não Após a contagem, aplicou-se o teste qui-quadrado para as bactérias com maior frequência encontradas nas coletas só no sentido de orientação de 20, 24 e 28 semanas, tendo verificado que os pacientes de escovação, mas questões que utilizam elásticos como meio de retenção têm a mesma tendência para adquirir bactérias [E. Coli (1,25), Kleibsiella spp de assepia de um modo geral (1,98), S. Epidermidis (1,82) e S. Grupo D (1,82)]. devem ser mencionadas e Alguns estudos relatam que o elástico como elemento de os pacientes devem receber fixação exibe uma maior quantidade de microrganismos na placa colhida, quando o mesmo é comparado ao bráquete com fio uma orientação quando de amarrilho como elemento de fixação13. Porém, as pesquisas da instalação do aparelho sobre os materiais e métodos de ligação fio/bráquete ainda ortodôntico. são pouco realizadas4. Deve-se destacar que os pacientes que apresentavam bactérias consideradas patogênicas não apresentaram nenhum distúrbio de saúde a ponto de se levantar o questionamento sobre determinada doença causada por um determinado patógeno. No entanto, cabe ressaltar a importância de orientações Viridans apareceram em menor quantidade devido ao fator de maturação da placa. preventivas não só no sentido de orientação de escovação, mas • Não houve correlação estatística entre os bráquetes de questões de assepia de um modo geral devem ser menciona- Alexander e os bráquetes autoligáveis no que diz respeito a das e os pacientes devem receber uma orientação quando da adesão e quantidade de microrganismos. instalação do aparelho ortodôntico. • A quantidade de microrganismos encontrada em ambos foi superior a 1.000.000 (um milhão de colônias), não havendo Conclusão correlação estatística para evidenciar alguma diferença com relação a quantidade de microrganismos entre um tipo ou Com base nos resultados obtidos no período pesquisado para a determinação dos microrganismos encontrados nos bráquetes de Alexander e nos bráquetes autoligáveis, podemos concluir que: • A porcentagem de microrganismos gram-negativos foi superior em todos os casos. Já os Streptococcus do grupo 346 outro. Endereço para correspondência: Eduardo César Werneck Av. Nesralla Rubez, 1.324 12710-070 – Cruzeiro – SP Tel./Fax: (12) 3144-4255 [email protected] OrtodontiaSPO | 2010;43(3):227-34 ortopesquisa Referências 1. Corbett JA, Brown LR, Keene HJ, Horton IM. Comparison of Streptococcus mutans concentrations in non-banded and banded orthodontic patients. J Dent Res 1991;60(12):1936-42. 2. Lundstrom F, Hamp SE. Effect of oral hygiene education on children with and without subsequent orthodontic treatment. Scand J Dent Res 1980;88(1):53-9. 3. Quirynen M, de Soete M, Dierickx K, Van Steenberghe D. The intra oral translocation of periodontopathogens jeopardizes the outcome of periodontal therapy. A review of the literature. J Clin Periodontol 2001;28(6):499-507. 4. Sukontapatipark W, el-Agroudi MA, Selliseth NJ, Thunold K, Selvig KA. Bacterial colonization associated with fixed orthodontic appliances. A scanning electron microscopy study. 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